黃連解毒固體分散體制備方法及質(zhì)量評價

張遂平，郭芳茹，苑青艷，楊慧敏，楊 果

(河南亞衛(wèi)動物藥業(yè)有限公司，鄭州450008)

固體分散體系指藥物以分子、膠態(tài)、微晶等狀態(tài)均勻分散在某一固態(tài)載體物質(zhì)中所形成的分散體系。將藥物制成固體分散體系所采用的制劑技術(shù)稱為固體分散技術(shù)，通過此技術(shù)可使藥物高度分散，增加藥物表面積，促進(jìn)藥物的溶解與吸收，從而提高藥物制劑的生物利用度，增加藥效。目前文獻(xiàn)報道的有關(guān)不溶于水的化藥作為固體分散體，單體中藥固體分散體的研究大多是將中藥提取物制成固體分散體。但是每種中藥的成分都非常復(fù)雜，中藥藥效的發(fā)揮是各種成分共同作用的結(jié)果，只使用其單一成分難免會造成療效的降低和材料的浪費(fèi)。試驗(yàn)將復(fù)方中藥微粉200目，以黃連解毒散中的鹽酸小檗堿溶出度為指標(biāo)，通過一系列對比和正交試驗(yàn)，制備出黃連解毒固體分散體。通過對黃連解毒固體分散體的性狀、粒度、含量及穩(wěn)定性等方面對其進(jìn)行質(zhì)量評價。

1 材料

1.1 儀器 色譜儀:Agilent 1100高效液相色譜系統(tǒng);KQ2200E型超聲波清洗器;DXF-600A型多功能粉碎機(jī);SHH-250SD型藥品穩(wěn)定性試驗(yàn)箱，SHH-100GD型藥品加速試驗(yàn)箱，重慶市永生實(shí)驗(yàn)儀器廠產(chǎn)品;溶出度測定儀;真空干燥箱。

1.2 試劑與藥品 黃連、黃芩、黃柏、梔子，均為亳州市京皖中藥飲片廠產(chǎn)品，批號分別為:20090601、20090501、20090721、20091012;鹽酸小檗堿對照品:批號Z0220712，含98.7%，中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所;黃連解毒散固體分散體，河南動物藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，批號 20100225、20100226、20100227;黃連解毒散，河南亞衛(wèi)動物藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，批號201001131;乙腈、聚乙烯吡咯烷酮(PVPk30)等試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 單因素試驗(yàn) 設(shè)計(jì)單因素試驗(yàn)，考察中藥粉碎細(xì)度、制備工藝、溶劑用量及浸潤時間、載體種類和載體比例對固體分散體溶出度的影響，試驗(yàn)內(nèi)容及結(jié)果如表1所示。

表1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

鹽酸小檗堿溶出度的測定方法:精密稱取黃連解毒固體分散體3 g，置于溶出杯中，溫度(37±0.5)℃，溶出介質(zhì)為900 mL，0.1 mol/L的鹽酸(脫氣處理)，轉(zhuǎn)速為100 r/min，于 5、10、15、30、45、60、90 min取樣5 mL，采用微孔濾膜過濾，同時補(bǔ)加等量的人工胃液，按照HPLC法測定樣品中鹽酸小檗堿的含量[1]，色譜條件如下:色譜柱為Alltima C18(4.6 mm × 250 mm，5 μm)，流動相為乙腈-2 mL/L磷酸水溶液(30∶70)，柱溫30℃，流速1.0 mL/min，檢測波長為345 nm，進(jìn)樣量為10 μL。

2.2 多因素試驗(yàn)優(yōu)化處方和工藝 采用三因素三水平正交試驗(yàn)的方法對載體和藥物的比例、熔融溫度和攪拌時間進(jìn)行優(yōu)化，按照正交試驗(yàn)表制備出固體分散體樣品。

黃連解毒固體分散體的制備工藝為:在黃連解毒散200目中藥微粉中加入適量乙醇將藥物浸潤;再將載體PEG6000加熱熔融，泊洛沙姆F68用適量乙醇溶解，將載體與被浸潤的藥物混合，加熱條件下勻速攪拌一段時間，待溶劑揮發(fā)后，迅速置于-4℃使之固化，于真空干燥器中干燥后，粉碎、過5號篩、分裝即得。

按照2.1的方法測定溶出度，并對結(jié)果進(jìn)行方差分析，結(jié)果如表2、3所示。

正交試驗(yàn)分析結(jié)果表明三個因素對黃連固體分散體的體外溶出度的影響程度為:攪拌時間＞溫度＞載體與藥物比例。攪拌時間越長、隨溫度的升高，體外溶出度越高，由于PEG6000作為載體而存在，其用量太少不利于熔融狀態(tài)固體分散體的固化，用量太多時，不利于溶劑的揮發(fā)和粉碎，綜合考慮各因素，最終優(yōu)化的工藝條件為:藥物∶載體=3∶1，攪拌溫度為100℃，攪拌時間為1 h。

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

表3 正交試驗(yàn)方差分析結(jié)果

2.3 溶出度測定[2]

2.3.1 中藥散劑-載體物理混合物的制備 按照黃連解毒固體分散體的處方，取適量黃連解毒散中藥粉與PEG6000和泊洛沙姆均勻混合即得。

2.3.2 測定方法 精密稱取黃連解毒固體分散體3 g，置于溶出杯中，溫度(37±0.5)℃，溶出介質(zhì)為900 mL 0.1 mol/L的鹽酸(脫氣處理)，轉(zhuǎn)速為100 r/min，于 5、10、15、30、45、60、90 min 取樣5 mL，采用微孔濾膜過濾，同時補(bǔ)加等量的人工胃液，按照HPLC法測定樣品中鹽酸小檗堿的含量，三批在90 min時的平均溶出度為93.2%，測定結(jié)果如圖1所示。

圖1 黃連解毒散固體分散體與普通散劑和物理混合物的溶出度比較

由圖可知，黃連解毒固體分散體與普通散劑和載體物理混合物相比，有較好的溶出行為，且重現(xiàn)性較好。

2.4 基本性質(zhì)及含量測定 參照參考文獻(xiàn)[3]，測定以下檢測指標(biāo)。

2.4.1 性狀 取適量樣品在明亮處觀察，為色澤均勻的黃棕色粉末，無花紋，色斑。

2.4.2 粒度 稱取100 g樣品，置5號藥典篩內(nèi)，通過5號篩的樣品平均為96.3%。

2.4.3 流動性 采用注入法，測得的平均休止角為25°左右，說明流動性較好。

2.4.4 水分 采用減壓干燥法，水分平均含量為5.3%，結(jié)果如表1所示。

2.4.5 含量 采用高效液相色譜法[4]，色譜柱為Alltima C18(4.6 mm ×250 mm，5 μm)，柱溫30 ℃，流動相:乙腈 -2 mL/L磷酸水溶液(體積比為30∶70)，檢測波長為 345 nm，流速為 1.00 mL/min。

三批黃連解毒固體分散體中鹽酸小檗堿的平均含量為12.98 mg/g，結(jié)果如表1所示。

2.5 加速試驗(yàn) 將三批黃連解毒固體分散體粉末置于培養(yǎng)皿中，攤成厚度小于5 mm的薄層，置于藥物穩(wěn)定性試驗(yàn)箱中，在溫度為40℃ ±2℃，RH75%±5%的條件下放置6個月，試驗(yàn)期間第1個月、2個月、3個月、6個月末分別取樣一次，對黃連解毒固體分散體的外觀、鹽酸小檗堿的含量和溶出度進(jìn)行考察，與0 d結(jié)果比較。

表4 黃連解毒散固體分散體質(zhì)量評價結(jié)果

三批黃連解毒固體分散體的外觀性狀均為黃色粉末，其它數(shù)據(jù)如表5。

采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)確定的處方和工藝條件制備出3批黃連解毒散固體分散體樣品，并對鹽酸小檗堿的含量、溶出度及制劑穩(wěn)定性進(jìn)行了考察，溶出度結(jié)果分別為 93.23%、92.40%、92.12%，在加速條件下放置6個月，性狀和含量無明顯變化，說明該工藝穩(wěn)定可靠，適用于制備黃連解毒散固體分散體。

表5 黃連解毒固體分散體加速試驗(yàn)穩(wěn)定性

3 討論

由于影響固體分散體溶出度的因素很多，試驗(yàn)先采用單因素試驗(yàn)的方法對制備工藝、載體種類、溶劑用量等因素進(jìn)行了考察，再采用正交試驗(yàn)的方法對處方和工藝進(jìn)行優(yōu)化，得出制備黃連解毒散固體分散體理想的工藝條件。

試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)使用不同的載體材料，對藥物的溶出度影響較大，PEG6000的助溶效果優(yōu)于PVPk30和F68，可能是聚乙二醇類載體材料的分子量大，且分子是由兩列平行的螺狀鏈組成，經(jīng)熔融再凝固時，螺旋的空間造成晶格的缺損，這種缺損可改變結(jié)晶體的性質(zhì)，如溶解度、溶出速率、吸附能力以及吸濕性等[5]。載體材料首先可提高藥物的可潤濕性，如泊洛沙姆F68作為一種表面活性劑，具有増溶和潤濕作用[6]，因此藥物的溶出速率和吸收速率均可得到相應(yīng)提高，保證了藥物的分散性，加快其溶出和吸收，另外載體材料對藥物有抑晶作用，在溶劑蒸發(fā)過程中，由于氫鍵作用和絡(luò)合作用使粘度增大，阻礙了藥物分子形成結(jié)晶[7]。管清香[8]研究報道，聯(lián)合載體制備的固體分散體的溶出速率比單一載體的固體分散體快，與本試驗(yàn)的研究結(jié)果相一致。

試驗(yàn)對黃連解毒固體分散體的外觀形狀、粒度、水分、流動性進(jìn)行了考察，均符合藥典要求，體外溶出行為良好，重現(xiàn)性好，因此該藥屬于一種速釋型固體分散體，在胃腸道中可迅速釋放，保證了藥效的迅速發(fā)揮。

穩(wěn)定性考察中溶出度的降低可能是由于藥物有效成分的降解或固體分散體的老化引起的，固體分散體在貯存過程中可能會變硬、析出晶體，從而降低藥物的體外溶出度和生物利用度，處方和制備方法不當(dāng)或貯存條件不適合時，老化速度會加快[9]，本產(chǎn)品通過6個月的加速試驗(yàn)，外觀無明顯變化，溶出度和含量無明顯下降現(xiàn)象，說明該固體分散體的載體材料和制備方法合理，在40℃以下儲存是比較穩(wěn)定的。

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