141例慢性重度乙型肝炎患者凝血功能與HBV標(biāo)志物模式 HBV—DNA載量相關(guān)性研究

【摘 要】目的：研究慢性重度乙型肝炎患者HBV標(biāo)志物模式（HBV-M ）、病毒載量（HBV-DNA）與凝血功能的關(guān)系。方法：研究對(duì)象選取本院臨床診斷為慢性重度乙型病毒性肝炎住院患者141例，對(duì)照組為同時(shí)期健康體檢人員46例。分別采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)HBV標(biāo)志物模式（HBV-M）、實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（FQ-PCR）檢測(cè)乙肝病毒DNA載量（HBV-DNA），同時(shí)檢測(cè)凝血功能四項(xiàng)（PT、APTT、TT、FIB）。依HBV-M將研究對(duì)象分為五組：A組（HBsAg+ HBeAg+ HBcAb+），B組（HBsAg+ HBeAb+ HBcAb+），C組（HBsAg+ HBcAb+），D組（HBsAg+ HBeAb+），E組（HBsAg+），F(xiàn)組（HBeAb+）；依HBV-DNA載量將研究對(duì)象分為7組：第1組（HBV-DNA載量≤103）第2組（103

【關(guān)鍵詞】慢性重度乙型病毒性肝炎；血清學(xué)分型；病毒載量；凝血功能

【中圖分類號(hào)】R446.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1004—7484（2013）11—0067—02

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）感染引起的傳染病。我國(guó)是乙型肝炎的高發(fā)區(qū)，全國(guó)約有8%-10%的人為HBsAg攜帶者，乙肝感染者極易發(fā)展為慢性乙肝，其中慢性重度乙型病毒性肝炎較為常見。HBV對(duì)肝細(xì)胞造成損害，引起肝功能降低，而肝臟是人體多種酶產(chǎn)生及滅活的場(chǎng)所，其中參與凝血功能的絕大多數(shù)酶都與肝臟有關(guān)。本文研究141例臨床診斷為慢性重度乙型肝炎患者的HBV標(biāo)志物模式（HBV-M）、HBV-DNA載量與凝血功能（PT，APTT，TT，F(xiàn)IB）的相互關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 臨床樣本141例標(biāo)本均來自我院2009年11月至2011年12月臨床診斷為慢性重度乙型病毒性肝炎的住院患者，診斷標(biāo)準(zhǔn)符合2000年9月中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲病學(xué)分會(huì)、肝病學(xué)分會(huì)聯(lián)合修訂《病毒性肝炎防治方案》[1]?；颊呷朐呵熬催M(jìn)行任何系統(tǒng)治療，HBV標(biāo)志物模式（HBV-M）、HBV-DNA載量與凝血功能檢測(cè)均在患者接受治療前進(jìn)行。其中，男性120例，年齡20-80歲，中位數(shù)42歲，女性31例，25-70歲，中位數(shù)45歲。對(duì)照組為該期間來我院門診體檢的健康人員，隨機(jī)選取46例，男性22例，女性24例，年齡7-71歲，中位數(shù)46歲。

1.2 試劑與儀器 Multiskan MK3酶標(biāo)儀（芬蘭），PW-960plus全自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī)（中國(guó)深圳），Light Cyder1.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增儀（德國(guó)羅氏），試劑均為上?？迫A生物工程有限公司，STA-Compact全自動(dòng)凝血分析儀（德國(guó)羅氏），凝血功能檢測(cè)試劑為儀器配套試劑。

1.3 方法 分別用天藍(lán)色和紅色真空管采集本院住院診斷為慢性重度乙型病毒性肝炎患者及體檢者靜脈血，用紅色真空管用于HBV-M及HBV-DNA載量檢測(cè)，天藍(lán)色真空管用于凝血功能四項(xiàng)檢測(cè)。HBV-M檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)，用酶標(biāo)儀讀取需吸光度值，以陰性或陽性方式報(bào)告；HBV-DNA檢測(cè)采用熒光定量PCR技術(shù)，正常參考范圍為<5×102 copies/ml；凝血功能四項(xiàng)檢測(cè)，采用全自動(dòng)凝血分析儀完成測(cè)定，所有操作均按照說明書嚴(yán)格執(zhí)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用spss17.0統(tǒng)計(jì)軟件，所有數(shù)據(jù)以“ ±s”表示，并進(jìn)行方差分析與相關(guān)性分析。對(duì)組間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，p<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同血清學(xué)分型與凝血功能四項(xiàng)的關(guān)系 表1為依據(jù)血清學(xué)分型分組得到統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示：A、B、C三組的凝血功能四項(xiàng)指標(biāo)均與正常組對(duì)應(yīng)指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。其中，PT：A組分別與B、C兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p均<0.05）；APTT：A、C兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；TT：A、B兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。其余各組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

在肝臟疾病的臨床癥狀中以出血最為常見，尤其是慢性重度乙型病毒性肝炎患者，大出血也是患者死亡的重要原因之一。研究慢性重度乙型病毒性肝炎患者病毒復(fù)制數(shù)量及血清學(xué)分型與凝血功能之間的關(guān)系，對(duì)于慢性重度乙型病毒性肝炎患者病情及預(yù)后的估計(jì)、肝功損害程度的判斷、治療時(shí)機(jī)的把握有重要意義[2]。本研究結(jié)果顯示：分別依HBV-M及HBV-DNA載量分組的凝血功能四項(xiàng)（PT、APTT、TT、FIB）值與正常對(duì)照組相比均有差異。。研究中發(fā)現(xiàn)，依HBV-M分型中，大三陽患者的PT、APTT值有延長(zhǎng)最明顯，尤以APPT值最為顯著，說明APPT是反映慢性重度乙型病毒性肝炎患者凝血功能的重要指標(biāo)，與文獻(xiàn)[3]報(bào)道相符。因此，臨床上針對(duì)慢性重度乙型病毒性肝炎中血清型為大三陽的患者治療需格外注意患者凝血功能狀況。另外，隨著HBV-DNA含量的增加，PT、APTT值有延長(zhǎng)的趨勢(shì)。HBV-DNA含量在103 copy/ml～107 copy/ml，病人的PT、APTT值明顯高于正常對(duì)照組和DNA陰性組。賈繼東等[4]報(bào)道：HBV-DNA定量在≥105 copy/ml，及HBeAg陰性而DNA定量在≥104 copy/ml的病人，需要進(jìn)行抗病毒治療，而本研究認(rèn)為慢性重度乙型病毒性肝炎患者HBV-DNA定量在≥103 copy/ml時(shí)，即可考慮進(jìn)行抗病毒治療。而當(dāng)HBV-DNA含量≥107 copy/ml時(shí)，凝血功能四項(xiàng)的異常程度均比HBV-DNA含量在103 copy/ml～107 copy/ml相對(duì)較輕，有可能病人處于針對(duì)病毒的免疫耐受期。王硯冰等[5]曾報(bào)道，在免疫耐受期，病毒處于持續(xù)高復(fù)制狀態(tài)，而肝臟的損傷反而輕；在整合期，血清病毒DNA的檢出率低，而肝臟的損傷反而相對(duì)較重。凝血功能四項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)中， PT的相關(guān)性均略高于其他三項(xiàng)，說明PT也是反映慢性重度乙型病毒性肝炎患者凝血功能相對(duì)的重要指標(biāo)。此外，本研究中依HBV-M分組中，同時(shí)期臨床上出現(xiàn)D、E、F三種病毒血清型患者相對(duì)較少，需后期收集樣本以擴(kuò)大樣本量。

肝臟是人體最大的消化腺，同時(shí)也在機(jī)體凝血與抗凝系統(tǒng)的調(diào)節(jié)中起著重要作用。HBV感染肝細(xì)胞并導(dǎo)致凝血功能異常的原因有：① 在肝細(xì)胞受損或壞死時(shí)，肝細(xì)胞合成除Ca2+和組織因子外的其他凝血因子的能力降低。② 由于肝臟組織受損和（或）阻塞性黃膽等原因，導(dǎo)致維生素K吸收障礙，從而引起維生素K依賴性凝血因子（FⅡ，F(xiàn)Ⅶ，F(xiàn)IX，F(xiàn)X）的前體不能轉(zhuǎn)變成有活性的凝血因子，進(jìn)一步導(dǎo)致凝血因子的減少。③肝炎病毒可以通過損傷骨髓造血干（祖）細(xì)胞、造成脾功能亢進(jìn)和產(chǎn)生免疫復(fù)合物等因素來抑制血小板的生成和影響血小板粘附、聚集、釋放等功能，致使患者血小板數(shù)量減少，壽命縮短及功能低下。④慢性乙肝患者在病程后期產(chǎn)生大量腹水，導(dǎo)致凝血因子于血管外喪失。以上多種因素作用的結(jié)果，便引起患者PT 、APTT延長(zhǎng)，相應(yīng)TT也必然隨之延長(zhǎng)，F(xiàn)IB降低[6-8]。

因此，臨床上針對(duì)慢性重度乙型肝炎患者的治療要尤其重視凝血功能的異常隨著病人體內(nèi)HBV-DNA含量的增加有降低的趨勢(shì)，特別是對(duì)于HBV-DNA含量在103 copy/ml-107 copy/ml病人或病毒血清型為大三陽的病人，應(yīng)該隨時(shí)監(jiān)測(cè)病人的凝血功能，尤其是PT和APTT。綜合考慮各項(xiàng)因素把握抗病毒治療的時(shí)機(jī)，以期獲得最佳治療效果。

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