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    三種梅毒血清學(xué)檢驗方法在臨床中的應(yīng)用

    2013-12-04 12:25:02歐慧
    中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新 2013年22期
    關(guān)鍵詞:梅毒特異性篩查

    歐慧

    梅毒是由梅毒螺旋體(treponema pallidum,TP)的病毒引起的一種慢性全身性性傳播疾病。近年來,梅毒在全球范圍內(nèi)的發(fā)病率逐年上升,且有不斷蔓延的趨勢[1]。蒼白密螺旋體感染機體后可產(chǎn)生兩種抗體[2],即抗梅毒螺旋特異性抗體及非特異性抗體。目前臨床常用血清學(xué)檢測方法較多,為篩選有效的檢測試劑,現(xiàn)對酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)3種不同的血清學(xué)檢測方法在梅毒診斷中的結(jié)果進(jìn)行分析,現(xiàn)報告如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 標(biāo)本來源于2011年12月-2012年12月的職業(yè)健康體檢10 286例,臨床常規(guī)ELISA梅毒篩選病例,其中S/CO>1陽性標(biāo)本675例。年齡18~73歲,平均51歲;男310例,女365例。

    1.2 儀器與試劑 儀器采用全自動酶免疫分析儀(奧地利tecan),電熱恒溫水浴箱,梅毒旋轉(zhuǎn)震蕩器。TRUST試劑盒由上海榮盛生物有限公司提供;ELISA試劑盒由北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司提供;TPPA試劑盒為日本富士瑞必歐株式會社生產(chǎn)。上述試劑均為合格產(chǎn)品,并在有效期內(nèi)使用。

    1.3 方法 所有標(biāo)本采用ELISA檢測法進(jìn)行梅毒篩查,陽性者再采用TPPA檢測法確診,并檢測TRUST(血清作原倍、1:2、1:4、1:8稀釋),判定結(jié)果肉眼清晰可見并作詳細(xì)記錄。TRUST、ELISA、TPPA 檢測的操作和結(jié)果判定均按照試劑盒說明書嚴(yán)格進(jìn)行。

    2 結(jié)果

    2.1 ELISA法檢出陽性標(biāo)本675例中,經(jīng)TPPA確證陽性657例,陽性符合率97.33%。TRUST法檢出陽性424例,均經(jīng)TPPA確證陽性,而251例TRUST陰性中,TPPA確證試驗陽性233例,18例陰性。而對于ELISA篩查陽性而TRUST陰性的標(biāo)本有7.17%(18/251)的假陽性結(jié)果,見表1。

    表1 ELISA法檢出陽性標(biāo)本TPPA和TRUST檢測結(jié)果 例

    2.2 ELISA法是否存在假陰性結(jié)果研究 筆者對ELISA法篩查疑似標(biāo)本(S/CO在0.70~0.99)58例做TPPA和TRUST檢測,結(jié)果TRUST均為陰性,而TPPA陽性15例,見表2。

    表2 ELISA法檢出疑似標(biāo)本的TPPA和TRUST檢測結(jié)果 例

    3 討論

    ELISA法常用于大量樣品的篩查及臨床診斷[3]。其特異性和靈敏度高達(dá)100%和99.5%[4],且檢測方法快速簡便,影響因素少,由于采用自動化的操作和檢測方法,所以可以對大批量的樣品進(jìn)行分析處理,結(jié)果客觀準(zhǔn)確。明膠凝集試驗TPPA其優(yōu)點在于靈敏度高,特異性好,不受生物因素影響,而且能測定抗體的效價。但價格昂貴,且需主觀判斷結(jié)果,主觀性較高,因而限制了其在醫(yī)院的廣泛應(yīng)用。TRUST簡單快速,結(jié)果清晰易辨,穩(wěn)定性相對較好,但會出現(xiàn)假陽性,故應(yīng)結(jié)合其他檢測方法同時進(jìn)行檢測,只有兩種檢測方法同時檢測為陰性,方能確認(rèn)沒有感染梅毒[5]。

    本研究結(jié)果顯示ELISA法和TRUST同時陽性的標(biāo)本424例,經(jīng)TPPA確證均為陽性,符合率為100%,這說明ELISA篩查陽性標(biāo)本,并TRUST檢出陽性,可報告梅毒抗體確認(rèn)試驗陽性。另外本研究結(jié)果也顯示ELISA法篩查陽性而TRUST檢出陰性的標(biāo)本有7.17%的假陽性結(jié)果。因此,如果ELISA篩查陽性,而TRUST檢出陰性標(biāo)本,進(jìn)一步做TPPA確證,對排除假陽性是非常必要的。

    對血清中極低濃度的抗體檢測,ELISA要先于TPPA[6]。但本組ELISA 58例疑似病例TPPA檢出15例陽性,分析病例組成和試劑質(zhì)量的差異是造成各種試劑敏感性和特異性文獻(xiàn)報道不一的原因[7-9]。由于兩者敏感性的差異,作TPPA確證對于部分隱性或潛伏期梅毒患者的檢測,具有重要臨床意義。因此對于ELISA篩查S/CO值0.70~0.99的臨床梅毒疑似病例,應(yīng)作TPPA確認(rèn)試驗。

    綜上所述,TPPA準(zhǔn)確可靠,但由于成本較高,結(jié)果難以自動化,是目前公認(rèn)的梅毒血清學(xué)確證試驗[10];ELISA操作簡便,靈敏度高、特異性好,結(jié)果判斷客觀準(zhǔn)確,自動化程度高等優(yōu)點,可作為大批量標(biāo)本篩查的首選方法;而TRUST檢測一期梅毒靈敏度較高,可指導(dǎo)臨床治療[3],如果TRUST陰性,應(yīng)進(jìn)一步作TPPA確證,若TPPA陰性,報告TPPA確證陰性,若TPPA陽性,則報告TRUST陰性和TPPA陽性。筆者建議3種檢測方法結(jié)合應(yīng)用能更有效提高梅毒臨床診斷符合率,對及早診斷臨床梅毒和指導(dǎo)治療、控制梅毒蔓延有重要臨床意義。

    [1]Srisupanant M,Wiwanitkit V.Screening for syphilis by serology of Thai workers going abroad[J].Travel Med Infect Dis,2009,7(3):169-170.

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