乳沒鎮(zhèn)痛膠囊鎮(zhèn)痛作用的實驗研究＊

楊曉媛 薛利華 王維英 邵燕燕 黃 偉 陳順合 西安市中醫(yī)醫(yī)院（西安710001）

乳沒鎮(zhèn)痛膠囊是國家級名老中醫(yī)姚樹錦主任醫(yī)師集50余年臨床經(jīng)驗總結(jié)出的治療各種疼痛證屬瘀血阻滯的經(jīng)驗方，本方由乳香、沒藥、細辛、血竭等組成，具有活血定痛，祛瘀通絡(luò)，消腫散結(jié)之功，臨床廣泛用于類風濕性關(guān)節(jié)炎、退行性骨關(guān)節(jié)炎、強直性脊柱炎、癌腫、跌打損傷等周身肌肉關(guān)節(jié)腫脹疼痛。本研究通過動物鎮(zhèn)痛實驗，觀察乳沒鎮(zhèn)痛膠囊的鎮(zhèn)痛作用，為該藥的臨床應(yīng)用提供藥理學依據(jù)。

1 實驗材料 1．1 受試藥物 乳沒鎮(zhèn)痛膠囊（批號：20121023，西安市中醫(yī)醫(yī)院制劑科）；1g藥粉相當5g原生藥。臨床人用量：每d服1～2粒，3次1d，每粒裝0．5g，體重按60 kg計，每公斤體重服藥量0．05g。換算成生藥0．25g／kg。每粒含血竭約0．233g。

1．2 陽性藥物 鹽酸嗎啡注射液（國藥準字號：H20013351；成份：鹽酸嗎啡；沈陽第一制藥廠，規(guī)格：1mL：10mg，批號：710401，使用前以蒸餾水配制成1mg／mL的鹽酸嗎啡溶液。

1．3 實驗動物 ICR小鼠，由西安交通大學醫(yī)學院實驗動物中心提供，體重18～22g，實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK-（陜）2007-001，動物質(zhì)量合格證號：NO．0012001。

1．4 試 劑 冰醋酸：批號：880512西安化學試劑廠。

1．5 儀器 電子天平：型號：AL104，精確度：0．1mg，METTLER TOLEDO生產(chǎn)；電子天平：型號：YP1201N 精確度：0．1g，上海精密科學儀器有限公司。YLS-6A智能熱板儀出廠編號：004060129山東省醫(yī)學科學院設(shè)備站。

2 實驗方法 劑量設(shè)置：人臨床服藥量0．05g／kg，換算成生藥0．25g／kg。經(jīng)預試確定小鼠給藥劑量乳沒鎮(zhèn)痛膠囊高、中、低分別為7．50g生藥／kg、3．75g生藥／kg、1．875g生藥／kg，分別相當臨床人用量的30、20、10倍；

2．1 小鼠醋酸扭體實驗 參考文獻［1，2］方法，取小鼠50只，體重18～22g，隨機分為5組，每組10只，雌雄各半。第1組為空白對照組，灌胃蒸餾水10ml／kg；第2組為陽性對照組，鹽酸嗎啡注射液皮下注射10mg／kg（僅試驗當天皮下注射，其余灌胃蒸餾水10ml／kg）；第3～5組灌胃乳沒鎮(zhèn)痛膠囊7．50g生藥／kg、3．75g生藥／kg及1．875g生藥／kg；連續(xù)5d，末次給藥后30min，腹腔注射0．8%冰醋酸 0．2mL／鼠，5min 后，計數(shù)15min內(nèi)小鼠扭體次數(shù)（腹部收縮內(nèi)凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行）。

2．2 小鼠熱板法鎮(zhèn)痛實驗 參考文獻［2～4］方法，取體重18～22g雌性小鼠65只，將雌性小鼠置于（55±0．5）℃的YLS-6A智能熱板儀熱板上，記錄自其足底接觸熱板至出現(xiàn)舔后足的時間（S，熱板反應(yīng)潛伏期）作為痛閾指標。測定正常痛閾值2次，取平均值為基礎(chǔ)痛閾，先剔除反應(yīng)潛伏期≥30s或≤5s或中間跳躍者，選痛閾值在5s至30s小鼠50只，按痛閾值隨機分為5組，第1組為空白對照組，灌胃蒸餾水10mL／kg；第2組為陽性對照組，鹽酸嗎啡注射液皮下注射10mg／kg（僅試驗當天皮下注射，其余灌胃蒸餾水10mL／kg）；第3～5組灌胃乳沒鎮(zhèn)痛膠囊7．50g生藥／kg、3．75g生藥／kg及1．875g生藥／kg；連續(xù)灌胃5d，末次給藥后30min、60min、90min、120min、180min將小鼠置于（55±0．5）℃的熱板上測定疼痛耐受時間，如果小鼠置熱板上60s仍不舔后足，立即取出，以60s計算。

3 結(jié) 果 3．1 乳沒鎮(zhèn)痛膠囊對冰醋酸致小鼠疼痛的影響 結(jié)果見表1。

表1 乳沒鎮(zhèn)痛膠囊對冰醋酸致小鼠疼痛的影響（±s）

表1 乳沒鎮(zhèn)痛膠囊對冰醋酸致小鼠疼痛的影響（±s）

注：與空白對照組比較△P＜0．05 ▲P＜0．01

組 別 劑 量 動物數(shù) 扭體次數(shù) 抑制率（%）10 78．60±14．05鹽酸嗎啡組 10mg／kg 10 2．40±4．48▲ 96．95乳沒鎮(zhèn)痛膠囊 7．50g生藥／kg 10 52．00±12．57▲ 33．84乳沒鎮(zhèn)痛膠囊 3．75g生藥／kg 10 55．80±11．55▲ 29．01乳沒鎮(zhèn)痛膠囊 1．875g生藥／kg 10 60．30±14．89△空白對照組-23．28

表1可見，乳沒鎮(zhèn)痛膠囊7．5g生藥／kg、3．75g生藥／kg、1．875g生藥／kg及鹽酸嗎啡注射液組10mg／kg可明顯減少小鼠冰醋酸扭體次數(shù)，表明乳沒鎮(zhèn)痛膠囊對化學刺激有明顯鎮(zhèn)痛作用。

3．2 乳沒鎮(zhèn)痛膠囊對小鼠熱刺激反應(yīng)的影響 （熱板法）結(jié)果見表2。

表2 乳沒鎮(zhèn)痛膠囊對小鼠熱刺激反應(yīng)的影響（±s，n=10）

表2 乳沒鎮(zhèn)痛膠囊對小鼠熱刺激反應(yīng)的影響（±s，n=10）

注：與空白對照組比較△P＜0．05▲P＜0．01

痛閾值（s）30min 60min 90min 120min 180min空白對照組 - 13．52±4．46 13．73±4．67 13．98±4．45 14．37±4．1組 別 劑量g生藥／kg 藥前平均值1 14．53±3．75 14．38±4．28鹽酸嗎啡組 10mg／kg 13．68±4．39 29．84±9．99▲ 26．25±6．62▲ 25．40±8．94▲ 20．04±5．38△ 18．19±6．43大劑量組 7．5 13．63±3．98 18．78±5．44＊ 22．40±6．66＊＊ 21．09±5．45▲ 20．37±5．07▲ 18．74±4．75△中劑量組 3．75 13．65±3．95 18．48±6．79 21．31±6．94＊ 20．95±5．53▲ 20．22±5．59△ 18．10±4．04小劑量組 1．875 13．62±3．96 16．95±2．98 19．78±5．84＊ 20．00±5．00△ 18．37±3．59△17．21±3．90

表2可見，嗎啡組和乳沒鎮(zhèn)痛膠囊7．50g生藥／kg、3．75g生藥／kg及1．875g生藥／kg均較對照組明顯升高痛閾值，給藥后30min～90min，嗎啡組明顯升高痛閾值（P＜0．01），但僅持續(xù)至120min（P＜0．05）。乳沒鎮(zhèn)痛膠囊高劑量組給藥30min顯效，至90min～120min乳沒鎮(zhèn)痛膠囊3個劑量組均顯效（P＜0．05或P＜0．01），高劑量組持續(xù)至180min（P＜0．05）。提示乳沒鎮(zhèn)痛膠囊對熱刺激有明顯鎮(zhèn)痛作用。

4 討 論 疼痛已成為危害人類健康的主要“殺手之一”，也是造成人們勞動能力降低和出勤日減少的最普通、最直接的因素。乳沒鎮(zhèn)痛膠囊組方中含有乳香、沒藥、血竭、細辛等藥物?，F(xiàn)代藥理研究表明：乳香、沒藥具有較強的鎮(zhèn)痛作用及抗炎作用，其主要成分在揮發(fā)油中。乳香鎮(zhèn)痛作用的主要成分為乙酸辛酯，沒藥揮發(fā)油中主要含單萜和倍半萜類化合物，具有強烈鎮(zhèn)痛作用［5］。血竭有“活血圣藥”之稱，研究發(fā)現(xiàn)血竭主要含有黃酮類、皂苷類、芪類、酚類、酯類等成分；具有抗炎鎮(zhèn)痛，活血散瘀、止血抗菌等藥理作用［7～8］。細辛主要成分含揮發(fā)油，油中含丁香油酚甲醚、優(yōu)藏茴香酮、大黃樟醚、β-蒎烯、細辛醚、細辛酮。另含N-異丁基十二碳四烯胺及消旋去甲烏藥堿等?，F(xiàn)代藥理學研究表明細辛具有解熱鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、中樞抑制、局部麻醉等多種藥 理作用［9，10，11，13］。 細 辛 揮 發(fā) 油 有 顯 著 抗 炎 作 用 ，對 多 種 原因所致的大鼠關(guān)節(jié)腫脹有明顯的抑制作用［10，12］。

本研究采用不同動物模型觀察了乳沒鎮(zhèn)痛膠囊的鎮(zhèn)痛作用，實驗結(jié)果表明：冰醋酸致小鼠扭體反應(yīng)試驗顯示乳沒鎮(zhèn)痛膠囊各劑量組可明顯減少小鼠冰醋酸扭體次數(shù)，與空白對照組相比，差異顯著（P＜0．05或P＜0．01），表明乳沒鎮(zhèn)痛膠囊具有較強的鎮(zhèn)痛作用；在小鼠熱刺激反應(yīng)中乳沒鎮(zhèn)痛膠囊各劑量組小鼠痛閾值明顯升高，與空白對照組相比，差異顯著（P＜0．05或P＜0．01），表明乳沒鎮(zhèn)痛膠囊具有較強的鎮(zhèn)痛作用，且鎮(zhèn)痛時間隨著給藥劑量的增加而延長。

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