梵凈山七葉一枝花總黃酮含量測定

摘 要：采用紫外分光光度法對不同生長年限的梵凈山珍稀藥用植物七葉一枝花總黃酮的含量進行了測定。結(jié)果表明，不同生長年限的七葉一枝花，其總黃酮含量不同。1年生的總黃酮含量為3.86mg/g，4年生的總黃酮含量為4.91mg/g，8年生的總黃酮含量為5.29mg/g。該研究可為發(fā)展銅仁藥材經(jīng)濟、提高藥農(nóng)種植積極性、帶動藥農(nóng)增收、推動地方特色藥用植物發(fā)展提供科學的理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：七葉一枝花；總黃酮；含量；梵凈山

中圖分類號 S567 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2013）20-25-02

梵凈山是國家級重點自然保護區(qū)，1986年加入聯(lián)合國教科文組織世界生物圈保護區(qū)網(wǎng)絡(luò)，以保護森林生態(tài)系統(tǒng)和珍貴動植物物種及其獨特的景觀資源為主[1]。其保護區(qū)內(nèi)及其周邊生長有珍稀藥用植物七葉一枝花。七葉一枝花（Paris polyphylla），百合科重樓屬多年生草本植物，屬珍稀瀕危植物[2]，在我國浙江、江蘇、江西、福建、安徽、湖北、四川、云南、廣西、貴州等地均有分布[3]。其藥用歷史悠久，藥用價值大[4]。以重樓和七葉一枝花為主要原料的云南白藥噴霧劑已經(jīng)是家喻戶曉的知名藥劑，50g瓶裝市場價為30元左右，現(xiàn)在已作為家庭必備的常規(guī)藥之一。作為季德勝蛇藥片主要藥用成分之一的七葉一枝花，主治清熱解毒、消腫止痛，是毒蛇、毒蟲咬傷的良藥，現(xiàn)市場銷售單價為每盒（0.4g×60粒）19元，且市場銷售量大。七葉一枝花也是宮血寧膠囊藥用成分之一。宮血寧膠囊主治功能性子宮出血、產(chǎn)后出血、縮宮、消炎，是醫(yī)院、診所、家庭常用藥，市場單價每盒（每粒裝0.13g，每盒18粒）為17.5～19.8元。七葉一枝花除了是云南白藥、季德勝蛇藥片、宮血寧膠囊的主要藥用成分之一之外，它還廣泛用于多種中藥制劑中，如抗病毒顆粒、抗病毒沖劑、紅藥、熱毒清等重要中成藥。武珊珊等歸納了七葉一枝花化學成分、藥理作用和臨床應(yīng)用等研究結(jié)果，指出七葉一枝花作為抗腫瘤藥和婦科用藥的開發(fā)具有良好的前景[5]。目前，七葉一枝花原材料的市場收購價至少140元/kg以上，零售價800～2 000元/kg。國內(nèi)市場需求量達3 000t以上，而現(xiàn)供應(yīng)量僅為1 500多t，供求矛盾突出[6]。據(jù)有關(guān)分析報告指出，預(yù)計未來2a之內(nèi)，新興醫(yī)藥市場的市場潛力年度增幅將高達19%。伴隨著科學技術(shù)和醫(yī)藥技術(shù)的飛速發(fā)展，綜合社會各階層的需求，以七葉一枝花為原料開發(fā)一系列中藥、中成藥、美容產(chǎn)品及其他附屬產(chǎn)品越來越多，從而帶動一批醫(yī)藥企業(yè)和種植企業(yè)的發(fā)展。由于穩(wěn)定、確切的療效和新功能的發(fā)現(xiàn)，七葉一枝花藥材的需求逐年增多，其開發(fā)前景大。目前，有關(guān)七葉一枝花的研究主要集中在人工栽培技術(shù)[7-8]、皂苷含量[9]和引種馴化[10]等方面。用比色法測定總黃酮含量已經(jīng)廣泛應(yīng)用于棗果、刺梨、葛根、苦杏仁和楊梅[11-15]等植物。筆者用紫外分光光度法對梵凈山珍稀藥用植物七葉一枝花總黃酮含量進行了測定，旨在為發(fā)展銅仁藥材經(jīng)濟、提高藥農(nóng)種植積極性、帶動藥農(nóng)增收、推動地方特色藥用植物發(fā)展提供科學的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 材料 1年生的七葉一枝花購自梵凈山保護區(qū)內(nèi)藥農(nóng)；4年生和8年生的七葉一枝花采自銅仁梵凈山保護區(qū)周邊地區(qū)。

1.1.2 試劑 蘆丁、無水乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉，以上藥品和試劑均為分析純。

1.1.3 儀器設(shè)備 T6新世紀紫外可見分光光度計，AL204型電子天平，DHG-9140A型電熱恒溫鼓風干燥箱，80-2離心機，超聲波清洗器。

1.2 總黃酮含量的測定[16]

1.2.1 標準曲線的繪制 精確稱取10mg蘆丁，用90%乙醇定容至100mL，精確量取0、0.2、0.5、1、2、3、4mL分別置于10mL容量瓶中，加入5g/100mL亞硝酸鈉0.4mL，放置6min后加入10g/100mL硝酸鋁0.4mL，放置6min后再加入4g/100mL的氫氧化鈉4mL，最后用蒸餾水定容至100mL，搖勻，放置15min后在波長510nm處測定吸光度。其標準曲線方程為y=0.082 3x-0.003 3，R2=0.999 3。標準曲線見圖1。

1.2.2 樣品的測定 稱取七葉一枝花粉末1.000g于100mL三角瓶中，以90%的乙醇作為浸提試劑，在70℃下進行超聲浸提3次，每次30min，3 000r/min離心10min，上清液加入5g/100mL亞硝酸鈉0.4mL，放置6min后加入10g/100mL硝酸鋁0.4mL，放置6min后再加入4g/100mL的氫氧化鈉4mL，最后用蒸餾水定容至100mL，搖勻，放置15min后以空白溶液作為對照，在波長510nm處測定吸光度。

2 結(jié)果與分析

不同年限的梵凈山七葉一枝花，其總黃酮含量也不同。1年生的七葉一枝花總黃酮含量為3.86mg/g，4年生的七葉一枝花總黃酮含量為4.91mg/g，8年生的七葉一枝花總黃酮含量為5.29mg/g。該研究可為發(fā)展銅仁藥材經(jīng)濟、提高藥農(nóng)種植積極性、帶動藥農(nóng)增收、推動地方特色藥用植物發(fā)展提供科學的理論依據(jù)。

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（責編：徐世紅）