TNF—α和IL—1β在細菌性腦膜炎患兒血清中的表達及其臨床意義

[摘要] 目的 觀察急性期細菌性腦膜炎和病毒性腦炎患兒血清中腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細胞介素-1β（IL-1β） 的水平變化及臨床意義。 方法 收集在本院治療的細菌性腦膜炎患兒27例，病毒性腦炎患兒23例的血清，采用雙抗體酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA） 檢測各組對象血清中TNF-α和IL-1β的表達水平。 結(jié)果 細菌性腦膜炎組血清TNF-α水平明顯高于病毒性腦炎組（P < 0.05）。 結(jié)論 血清TNF-α與IL-1β的檢測可以用于對細菌性腦膜炎患兒的診斷。

[關(guān)鍵詞] 腫瘤壞死因子α；白細胞介素-1β；細菌性腦膜炎；病毒性腦膜炎

[中圖分類號] R725.1 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2013）11-0154-02

細菌性腦膜炎即化膿性腦膜炎，由化膿菌引起的以腦膜炎癥為主的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染，是一種發(fā)病迅速、威脅生命的疾病。細菌性腦膜炎患兒大多有典型癥狀，但是臨床上經(jīng)常能遇到疑似病例，例如嬰幼兒發(fā)病常不伴有典型癥狀和體征，而出現(xiàn)易激或嗜睡。腫瘤壞死因子α（TNF-α）的主要作用是調(diào)節(jié)免疫細胞的功能；作為一種內(nèi)源性致熱原，它能夠促使發(fā)熱，引起細胞凋亡（通過誘使產(chǎn)生IL-1和IL-6）引發(fā)敗血癥，引起惡病體質(zhì)，引發(fā)炎癥，阻止腫瘤發(fā)生和病毒復(fù)制。IL-1β為一種致炎細胞因子，廣泛參與了人體組織破壞、水腫形成等多種病理損傷過程。本文擬通過檢測腦膜炎患兒血清中TNF-α與IL-1β的水平，評估TNF-α、IL-1β及聯(lián)合檢測在腦膜炎患兒鑒別診斷中的作用，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2010年1月～2012年12月來我院就診的細菌性腦膜炎患兒27 例，臨床表現(xiàn)為持續(xù)性或短暫性發(fā)熱、頭痛、嘔吐17例，煩躁、嗜睡7 例，并意識障礙 3 例。選擇23例同期入院的病毒性腦炎患兒。診斷符合《諸福棠實用兒科學(xué)》第 7 版細菌性腦膜炎、病毒性腦炎的診斷標準[1]。

1.2 血清TNF-α及IL-1β的檢測

收集外周靜脈血5 mL。采血后需來回輕晃抗凝管，讓血液與管壁的抗凝劑充分接觸，動作輕柔以防溶血，通過2次離心獲得無細胞血清，即以1 600 r/min離心10 min，將上層血清轉(zhuǎn)移至Ep管，再以15 000 r/min離心10 min，吸取上層血清于Ep管，-80 ℃凍存?zhèn)溆?。TNF-α及IL-1β測定采用ELISA方法（Ray Biotech公司），按照試劑盒說明書進行檢測，測定其光密度值（OD值），根據(jù)標準曲線計算TNF-α及IL-1β水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標準差表示，P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

細菌性腦膜炎組和病毒性腦炎組患兒血清TNF-α與IL-1β水平分析見表1。細菌性腦膜炎組血清TNF-α均值為（32.2±4.6） pg/L，病毒性腦炎組為（15.8±2.1） pg/L，兩組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。細菌性腦膜炎組血清IL-1β平均為（37.4±4.4） ng/L，病毒性腦炎組平均為（19.8±3.8） ng/L，兩組患兒比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05），提示細菌性腦膜炎組患兒中TNF-α與IL-1β均顯著高于病毒性腦炎組。

3 討論

細菌性腦膜炎是中樞神經(jīng)系統(tǒng)嚴重的感染性疾病，兒童患者發(fā)病較高[2]。許多細菌均可引起本病，其中腦膜炎球菌所致者最多，依次為流感桿菌、肺炎球菌、大腸桿菌及其他革蘭陽性桿菌、葡萄球菌、李司忒苗、厭氧菌等。細菌性腦膜炎要求急癥處理，診斷和治療上的任何拖延都將造成永久性的殘廢和死亡。治療包括一般支持治療如保持呼吸道通暢、降溫、控制癲癇發(fā)作，特別注意的是維持電解質(zhì)的平衡，低鈉可加重腦水腫；積極抗顱內(nèi)壓增高和抗休克；若出現(xiàn)血管內(nèi)凝聚現(xiàn)象時應(yīng)及時給予肝素化治療等。血化驗和培養(yǎng)應(yīng)即刻采取，隨后保留輸液通路；應(yīng)作急癥頭顱CT檢查，以排除顱內(nèi)占位病變；隨后立即行診斷腰穿。從開始就應(yīng)立即給予適當?shù)目股?；如果待影像學(xué)和腦脊液化驗結(jié)果后再開始給予抗生素治療是不恰當?shù)腫3，4]。

在炎癥發(fā)生發(fā)展中，細胞因子起著非常重要的作用，主要表現(xiàn)為促炎和抗炎細胞因子之間相互促進相互制約作用。促炎因子腫瘤壞死因子-α（TNF-α）是一種主要由單核-吞噬細胞產(chǎn)生的單核因子，除了具有選擇性地殺傷某些腫瘤細胞，還有多種免疫調(diào)節(jié)作用。IL-1β 是一種細胞因子，具有促炎、促凝功能，在機體免疫調(diào)控中發(fā)揮重要作用，眾多研究已表明其參與機體炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答等過程。研究表明其在成人牙周炎患者牙齦組織中表達明顯高于正常組織[5]。另有研究證實，血清中TNF-α與IL-1β在細菌性腦膜炎中水平升高[6]。

血清腫瘤壞死因子-α（TNF-α），又稱為惡液質(zhì)素（cachectin），TNF-α在正常的宿主抵抗被感染及惡性腫瘤的生長中起重要作用，用作免疫刺激，并且是炎癥反應(yīng)的中介。過量的產(chǎn)生腫瘤壞死因子TNFs，已經(jīng)暗示了在大量的病理條件下扮演著重要角色，包括惡疾、膿毒性的沖擊、自體免疫紊亂。腫瘤壞死因子TNF-α是由有活性巨噬細胞和其它類型的細胞產(chǎn)生，這些細胞包括：T細胞和B細胞、NK細胞、LAK細胞、星性膠質(zhì)細胞、內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞和一些腫瘤細胞。鼠的TNF-α cDNA編碼235個氨基酸殘基的二型膜蛋白，具有156個氨基酸殘基可溶的TNF-α是被一個金屬蛋白酶分解從膜錨定TNF-α的C端被釋放的。TNF-α在腫瘤發(fā)生發(fā)展、免疫調(diào)節(jié)、炎癥等方面發(fā)揮重要作用[7，8]。TNF-α可誘導(dǎo)多種細胞因子的產(chǎn)生，引起發(fā)熱、休克，還可使內(nèi)皮細胞活化而導(dǎo)致血管通透性增加；有研究表明，幼兒發(fā)生急性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染時，TNF-α水平明顯增高，并且與病情密切相關(guān)[9]。IL-1β為一種致炎細胞因子，廣泛參與了人體組織破壞、水腫形成等多種病理損傷過程。它可促進β防御素-4的生成，但總體上，破壞大于防御[10]。在腦組織中IL-1β 是 IL-1 的主要存在形式。在正常情況下，中樞神經(jīng)系統(tǒng)僅有微量的 IL-1β 以及其受體表達，但在顱內(nèi)感染致腦損傷等情況下，IL-1β 的水平及活性可增高。本研究證實，血清中TNF-α在細菌性腦膜炎組顯著高于病毒性腦炎，說明TNF-α和IL-1β在細菌性腦膜炎的診斷中具有重要作用。

[參考文獻]

[1] 薛辛東. 兒科學(xué)[M]. 第2 版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010： 411-420.

[2] El Mdaghri N，Jilali N，Belabbes H，et al. Epidemiological profile of invasive bacterial diseases in children in Casablanca，Morocco：antimicrobial susceptibilities and serotype distribution[J]. East Mediterr Health J，2012，18（11）：1097-1101.

[3] Juganariu G，Miftode E，Teodor D，et al. Clinical features and course of bacterial meningitis in children[J]. Rev Med Chir Soc Med Nat Iasi， 2012，116（3）：722-726.

[4] Huy NT，Thao NT，Tuan NA，et al. Performance of thirteen clinical rules to distinguish bacterial and presumed viral meningitis in Vietnamese children[J]. PLo S One，2012， 7（11）：e50341.

[5] 吳亞菲. IL-1β mRNA、TNF-α mRNA在成人牙周炎患者牙齦組織中表達的研究[J]. 中國口腔醫(yī)學(xué)年鑒， 2000-2001.

[6] Bociga-Jasik M，Garlicki A，Ciela A，et al. The diagnostic value of cytokine and nitric oxide concentrations in cerebrospinal fluid for the differential diagnosis of meningitis[J]. Adv Med Sci，2012，57（1）：142-147.

[7] Kopiński P，Dyczek A，Chorostowska-Wynimko J，et al. [Higher incidence of alveolar lymphocytes （AL） apoptosis in smokers depends on BCL-2 expression and specific response to tumor necrosis factor alpha （TNFalpha）. Bronchoalveolar lavage （BAL） material analysis from selected interstitial lung diseases （ILD） and healthy controls] [J]. Przegl Lek，2012，69（10）：731-736.

[8] Zhang P，Liu X，Zhu Y，et al. Honokiol inhibits the inflammatory reaction during cerebral ischemia reperfusion by suppressing NF-κB activation and cytokine production of glial cells[J]. Neurosci Lett，2013，534（1）：123-127.

[9] Hwang I，Park S，Hong S，et al. Promotes ASC oligomerization-dependent caspase-1 activation[J]. Immune Netw，2012，12（6）：284-290.

[10] 潘雪峰，鄭定容，劉志偉. 急性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患兒IL-6和TNF-α的變化及臨床意義[J]. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2009，6（9）：30-31.

（收稿日期：2013-03-04）