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    茜素紅荷移光度法測定阿魏酸哌嗪

    2013-11-21 01:39:32潘自紅趙曉軍康都羨劉喜芳
    化學(xué)研究 2013年5期
    關(guān)鍵詞:茜素哌嗪光度法

    潘自紅,趙曉軍,康都羨,2,劉喜芳

    (1. 平頂山學(xué)院 化學(xué)化工學(xué)院,河南 平頂山 467000; 2. 中國平煤神馬能源化工集團,河南 平頂山 467000)

    阿魏酸哌嗪(piperazine ferulate,PF),原名保腎康,是傳統(tǒng)中藥川芎的有效成份阿魏酸經(jīng)化學(xué)方法合成的藥物[1],具有抗凝、擴張微血管、增加冠脈流量、解除血管痙攣、抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集等作用,臨床研究也表明阿魏酸哌嗪具有減少蛋白尿,改善腎功能綜合癥等[2]作用. 目前已報道測定阿魏酸哌嗪的方法有高效液相色譜法[3-5],分光光度法[6]等. 分光光度法因具有運行成本低,設(shè)備操作簡單、便于常規(guī)實驗室普遍使用等特點,而受到重視. 用荷移分光光度法測定阿魏酸哌嗪的方法尚未見文獻報道. 實驗研究發(fā)現(xiàn),阿魏酸哌嗪分子中的仲胺基(-NH-)上的氮原子的孤對電子具有一定活性,而茜素紅分子結(jié)構(gòu)中含有醌基,兩者在水溶液中可發(fā)生荷移反應(yīng)形成紫紅色1∶1復(fù)合物,其在524 nm處有特征吸收,據(jù)此,建立了荷移光度法測定藥物制劑中阿魏酸哌嗪含量的新方法.

    1 實驗部分

    1.1 儀器與試劑

    UV-2550雙光束紫外-可見分光光度計(日本島津公司);722s/723可見分光光度計(上海精密科學(xué)儀器有限公司);CS-501超級恒溫儀(重慶實驗設(shè)備廠).

    3.0×10-3mol·L-1茜素紅水溶液;阿魏酸哌嗪純品(湖南千金湘江藥業(yè)有限公司提供),配置成400 mg·L-1的水溶液. 所有其他試劑均為試劑純,實驗用水為二次蒸餾水.

    1.2 實驗方法

    準(zhǔn)確移取適量阿魏酸哌嗪對照品或試樣溶液適量加入25.00 mL容量瓶中,然后加入4.00 mL濃度為3.0×10-3mol·L-1的茜素紅溶液;用水稀釋至刻度,搖勻;以試劑空白作參比,用1 cm比色皿,在524 nm處測體系的吸光度.

    2 結(jié)果與討論

    2.1 吸收光譜

    按分析步驟配制溶液,以水為參比掃描阿魏酸哌嗪(曲線1)和茜素紅溶液(曲線2)的吸收光譜和以試劑空白為參比掃描體系的吸收光譜(曲線3),結(jié)果見圖1. 阿魏酸哌嗪在380~700 nm范圍內(nèi)基本無吸收,而茜素紅溶液在423 nm處有強吸收. 當(dāng)向茜素紅溶液中加入少量的阿魏酸哌嗪溶液后溶液呈現(xiàn)紫紅色,說明二者發(fā)生顯色反應(yīng),并有新產(chǎn)物生成,其在524 nm處有最大吸收. 為消除試劑干擾,以試劑空白為參比,于524 nm處測定生成物的吸光度.

    2.2 反應(yīng)時間及穩(wěn)定性的影響

    按實驗方法測量反應(yīng)時間對體系吸光度的影響,結(jié)果如圖2所示. 由圖2可見,該荷移反應(yīng)迅速,在試劑加入同時反應(yīng)基本完成,且吸光度值在1 h內(nèi)基本不隨時間的變化而變化,滿足定量測定的要求.

    圖1 體系的吸收光譜Fig.1 Absorption spectra of the system

    圖2 反應(yīng)時間對體系吸光度的影響Fig.2 Effect of the time on the absorption

    2.3 茜素紅用量的影響

    按實驗方法考察了3.0×10-3mol·L-1茜素紅水溶液的加入量對體系吸光度的影響,結(jié)果如圖3所示. 由圖可見,當(dāng)茜素紅的用量低于3.50 mL時,體系的吸光度較低;當(dāng)茜素紅的加入量在3.50~7.00 mL之間變化時,體系的吸光度基本不變. 實驗選用茜素紅的用量為 4.00 mL.

    2.4 溫度的影響

    按照實驗方法配置5份相同濃度的阿魏酸哌嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別放置在15 ℃、20 ℃(室溫)、30 ℃、40 ℃、50 ℃恒溫水槽中加熱10 min,然后冷卻至室溫條件下測定其吸光度,結(jié)果如圖4所示. 實驗表明:溫度較低時,體系的吸光度較低;溫度在室溫及以上時,體系吸光度無明顯的增加,說明短時間加熱對體系的吸光度無明顯影響,故實驗選擇室溫以簡化實驗操作.

    圖3 茜素紅用量對體系吸光度的影響Fig.3 Effect of volume of alizarin red on the absorption

    圖4 溫度對體系吸光度的影響Fig.4 Effect of temperature on the absorption

    2.5 工作曲線、檢出限及精密度

    按照分析步驟配制阿魏酸哌嗪系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,并根據(jù)吸光度繪制工作曲線. 實驗表明,阿魏酸哌嗪溶液的濃度在1.60~48.0 mg·L-1范圍內(nèi)時,濃度與吸光度呈良好的線性關(guān)系,線性回歸方程為A= 0.021 07+0.003 93c(mg·L-1),線性相關(guān)系數(shù)R= 0.999 2,表觀摩爾吸光系數(shù)為1.86×103L·mol-1·cm-1.

    平行測定11份試劑空白溶液,以測得吸光度的標(biāo)準(zhǔn)偏差的三倍除以工作曲線擬合方程的斜率,求出阿魏酸哌嗪的檢出限為1.19 mg·L-1. 對含量為32.0 mg·L-1的阿魏酸哌嗪平行測定11次,其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.5%.

    2.6 復(fù)合物組成的測定

    應(yīng)用飽和法和等摩爾連續(xù)變化法測定復(fù)合物的組成. 兩種方法測定結(jié)果表明荷移反應(yīng)生成物中阿魏酸哌嗪與茜素紅的組成比均為1∶1.

    2.7 分析應(yīng)用

    按照實驗步驟測定了市售藥物制劑中阿魏酸哌嗪的含量. 按照實驗方法對樣品進行測定,并做了加標(biāo)回收實驗(表1). 由表可知,該實驗所得的加標(biāo)回收率在97.5%~100.9%之間.

    表1 樣品及回收率測定Table 1 The determination of the samples and recoveries

    3 結(jié)論

    利用阿魏酸哌嗪與茜素紅荷移的顯色反應(yīng),建立了測定藥物中阿魏酸哌嗪新的分光光度法. 考察了分光光度法測定阿魏酸哌嗪的影響因素、適宜的反應(yīng)條件等,并應(yīng)用該法測定了藥物制劑中阿魏酸哌嗪的含量. 所建立的方法具有簡單、快速等特點.

    參考文獻:

    [1] 郭玉麟,鐘三保. 阿魏酸哌嗪的合成及其藥理與臨床研究[J]. 華西藥學(xué)雜志, 1987, 2(1): 52-54.

    [2] 凌均耀,余廷龍,劉先容,等. 阿魏酸哌嗪治療腎小球疾病的近期療效[J]. 中華腎臟病雜志,1991, 7(5): 292-293.

    [3] 高秀蓉,廖昌軍,許小紅,等. RP-HPLC測定尿液中阿魏酸哌嗪的含量[J]. 華西藥學(xué)雜志, 2006, 21(6): 579-580.

    [4] 何 麗,陳德梅,符乃光. 高效液相色譜法測定阿魏酸哌嗪片的含量[J]. 中國藥事, 2005, 19(1): 35-36.

    [5] 魏 月. 高效液相色譜化學(xué)發(fā)光法測定阿魏酸哌嗪[J]. 生命科學(xué)儀器, 2008, 6(10): 38-40.

    [6] 吳伶俐,魏獻軍,高林曉,等. 1,2-萘醌-4-磺酸鈉作為顯色劑分光光度法測定阿魏酸哌嗪[J]. 分析試驗室, 2009, 28(6): 53-56.

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