Nrf2在膿毒癥急性肝損傷（ALI）中的作用機制研究

諶韋洪

珠海市人民醫(yī)院急診科，廣東珠海519000

Nrf2在膿毒癥急性肝損傷（ALI）中的作用機制研究

諶韋洪

珠海市人民醫(yī)院急診科，廣東珠海519000

目的探討與分析Nrf2（核因子相關(guān)因子）在ALI（膿毒癥急性肝損傷）中的作用機制，旨在為膿毒癥的防治提供指導依據(jù)。方法將2010年9月—2013年9月于我院接受治療的40例膿毒癥急性肝損傷患者作為研究對象，以數(shù)字隨機法將其分為對照組與觀察組各20例，于術(shù)后不同時間點采集患者血清樣本，分離血清，同時采集患者病理組織，測定其Nrf2表達水平。結(jié)果①觀察組患者血清內(nèi)ALT水平升高幅度較低，改善情況相對來說比較明顯，觀察組患者在治療2 d后血清內(nèi)ALT水平降低至（162.44±6.52）IU/L，明顯低于對照組的（262.43±6.96）IU/L，P＜0.05；②觀察組患者不同時間段內(nèi)病理組織中Nrf2表達水平相較對照組而言，2 d后為（0.31±0.02）uL，升高幅度較為顯著，P＜0.05。結(jié)論Nrf2在膿毒癥急性肝損傷中有其關(guān)鍵的抗氧化應(yīng)激作用，可將其作為膿毒癥防治的重要判定指標。

核因子；膿毒癥；急性肝損傷；Nrf2

膿毒癥主要由感染相關(guān)因子所引起，是全身炎癥的綜合反應(yīng)，是復雜的全身性病理過程，其發(fā)病機制相對來說比較復雜，同時其臨床治療也存在一定的難度[1]。據(jù)相關(guān)統(tǒng)計報告顯示，我國最近幾年來，膿毒癥的發(fā)病率與死亡率呈逐年上升的趨勢，且臨床領(lǐng)域尚未總結(jié)出針對膿毒癥急性肝損傷的有效干預(yù)措施[2]。基于此，為進一步研究Nrf2在膿毒癥急性肝損傷中的作用機制，明確其表達規(guī)律，我院將最近幾年來收治的40例ALI患者作為研究對象，進行了前瞻性研究分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年9月—2013年9月于我院接受治療的40例膿毒癥急性肝損傷患者作為研究對象。按照隨機數(shù)字法將其分為對照組與觀察組各20例。對照組患者中男性12例，女性8例；年齡在47～82歲之間，平均年齡（62.3±2.3）歲。觀察組患者中男性14例，女性6例；年齡在44～79歲之間，平均年齡（61.2±3.3）歲。納入研究的兩組患者均符合膿毒癥急性肝損傷疾病的診斷標準[3]，且兩組患者在性別、年齡等一般資料的對比上并無明顯差異（P＞0.05），具有較強的可比性。

1.2 一般方法

對觀察組患者于術(shù)后在其腹腔內(nèi)注入姜黃素，嚴格根據(jù)患者體質(zhì)量確定給藥劑量，一般為100 mg/kg。對對照組則注射同等劑量的生理鹽水。分別于術(shù)后6 h、12 h、1 d、2 d采集患者血清，從其肋間心尖搏動最強處進針采血，并分離血清，測定其肝功能狀況。同時在手術(shù)過程中，取患者腹腔內(nèi)部所分裂的肝臟病理組織，置入

溫度在-80℃的環(huán)境下存儲，并選用蛋白質(zhì)印跡法測定患者肝臟組織中的Nrf2表達水平。同時取病理組織的10%，使用中性甲醛固定，行石蠟包埋，切片，染色后，觀察其肝臟組織的病理改變情況，同時記錄不同時間段兩組患者血清內(nèi)ALT（丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶）水平的變化情況。

1.3 統(tǒng)計學方法

選用統(tǒng)計學軟件SPSS 19.0對上述匯總數(shù)據(jù)進行分析和處理，計量資料選用±s）表示，組間對比進行t檢驗，以P＜0.05時為有顯著性差異和統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者不同時間段血清內(nèi)ALT水平比較

兩組患者血清內(nèi)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平伴隨著時間的推移在逐漸升高，但相較對照組患者而言，觀察組患者血清內(nèi)ALT水平升高幅度較低，改善情況相對來說比較明顯，觀察組患者在治療2 d后血清內(nèi)ALT水平降低至（162.44±6.52）IU/L，明顯低于對照組的（262.43±6.96）IU/L，兩組數(shù)據(jù)相較，差異顯著，P＜0.05，詳細情況如表1所示。

表1 兩組患者不同時間段血清內(nèi)ALT水平比較（±s）

表1 兩組患者不同時間段血清內(nèi)ALT水平比較（±s）

組別例數(shù)ALT(IU/L) 6h 12h 1d2d對照組觀察組20 20 tP 87.22±4.12 65.65±2.42 43.247＜0.05 122.74±5.41 99.11±2.21 52.697＜0.05 184.14±5.32 133.38±3.74 46.214＜0.05 262.43±6.96 162.44±6.52 56.247＜0.05

2.2 兩組患者不同時間段病理組織中Nrf2蛋白水平比較

觀察組自6 h后，病理組織中Nrf2蛋白水平逐漸上升，但在1 d后有所下降，觀察組患者不同時間段內(nèi)病理組織中Nrf2表達水平相較對照組而言，升高幅度較為顯著，P＜0.05，詳細情況如表2所示。

表2 兩組患者不同時間段病理組織中Nrf2蛋白水平比較（s）

表2 兩組患者不同時間段病理組織中Nrf2蛋白水平比較（s）

組別例數(shù)Nrf2蛋白（uL）6h 12h 1d2d觀察組對照組20 20 tP 0.51±0.02 0.24±0.02 49.286＜0.05 0.91±0.01 0.51±0.02 31.287＜0.05 0.87±0.02 0.11±0.02 56.924＜0.05 0.31±0.02 0.21±0.01 36.698＜0.05

3 討論

膿毒癥常見于嚴重創(chuàng)傷、燒傷、休克及大型外科手術(shù)并發(fā)癥中，同時也是引起多臟器官受損的主要原因。據(jù)相關(guān)統(tǒng)計結(jié)果顯示，嚴重性膿毒癥所致死亡率高達55%，且呈現(xiàn)顯著逐年上升的態(tài)勢[4]。因此，強化對膿毒癥的研究對降低疾病所致死亡率有十分重要的臨床意義。

Nrf2屬于在轉(zhuǎn)錄因子中的一種，是氧化應(yīng)激的敏感性感受器，同時也是人體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的重要轉(zhuǎn)錄因子，是抗氧化應(yīng)急的重要部分。一般在正常情況下，Nrf2主要以異源二聚體形式存于人體細胞質(zhì)中，并在激活后，與其抑制物相關(guān)的蛋白分離，并進入人體細胞核內(nèi)，與Maf蛋白產(chǎn)生合成反應(yīng)，并構(gòu)成異二聚體，激活病理基因的表達[5]。但人體內(nèi)Nrf2表達水平失衡，缺失或出現(xiàn)激活障礙，則可能加重細胞毒性，導致細胞功能出現(xiàn)障礙，甚至凋亡[6-7]。

在本組研究中，兩組患者血清內(nèi)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平伴隨著時間的推移在逐漸升高，但相較對照組患者而言，觀察組患者血清內(nèi)ALT水平升高幅度較低，改善情況相對來說比較明顯，觀察組患者在治療2 d后血清內(nèi)ALT水平降低至（162.44±6.52）IU/L，明顯低于對照組的（262.43±6.96）IU/L，兩組數(shù)據(jù)相較，差異顯著。觀察組患者病理組織中Nrf2蛋白水平，在術(shù)后1d內(nèi)明顯上生，同時在24 h后，有緩慢下降的表現(xiàn)，同時提示，激烈的氧化應(yīng)激反應(yīng)可能對患者的內(nèi)源性保護系統(tǒng)產(chǎn)生影響，降低患者細胞核內(nèi)Nrf2水平，使其轉(zhuǎn)錄活性降低。同時由于膿毒癥患者肝臟組織內(nèi)積累了大量的毒素，兩者共同作用于患者的炎癥細胞，則可能導致不同種類的炎癥介質(zhì)產(chǎn)生表達反應(yīng)，進而增加了人體肝組織中Nrf2的表達。由此可知，Nrf2在膿毒癥急性肝損傷中有其關(guān)鍵的抗氧化應(yīng)激作用，可將其作為膿毒癥防治的重要判定指標。

[1]胡勇,張愛華,黃曉欣，等.Nrf2和Keapl mRNA表達在燃煤型砷中毒肝損傷中作用[J].中國公共衛(wèi)生,2012,28(6):780-782.

[2]邱萍,劉平平,孔德松，等.復方銀杏制劑對急性酒精性肝損傷小鼠的防護作用及其機制[J].中國藥理學與毒理學雜志,2014(3):373-379.

[3]許偉華,Tobias A Beyer,楊法林，等.膽總管結(jié)扎所致肝損傷中Nrf2對細胞信號傳導和基因表達的影響[J].山東大學學報（醫(yī)學版）,2010,48 (10):39-43,72.

[4]孫健.Nrf2與肝細胞凋亡在非酒精性脂肪性肝病小鼠中的作用及相互關(guān)系[D].山東大學,2011.

[5]李曉沖.小鼠NAFLD模型建立及Nrf2缺失對肝臟中CYP2A5表達的影響[D].東北農(nóng)業(yè)大學,2013.

[6]黃中偉.膿毒癥大鼠肺損傷演變與炎癥因子變化關(guān)系[C].//2013北京協(xié)和急診醫(yī)學國際高峰論壇論文集，2013:458-458.

[7]李晶菁,張霞,陳瑜，等.N rf2在膿毒癥大鼠肝組織中的表達及姜黃素的干預(yù)作用[J].重慶醫(yī)學,2013(24):2873-2876.

Nrf2 in acute liver injury in sepsis(ALI)study in the mechanism of action

ZHAN Weihong
Emergency department of Zhuhai People's Hospital，Guangdong 519000，China

ObjectiveTo investigate and analysis of Nrf2(nuclear factor ALI(factor)on acute liver injury in sepsis sepsis)in the mechanism of action,and provide guidance to prevention and treatment for sepsis.Methods40 cases of acute liver damage in patients with sepsis from 2010 September to 2013 September in our hospital as the research object,by randomly divided into control group and observation group with 20 cases in each group,at different postoperative time points were collected serum samples collected at the same time,separation of serum,pathological tissue of patients,determination the expression level of Nrf2.ResultsThe observation group ALT level in the sera of patients with increasing amplitude was low,to improve the situation is relatively obvious,the patients in observation group were reduced,serum levels of ALT after 2D treatment to(162.44±6.52)IU/L,significantly lower than the control group(262.43±6.96)IU/L,P＜0.05.The observation group patients in different period of pathological tissue levels of Nrf2 expression compared with the control group,2D was(0.31±0.02)uL,increased significantly,P＜0.05.ConclusionNrf2 is the key of oxidative stress in acute liver injury in sepsis,which can be used as an important index to judge the prevention and treatment of sepsis.

Nuclear factor;Sepsis;Acute liver injury;Nrf2

R394

A

1672-5654（2014）09（c）-0003-02

2014-07-02）

諶韋洪（1963-），男，本科，副主任醫(yī)師，研究方向：急診醫(yī)學。