肌萎縮側(cè)索硬化患者血清和腦脊液中IGF-1水平相關(guān)性研究

王永會, 張軍玲

(山東省青州市人民醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)二科, 山東 青州, 262500)

肌萎縮側(cè)索硬化(ALS)是一種神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，患者起病較為緩慢，且呈進(jìn)行性發(fā)展。隨著病情的發(fā)展，患者逐漸出現(xiàn)四肢無力，肌肉萎縮。近年來的研究[1-2]表明，胰島素生長因子-1(IGF-1)具有保持神經(jīng)系統(tǒng)整體性和同質(zhì)性的作用，臨床上可以用于神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病的診斷與治療，但是關(guān)于其在ALS患者血清、腦脊液中的研究較為少見。本研究通過分析ASL患者血清和腦脊液中IGF-1水平的變化，以期進(jìn)一步探討兩者的相關(guān)性，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年3月—2010年6月本院神經(jīng)內(nèi)科收治的ALS患者36例為A組，其中男22例，女14例，年齡34～74歲，平均(50.6±10.5)歲；按照性別和年齡匹配本院體檢正常者36例為B組(對照組)，其中男22例，女14例，年齡34～77歲，平均(50.7±11.6)歲。同時隨機(jī)選取40例ALS患者為C組(包括A組36例患者)，其中男22例，女18例，年齡34～77歲，平均(50.0±10.5)歲；按照性別和年齡匹配40例門診和住院患者為D組(對照組)，均經(jīng)腦脊液常規(guī)檢查和細(xì)胞學(xué)檢查未發(fā)現(xiàn)明顯異常。

采用ElEscorial[3]標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行ALS診斷: ① 臨床、肌電圖或神經(jīng)病理學(xué)檢查顯示下運(yùn)動神經(jīng)元有損害; ② 臨床檢查有上運(yùn)動神經(jīng)元損害的證據(jù); ③ 癥狀或體征在1個部位內(nèi)出現(xiàn)進(jìn)行性擴(kuò)展或擴(kuò)展到其他部位。排除標(biāo)準(zhǔn): ① 有能解釋上運(yùn)動神經(jīng)元和(或)下運(yùn)動神經(jīng)元損害的其他疾病的電生理依據(jù); ② 有能解釋臨床體征和電生理特點(diǎn)的其他疾病的神經(jīng)影像學(xué)依據(jù)4組均排除代謝性疾病、營養(yǎng)不良、肝腎疾病、急性感染、腫瘤。

1.2 方法

1.2.1 血清和腦脊液采集：抽取A、B 2組清晨空腹血，在室溫下放置2 h后進(jìn)行10 min離心，取上清液進(jìn)行分裝，于-80 ℃保存。

經(jīng)患者同意并簽署知情同意書后，留取C、D 2組腦脊液樣本，立刻對樣本進(jìn)行10 min離心，將上清液分裝，于-80 ℃保存，排除混有紅細(xì)胞的腦脊液。

1.2.2 IGF-1測定：采用美國DSL試劑公司生產(chǎn)的酶聯(lián)免疫吸附試劑盒及二步擴(kuò)大三明治型免疫測量法。試劑盒敏感度為0.01 ng/mL，且與IGF-2、生長激素、胰島素?zé)o交叉反應(yīng)。嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行操作，包括預(yù)實(shí)驗(yàn)。采用光譜光密度檢測儀，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品測量值畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出樣品中IGF-1含量。

1.3 觀察指標(biāo)

采用酶聯(lián)免疫吸附法測定4組血清和腦脊液樣中IGF-1含量，并對A、C 2組含量進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1 A、B 2組血清中IGF-1濃度比較

A、B 2組血清中IGF-1濃度分別為(158.0±71.0) ng/mL和(143.9±37.1) ng/mL, 2組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 C、D 2組腦脊液中IGF-1濃度比較

C、D 2組腦脊液中IGF-1濃度分別為(26.6±2.6) ng/mL和(27.2±1.9) ng/mL, 2組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

2.3 血清和腦脊液中IGF-1濃度相關(guān)性分析

對A、C 2組患者IGF-1濃度進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析，結(jié)果顯示相關(guān)系數(shù)為0.2091, 呈負(fù)相關(guān)，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05), 表明ALS患者血清和腦脊液中IGF-1濃度不呈線性相關(guān)。

3 討 論

ALS是一種常見的慢性進(jìn)行性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，可導(dǎo)致患者死于呼吸衰竭，且可分為家族型和散發(fā)型2種[4]。目前，較為認(rèn)同的病因?qū)W說為運(yùn)動神經(jīng)元缺乏必要的營養(yǎng)因子，導(dǎo)致神經(jīng)元變性和神經(jīng)元所支配的肌肉發(fā)生萎縮[5]。因此，在應(yīng)用神經(jīng)營養(yǎng)因子治療ALS的過程中要保持神經(jīng)元結(jié)構(gòu)的完整性，并給予IGF-1治療。

IGF-1屬于多肽激素家族，又稱為生長調(diào)節(jié)素C，由70個氨基酸單鏈多肽組成。人體中編碼IGF-1的基因位于12號染色體上，由6個外顯子組成。在機(jī)體內(nèi)主要由肝臟合成和分泌IGF-1，這個過程受生長激素的調(diào)節(jié)，且被運(yùn)輸?shù)狡渌鞴侔l(fā)揮作用。在成年人大腦中, IGF-1以自分泌或旁分泌的方式發(fā)揮作用。離體實(shí)驗(yàn)[6]表明, IGF-1可以保護(hù)運(yùn)動神經(jīng)元，同時可抑制神經(jīng)元的凋亡。此外，還具有減緩ALS疾病病情惡化的功能[7]。本研究在排除年齡和性別影響后，在相同條件下測量患者和健康對照組血清中IGF-1濃度，結(jié)果表明2組IGF-1濃度比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，這與國外文獻(xiàn)報道一致[8]。本研究中，在測量血清中的IGF-1濃度時出現(xiàn)較大的個體差異，考慮原因可能是肝臟具有強(qiáng)大的代償能力，造成疾病早期血清中IGF-1濃度發(fā)生變化，到疾病終末期時IGF-1已耗竭，濃度明顯降低。

Bilic等[9]比較了35例患有運(yùn)動神經(jīng)元疾病者和40例健康對照者腦脊液中IGF-1的含量，發(fā)現(xiàn)患有運(yùn)動神經(jīng)元疾病者IGF-1含量明顯減少。但本研究結(jié)果顯示，C、D 2組腦脊液中IGF-1濃度比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，因此該研究結(jié)果還需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量繼續(xù)觀察。Prahalada等[10]測定了人腦脊液和血清中IGF-1的含量，發(fā)現(xiàn)腦脊液和血清中IGF-1含量不同，但兩者并無相關(guān)性。本研究結(jié)果亦顯示，ALS患者血清和腦脊液中IGF-1濃度不呈線性相關(guān)，這與Prahalada等[10]研究結(jié)果一致，考慮可能與血清中IGF-1不能通過血腦屏障而進(jìn)入腦脊液，而腦脊液中的IGF-1主要來源于中樞神經(jīng)系統(tǒng)有關(guān)[11-12]。

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