CD147、E—cadherin在腎細胞癌中的表達及意義

[摘要] 目的 檢測人腎癌組織中CD147、E-cadherin的表達，探討二者在腎癌中表達的相關(guān)性及其與預后的關(guān)系。 方法 利用組織芯片技術(shù)構(gòu)建82例腎癌與26例癌旁正常腎組織芯片，應用Envision免疫組織化學方法檢測CD147與E-cadherin在腎癌組織和癌旁組織中的表達。 結(jié)果 腎癌中CD147的表達率為70.7%（58/82），癌旁正常腎組織26.9%（7/26）顯著高于正常腎組織（P<0.01）。腎癌中E-cadherin的表達率為37.8%（31/82），癌旁正常腎組織的表達率69.2%（18/26）顯著低于正常腎組織（P<0.01）。 結(jié)論 腎癌中CD147異常高表達，而E-cadherin表達下降，可能參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展，檢測CD147與E-cadherin可能作為評估腎癌預后的指標。

[關(guān)鍵詞] 腎細胞癌；組織芯片；免疫組織化學；CD147；E-cadherin

[中圖分類號] R737.11 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2013）35-0063-02

CD147是一種促細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶因子（extracellular matrix metalloproteinase inducer，EMMPRIN），為免疫球蛋白成員之一，是一種跨膜糖蛋白，在惡性腫瘤細胞膜上有較強的表達。CD147能誘導成纖維細胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase， MMPS）導致細胞外基質(zhì)降解，促進腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移[1，2]。上皮細胞鈣粘蛋白（E-cadherin）主要介導同種細胞間的粘附反應，人體多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移與上皮細胞E-cadherin表達降低密切相關(guān)[3，4]，本研究采用免疫組織化學方法檢測CD147和E-cadherin在腎細胞癌和正常組織中的表達，旨在探討二者在腎細胞癌中發(fā)生發(fā)展及侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 標本來源

82例腎細胞癌與26例癌旁正常腎組織標本均選自我院病理科存檔蠟塊，為1990年1月～2007年12月間收集的腎癌手術(shù)切除標本。其中女25例，男57例，男女比例2.28∶1。年齡最大78歲，最小17歲，平均51.2歲。標本按WHO腎癌病理組織學分型：透明細胞癌50例；嫌色細胞癌19例；集合管癌6例，囊性腎細胞癌6例；乳頭狀腎細胞癌1例。核分級按Thoenes標準：1級核30例，2級核29例，3級核14例，Ⅳ級核9例。腫瘤大?。捍笥? cm 28例； 5～7 cm 24例；小于5 cm 30例；。臨床分期：RobsonⅠ期54例，Ⅱ期20例，Ⅲ期7 例 ，Ⅳ期1例。其中術(shù)后隨訪1年以上76例。

1.2 免疫組織化學染色

CD147多克隆抗體、鼠抗人E-cadherin試劑及免疫組化試劑盒為美國santcru公司產(chǎn)品，均購自上海DAKO公司。

1.3 結(jié)果判定

陽性細胞：胞漿或胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒。CD147陽性顆粒定位于細胞漿和細胞膜；E-cadherin主要定位于細胞膜；結(jié)果判定根據(jù)：參照Sulzers分級法，陰性（-）；陽性細胞數(shù)<10%為（+）；陽性細胞10%-50%為（++）；陽性細胞>50%以上為（+++）。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 11.0統(tǒng)計學分析軟件包。計數(shù)資料比較用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 組織芯片

共制備了腎癌組織芯片3個，每個組織芯片含41個位點，剔除切片不全，圖象不良者，分別含31、37、38個位點，包含26例癌旁正常腎組織及82例腎癌組織。分別進行HE染色，膠體鐵染色及免疫組織化學染色。

2.2 免疫組化結(jié)果

腎癌中CD147的表達率為70.7%（58/82），主要在癌細胞膜與細胞漿表達，染色較強（圖1、2）。癌旁正常腎組織僅7例弱陽性表達，陽性率26.9（7/26），顯著高于正常腎組織（P<0.01）。腎癌中E-cadherin的表達率為37.8%（31/82），主要在細胞膜上表達（圖3、4）。癌旁正常腎組織的表達率69.2%（18/26）顯著低于正常腎組織（P<0.01）。

2.3 CD147和E-cadherin陽性表達與腎癌患者的預后分析

82例中由于各種原因失訪10例，其中 76例隨訪5年以上，因腫瘤復發(fā)、轉(zhuǎn)移而死亡20例，存活56例，總的5年生存率為 73.7.6% 。死亡組中CD147陽性表達率為 85.0%（17/20），生存組中CD147陽性表達率為 58.9%（33/56），兩組之間的差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。死亡組E-cadherin陽性表達率10.0%（2/20），明顯低于生存組中E-cadherin陽性表達率42.9%（24/56）（P<0.01）。見表2。

表2 CD147和E-cadherin陽性表達與患者預后的關(guān)系[n（%）]

3 討論

腎癌的發(fā)生、發(fā)展是一個涉及多因素、多步驟的過程。腎癌浸潤、轉(zhuǎn)移是腫瘤發(fā)展中最重要的過程，在這個復雜的過程中，細胞外基質(zhì)的降解是腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的首要條件[1，2]。鋅離子依賴的蛋白酶MMPS能降解細胞外基質(zhì)，促使腫瘤細胞遷移到其他部位，導致腫瘤的轉(zhuǎn)移。研究證明CD147能誘導成纖維細胞產(chǎn)生MMPS，改變癌細胞與細胞外基質(zhì)及腫瘤細胞之間的粘附能力，破壞天然組織屏障，導致癌細胞侵襲，浸潤和轉(zhuǎn)移[3-6]。本實驗對26例正常腎組織和82例腎細胞癌進行CD147的表達分析，結(jié)果顯示在正常腎組織中CD147的表達明顯低于腎癌組織，差異有顯著性意義（P<0.01）。本實驗中發(fā)現(xiàn)CD147表達與腎癌的臨床分期及腫瘤類型無關(guān)（P>0.05）而與腫瘤大小、病理分級相關(guān)。組織分化程度越低，CD147的表達強度越強，腫瘤越大，CD147的表達率越高，進一步說明CD147影響腫瘤的惡性程度和發(fā)展趨勢?？赡軈⑴c腎癌的轉(zhuǎn)移，浸潤及發(fā)生發(fā)展過程。本實驗隨訪資料中生存組CD147陽性表達率顯著低于死亡組（P<0.05），提示CD147的表達強度與腫瘤的預后相關(guān)。

鈣黏蛋白E-cadherin是鈣離子依賴的細胞黏附分子，在細胞分化、游走、歸位、形態(tài)發(fā)生、免疫等方面有重要作用。有研究證明E-cadherin丟失或功能缺失在促進上皮細胞惡變和獲得侵襲力中起關(guān)鍵作用[7]。本實驗82例腎癌組織E-cadherin的陽性表達率低于正常腎組織（P<0.01）。進一步支持了這一論斷。Hudson等[8]指出E-cadherin在上皮細胞間粘連和維持上皮細胞完整性方面起重要作用，E-cadherin的異常表達與腫瘤的分化、侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān)，當E-cadherin表達降低時，腫瘤細胞容易發(fā)生、發(fā)展與侵襲、轉(zhuǎn)移。本實驗中低分化腎細胞癌E-cadherin的陽性表達率低與高分化的腎細胞癌，晚期腎細胞癌E-cadherin表達率低于早期腎細胞癌，并與腫瘤大小密切相關(guān)（P<0.05）。提示E-cadherin的異常表達與腎癌的分化程度、腫瘤大小及臨床分期有關(guān)。此外Choi等報告E-cadherin的表達與病理類型有關(guān)[9，10]，本實驗未發(fā)現(xiàn)E-cadherin的異常表達與腎癌的病理類型有關(guān)（P>0.05），但與腎癌的生存率有關(guān)，死亡組的E-cadherin表達率明顯低于生存組（P<0.01），說明E-cadherin低表達可能是腎癌預后差的因素之一。

腎細胞癌的發(fā)生發(fā)展的機制是一個十分復雜的過程，本實驗提示可能與腎癌細胞中CD147、E-cadherin基因失調(diào)有關(guān)，表現(xiàn)為CD147表達升高，E-cadherin表達下調(diào)，并且具有反向協(xié)同作用，共同參與腎癌的發(fā)生發(fā)展過程，提示腎癌的惡性度越高，侵襲轉(zhuǎn)移能力越強，生存率越低。CD147的表達越強，相反E-cadherin的表達率越高腫瘤的惡性度越低，生存率越高[11]。提示檢測腎癌中的CD147和E-cadherin水平可作為評估預后的重要分子指標，也可能是今后腫瘤治療的一個靶點。

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（收稿日期：2013-07-04）