TGF-β3、FN在絕經(jīng)后子宮肌瘤及肌壁組織中的表達(dá)及意義

申彩云 吳 蕾

(武警新疆總隊(duì)醫(yī)院婦產(chǎn)科,新疆 烏魯木齊 830091)

絕經(jīng)后婦女子宮肌瘤臨床治療中，常采用促性腺激素釋放激素類似物(GnRHa)，使得子宮肌瘤萎縮、變小；也有患者在進(jìn)行激素類似物治療后出現(xiàn)肌瘤持續(xù)增長(zhǎng)，并表現(xiàn)出臨床癥狀，具體原因仍難以準(zhǔn)確解釋。有相關(guān)研究表明〔1〕，子宮肌瘤若存在于婦女絕經(jīng)前，則體內(nèi)多種生長(zhǎng)因子，如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β3、纖維連接蛋白(FN)均對(duì)子宮肌瘤產(chǎn)生重要作用，在TGF等作用下，肌細(xì)胞出現(xiàn)異常增殖，細(xì)胞外基質(zhì)也發(fā)生聚集，兩種因素共同作用，使得子宮肌瘤出現(xiàn)明顯增長(zhǎng)；在細(xì)胞外基質(zhì)中，存在FN這類重要因子，其可以促進(jìn)體內(nèi)多種腫瘤增殖?，F(xiàn)階段，子宮肌瘤萎縮與婦女絕經(jīng)期后與子宮肌瘤內(nèi)多種因子如TGF-β3、FN表達(dá)水平與二者聯(lián)系的意義研究較少〔2〕。本文旨在探究非萎縮性與萎縮性子宮肌瘤中TGF-β3、FN的表達(dá)及其意義。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選擇2010～2012年到本院就醫(yī)的絕經(jīng)后子宮肌瘤患者100例，年齡45～80歲，平均(53±2.1)歲。將研究對(duì)象按照是否出現(xiàn)萎縮性子宮肌瘤為標(biāo)準(zhǔn)分為兩組，非萎縮組64例，其分組標(biāo)準(zhǔn)〔3〕為絕經(jīng)前患者無子宮肌瘤或是子宮肌瘤體積較小，隨絕經(jīng)期結(jié)束，肌瘤持續(xù)增大，并無萎縮狀態(tài)，臨床癥狀逐漸明顯，后臨床觀察、影像學(xué)檢測(cè)確診為子宮肌瘤，作為手術(shù)指征；萎縮組36例，分組標(biāo)準(zhǔn)〔4〕為子宮肌瘤在絕經(jīng)前出現(xiàn)，但絕經(jīng)后肌瘤體積變小萎縮，臨床表現(xiàn)并不明顯，常在單純性卵巢囊腫、子宮脫垂或是盆腔炎癥等手術(shù)過程中發(fā)現(xiàn)，并最終切除。兩組患者均已絕經(jīng)1年或1年以上，且手術(shù)前并未服用激素類藥物等，由影像學(xué)檢查以及病理生理學(xué)確診為子宮肌瘤，對(duì)納入本次研究知情同意，排除嚴(yán)重肝腎疾病、肺部感染、精神疾病。

1.2TGF-β3及FN檢測(cè)及結(jié)果判定 運(yùn)用免疫組化(SP)法，采用TGF-β3及FN一抗和免疫組化SP試劑盒對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，具體操作方式〔5〕：將采集到的子宮肌瘤樣本做成蠟塊，并存檔；將標(biāo)本進(jìn)行連續(xù)切片，得到4 μm厚組織數(shù)張，作為備用材料，SP法取其中兩張進(jìn)行染色。在本次實(shí)驗(yàn)全過程，陽性對(duì)照選用已經(jīng)測(cè)定為陽性的切片，胎盤組織切片作為TGF-β3陽性對(duì)照切片，正常腎組織作為FN對(duì)照，陰性對(duì)照選擇PBC作為一抗代替品。TGF-β3、FN的半定量定性評(píng)分是采用免疫反應(yīng)評(píng)分來測(cè)定其表達(dá)水平。切片觀察陽性結(jié)果表現(xiàn)是細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜以及細(xì)胞間質(zhì)中存在棕黃色顆粒，其中細(xì)胞質(zhì)中主要是TGF-β3表達(dá)；細(xì)胞內(nèi)以及細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)主要是FN表達(dá)。觀察結(jié)果評(píng)判依據(jù)主要是著色面積以及著色反應(yīng)強(qiáng)度二者相結(jié)合，每張切片陽性強(qiáng)度按無著色、淡黃色、棕黃色和棕褐色分別計(jì) 0、1、2、3分，陽性著色面積按無著色、著色面積<25%、25%～50%、51%～75%、>75%分別計(jì)0、1、2、3、4 分，兩項(xiàng)評(píng)分之積作為最終結(jié)果。TGF-β3、FN表達(dá)量通過評(píng)分積表現(xiàn)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用χ2表示，兩組間比較用t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1兩組 TGF-β3 表達(dá)情況 在本次研究中，兩組研究對(duì)象生長(zhǎng)因子檢測(cè)中，在肌瘤以及肌層壁中均有TGF-β3表達(dá)，胞質(zhì)著色明顯。非萎縮組TGF-β3 相對(duì)表達(dá)量比較中，子宮肌瘤中(3.68±1.94)明顯高于肌壁(2.25±1.48)(P<0.05)；萎縮組TGF-β3相對(duì)表達(dá)量中，子宮肌瘤中為2.91±1.91，肌壁組織為1.83±1.10(P>0.05)。在組間比較中，萎縮組TGF-β3相對(duì)表達(dá)量評(píng)分均大于非萎縮組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

2.2兩組FN表達(dá)情況 FN陽性大多來自于所有觀察標(biāo)本的細(xì)胞間質(zhì)部分，陽性表現(xiàn)主要是以棕褐色或淡黃色為主，形態(tài)主要是呈網(wǎng)狀或線狀分布，此外，F(xiàn)N也可在少數(shù)細(xì)胞內(nèi)部表達(dá)。非萎縮組FN相對(duì)表達(dá)量比較中，子宮肌瘤中(5.31±2.93)明顯高于肌壁(3.94±2.13)(P<0.05)；萎縮組FN相對(duì)表達(dá)量中，子宮肌瘤中為4.86±2.43，肌壁組織為4.46±2.67(P>0.05)。在組間比較中，萎縮壓組FN 相對(duì)表達(dá)量評(píng)分均大于非萎縮組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

3 討 論

作為一種多肽類生長(zhǎng)因子，TGF-β呈現(xiàn)一種多效性特點(diǎn)，且人體內(nèi)多數(shù)細(xì)胞內(nèi)存在轉(zhuǎn)換生長(zhǎng)因子受體，幾乎所有細(xì)胞都可以產(chǎn)生TGF-β。其主要存在五種同工型，包括TGF-β1～TGF-β5，生殖系統(tǒng)內(nèi)主要表達(dá)的TGF-β亞型主要是產(chǎn)生于間充質(zhì)細(xì)胞的TGF-β3。TGF-β3主要表現(xiàn)的生物學(xué)功能有組織細(xì)胞的創(chuàng)傷修復(fù)、細(xì)胞增殖、分化、凋亡和遷移的生物調(diào)節(jié)、促進(jìn)血管化進(jìn)程、對(duì)免疫反應(yīng)進(jìn)行誘導(dǎo)、腫瘤相關(guān)疾病也與TGF-β3有關(guān)〔6〕，其中最主要生物學(xué)功能是促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)形成。現(xiàn)階段，針對(duì)TGF-β3的研究大多主要集中于其與婦女絕經(jīng)期前發(fā)生子宮肌瘤間的相關(guān)性，有相關(guān)研究結(jié)果顯示在婦女絕經(jīng)前，TGF-β3在子宮肌瘤腫瘤組織與正常平滑肌壁組織中表達(dá)水平比較中，前者內(nèi)TGF-β3水平遠(yuǎn)高于后者。TGF-β3〔7〕發(fā)揮生物學(xué)作用的方式主要是通過旁分泌以及自分泌形式對(duì)正常子宮肌細(xì)胞增殖進(jìn)行有效抑制，對(duì)于其肌瘤細(xì)胞增殖起重要推動(dòng)作用，細(xì)胞外基質(zhì)的重要組成膠原蛋白也相應(yīng)增加，此外FN、蛋白聚糖表達(dá)水平也升高。

本研究結(jié)果可知，子宮肌瘤可在絕經(jīng)后持續(xù)增長(zhǎng)的重要原因之一很可能在于TGF-β3的作用。此外，還有相關(guān)研究表明〔8〕，采用GnRHa治療方式，可以顯著控制和縮小子宮肌瘤體積，在進(jìn)行體內(nèi)TGF- β3水平檢測(cè)時(shí)，發(fā)現(xiàn)治療組內(nèi)TGF-β3表達(dá)水平明顯低于未治療組，據(jù)此可以猜測(cè)與GnRHa有關(guān)，GnRHa可以顯著提升血雌激素和孕激素水平，恢復(fù)到絕經(jīng)前水平，從而影響TGF-β3分泌。

FN作為一種大分子非膠原糖蛋白，主要分布于軟組織基質(zhì)、多數(shù)基膜以及全身體液，尤以血液內(nèi)較為廣泛，其中血漿細(xì)胞型FN，可分為可溶性、不可溶兩種類型，都是構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)的重要組成，蛋白聚糖、膠原與細(xì)胞型FN等物質(zhì)是致密結(jié)構(gòu)的組成成分，還能對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)形成以及創(chuàng)傷后修復(fù)起到重要重塑作用。在體內(nèi)大分子協(xié)助下，F(xiàn)N還可以對(duì)細(xì)胞骨架形成起到重要作用，此外還在細(xì)胞分化，甚至細(xì)胞的致癌性轉(zhuǎn)化方面發(fā)揮重要作用。有學(xué)者〔9〕研究發(fā)現(xiàn)，與瘢痕疙瘩形成類似，子宮肌瘤也通過細(xì)胞基質(zhì)蓄積以及紊亂結(jié)構(gòu)對(duì)腫瘤體積以及質(zhì)地造成影響，而FN正是參與肌瘤組織細(xì)胞基質(zhì)形成從而影響肌瘤生長(zhǎng)過程；還有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)N細(xì)胞外基質(zhì)形成過程以及子宮肌瘤細(xì)胞功能中均有FN參與；絕經(jīng)前子宮肌瘤的一項(xiàng)研究結(jié)果表明〔10〕，在子宮肌瘤組織與正常子宮肌層中比較中，F(xiàn)N mRNA 表達(dá)量前者明顯高于后者。本研究表明FN表達(dá)水平提高對(duì)絕經(jīng)后子宮肌瘤增大有促進(jìn)作用。

4 參考文獻(xiàn)

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