肝臟B超形態(tài)學(xué)變化、MMP—2及TIMP—2水平與肝纖維化分期的關(guān)系

[摘要] 目的 研究慢性乙型肝炎患者肝臟B超形態(tài)學(xué)改變、血清基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）及其組織抑制因子水平（TIMP-2）與其肝纖維化程度的關(guān)系。 方法 選擇我院收治的76例慢性乙型肝炎患者作為研究對(duì)象，對(duì)所有觀察對(duì)象進(jìn)行B超引導(dǎo)下肝活檢及肝組織纖維化分期，B超檢查測(cè)定門靜脈主干、脾靜脈寬度及脾臟厚度；使用ELISA檢測(cè)法檢測(cè)慢性乙型肝炎患者血清MMP-2和TIMP-2含量，另外選取15例健康成人作為對(duì)照，分析MMP-2、TIMP-2與患者肝纖維化程度之間的關(guān)系。 結(jié)果 慢性乙型肝炎患者的脾臟厚度、門靜脈主干及脾靜脈寬度隨患者肝纖維化分級(jí)的增加而增大；血清MMP-2、TIMP-2水平隨肝纖維化程度加重而升高，r值分別為0.805、0.771，P < 0.05。 結(jié)論 肝臟B超形態(tài)學(xué)改變及血清MMP-2、TIMP-2水平變化對(duì)慢性乙型肝炎患者早期肝纖維化的診斷具有重要意義。

[關(guān)鍵詞] 超聲檢查；金屬基質(zhì)蛋白酶-2及其組織抑制因子；肝炎；乙型肝炎；肝硬化

[中圖分類號(hào)] R575.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2013）17-0058-03

乙肝是全球分布，對(duì)人類危害嚴(yán)重的傳染病，發(fā)展為慢性乙肝后容易發(fā)生肝臟纖維化、肝癌，判斷肝纖維化程度較可靠的方法是進(jìn)行肝臟活檢[1-5]，但創(chuàng)傷較大，難以使用，基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）及組織抑制劑（TIMPS）可調(diào)節(jié)肝細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的代謝。肝臟纖維化的發(fā)生是由于ECM合成增多，而降解相對(duì)減少導(dǎo)致肝內(nèi)水平增多導(dǎo)致。其中MMPS可促進(jìn)ECM的降解，TIMPS可通過抑制MMPS阻止ECM的降解而加速肝臟纖維化，肝臟MMPS活性受到抑制，TIMPS功能活性增強(qiáng)導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)降解減少[6，7]，在肝臟纖維化的病理發(fā)展過程中ECM降解發(fā)揮著重要作用，而其降解過程中起主要作用的MMPS是MMP-1、MMP2、MMP3、MMP9，與肝纖維化關(guān)系最密切的是MMP2。本文選擇76例慢性乙型肝炎患者作為研究對(duì)象，分析MMP-2、T1MP-2與肝纖維化程度之間的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2007年5月～2009年12月入院的慢性乙型肝炎患者76例做為研究對(duì)象。其中男46例，女30例，年齡56～71歲，平均（63.5±12.4）歲；病例入選標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合1995年第四屆北京全國(guó)病毒性肝炎會(huì)議制定的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，另外選擇15例健康體檢者作為對(duì)照，病例排除標(biāo)準(zhǔn)[8] ：排除病情惡化合并嚴(yán)重肝腎心臟疾??；肌肉骨骼疾??；合并有活動(dòng)性肝病、充血性心力衰竭、惡性腫瘤、呼吸功能衰竭的嚴(yán)重疾病者。經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，兩組患者年齡、性別等基線資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。

1.2 方法

肝臟活檢病理組織學(xué)檢查：在B超引導(dǎo)下進(jìn)行經(jīng)皮肝臟穿刺活組織檢查術(shù)，儀器選用美國(guó)Tru-cut16G穿刺針，每例患者檢查不同部位穿刺兩次，穿刺標(biāo)本長(zhǎng)度要求≥1.0 cm，至少在顯微鏡下包括3個(gè)以上匯管區(qū)。甲醛固定穿刺標(biāo)本，石蠟包埋，連續(xù)制成3 μm石蠟切片，分別用HE染色及網(wǎng)狀纖維染色，診斷標(biāo)準(zhǔn)按照《病毒性肝炎方案》進(jìn)行肝臟纖維化分期，每張切片由兩位病理科醫(yī)生雙盲讀片。B超檢查方法 由一位超聲醫(yī)生，于每位患者肝臟活檢術(shù)前當(dāng)日清晨，使用GE超聲顯像儀，進(jìn)行空腹B超監(jiān)測(cè)，包括MPV、SPV寬度和脾臟肋間厚度。MPV內(nèi)徑>1.4 cm為增寬，SPV內(nèi)徑≥1.0 cm為增寬，脾臟肋間厚度>4.0 cm為脾臟增厚。血清MMP2、TIMP-2的測(cè)定采用ELISA方法檢測(cè)嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

將所得患者檢測(cè)結(jié)果錄入電腦，使用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)數(shù)資料采用率的形式。計(jì)量資料包括兩組肝臟的MPV、SPV寬度及脾臟肋間厚度血清MMP-2、TIMP-2水平的均數(shù)比較采用方差分析，MMP-2、TIMP2分別與肝纖維化程度作秩相關(guān)分析，計(jì)數(shù)資料脾臟增厚發(fā)生率采用χ2檢驗(yàn)，可信區(qū)間α取0.05，P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肝組織纖維化分期結(jié)果

慢性乙肝患者肝組織纖維化分期結(jié)果為：S0期21例，S1期14例，S2期15例，S3期17例，S4期9例。

2.2 肝臟纖維化分期與MPV、SPV的寬度及脾臟肋間厚度的相關(guān)性

根據(jù)方差齊性檢驗(yàn)，四組方差齊，計(jì)量資料呈正態(tài)分布，可以進(jìn)行進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)。慢性乙肝各纖維化分期脾臟厚度同脾靜脈間存在差異，從S2～S4期，MPV、SPV寬度及脾臟厚度增加，各個(gè)分期間的厚度、寬度差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，脾臟增厚程度各期差異明顯，S4期脾臟增厚發(fā)生率較高達(dá)到51.56%，而MPV、SPV增寬發(fā)生率相對(duì)低，分別為23.7%（18/76），15.8%（12/76）。見表1。

2.3 慢性乙肝患者血清MMP-2、TIMP-2水平與肝臟纖維化程度的關(guān)系

慢性乙肝患者隨肝臟纖維化嚴(yán)重程度的增高，MMP-2、TIMP-2水平逐漸升高，S2～S4期升高幅度不斷增大，同對(duì)照組比較具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P < 0.05），相關(guān)性分析顯示血清MMP-2、TIMP-2水平同肝臟纖維化程度具有明顯正相關(guān)，r值分別為0.805、0.771，P < 0.05。見表2。

3 討論

慢性乙型肝炎是由HBV病毒引起的慢性肝臟炎癥，病理基礎(chǔ)是肝臟纖維化，它可以發(fā)展成為肝硬化直至癌變，B超可以將失代償性肝硬化診斷出，且相應(yīng)診斷價(jià)值也較高，但對(duì)于慢性肝炎患者肝纖維化程度以及門靜脈高壓診斷價(jià)值無明顯定論。肝臟纖維化對(duì)于門靜脈系統(tǒng)小分支以及肝血竇會(huì)造成不同程度的壓迫[9，10]，導(dǎo)致肝臟內(nèi)部血管阻力的增加，門靜脈血流量增加，最終導(dǎo)致門靜脈高壓，臨床表現(xiàn)為門靜脈和脾靜脈增寬、脾臟增大。本研究中選擇無明顯失代償期肝硬化表現(xiàn)的慢性乙肝患者，比較不同肝臟纖維化分期中，門靜脈及脾靜脈內(nèi)徑、脾臟腫大之間的關(guān)系，結(jié)果表明，門靜脈、脾靜脈內(nèi)徑、脾臟厚度之間的關(guān)系為門靜脈脾靜脈內(nèi)徑、脾臟肋間厚度隨肝臟纖維化程度的增加而逐漸升高，其中脾臟厚度增加在各期中差異較顯著，這也說明脾臟的增厚是肝纖維化分期較為敏感的指標(biāo)，尤其對(duì)于中、重度肝臟纖維化診斷具有重要意義。

肝臟纖維化實(shí)質(zhì)以Ⅰ、Ⅲ型膠原為主的ECM合成與降解失衡[11-13]，最終導(dǎo)致ECM肝內(nèi)沉積過度。MMPS、TIMPS平衡于ECM合成降解中發(fā)揮重要作用。MMPS是一類含鋅離子的肽鏈內(nèi)切酶，幾乎可以水解所有細(xì)胞外基質(zhì)。TIMPS是近年被發(fā)現(xiàn)的能夠特異性抑制MMPS活性蛋白質(zhì)，為小分子多肽，分為N端、C端兩個(gè)功能區(qū)，N端的半胱氨酸殘基同MMPS活性中心相結(jié)合，而C端與MMPS另外部位結(jié)合，以非共價(jià)鍵形式構(gòu)成復(fù)合體，而阻斷MMPS同底物結(jié)合的過程。正常肝臟中MMPS、TIMPS處于平衡狀態(tài)[14，15]，二者可共同維護(hù)肝臟微環(huán)境穩(wěn)態(tài)。一旦有致病因子將這種平衡打破，會(huì)促進(jìn)肝臟纖維化發(fā)生。有研究表明，MMP2、MMP9以及MMP3可以對(duì)正常肝臟基質(zhì)降解。其中MMPS特異性底物是Ⅳ型膠原，TIMP2可以調(diào)節(jié)MMP2活性，所以MMP2、TIMP2在肝纖維化發(fā)生發(fā)展中期重要作用，故對(duì)于MMP-2及其抑制物TIMP2于肝臟纖維化病理?yè)p害中的變化過程進(jìn)行分析很有必要，我們的研究中發(fā)現(xiàn)，隨慢性乙型肝炎患者肝臟纖維化程度的增加，MMP2、TIMP2于血清中含量逐漸增高，幅度不斷加大，二者的相關(guān)性分析說明同肝臟纖維化程度呈正相關(guān)，說明MMP2、TIMP2血清水平可以作為肝臟纖維化的診斷指標(biāo)。

綜上所述，肝臟B超形態(tài)學(xué)改變以及血清MMP-2、TIMP2水平對(duì)慢性乙型肝炎患者的肝臟纖維化程度具有良好的診斷價(jià)值及重要臨床意義，對(duì)于條件欠缺的醫(yī)院由于缺乏對(duì)MMPS-TIMP2水平的監(jiān)測(cè)能力，故通過肝臟B超形態(tài)學(xué)檢查評(píng)估肝臟纖維化程度的具有重要的輔助診斷價(jià)值。

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（收稿日期：2013-03-15）