電噴霧質(zhì)譜在金屬配合物研究中的應(yīng)用

賈曉波，卜站偉，李興華，趙文善

(河南大學(xué) 化學(xué)化工學(xué)院，河南 開封 475004)

質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域很廣，在天然產(chǎn)物[1-6]、人工合成的中間體[7]、藥物[8-9]、合成高分子[10]、氨基酸[11-14]及蛋白質(zhì)[15-17]等領(lǐng)域均有應(yīng)用. 但是以金屬配合物為代表的非共價鍵化合物, 由于其鍵能相對于共價鍵而言較弱, 在傳統(tǒng)質(zhì)譜電離技術(shù)如電子轟擊電離源(EI源)等高能量的電離過程中會被破壞，所以傳統(tǒng)質(zhì)譜技術(shù)很少用于研究金屬配合物等非共價化合物. 隨著質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展特別是20世紀(jì)80年代以后電噴霧電離(ESI)技術(shù)(“軟電離”技術(shù))的發(fā)展，使得質(zhì)譜方法逐漸成為研究金屬配合物、確定未知化合物結(jié)構(gòu)、自組裝膜與膠束[18-19]及探索化學(xué)反應(yīng)機(jī)理強(qiáng)有力的分析工具之一.

電噴霧電離技術(shù)之所以能成為研究金屬配合物的工具，是因?yàn)殡妵婌F質(zhì)譜獨(dú)特的“軟電離”技術(shù)，使樣品溶液在通過帶高電壓的不銹鋼毛細(xì)管柱后形成帶電荷的小液滴，然后經(jīng)過脫除溶劑，使待測物以單電荷或多電荷的形式進(jìn)入氣相，由于在電離過程中不涉及任何高能量的激發(fā)過程，對樣品的破壞程度很小，因此電噴霧質(zhì)譜可以用來研究金屬配合物及以非共價鍵結(jié)合的化合物.

1 電噴霧質(zhì)譜研究金屬配合物的優(yōu)勢

研究金屬配合物的方法很多，如譜學(xué)方法(紅外光譜法、紫外光譜法、光散射法、熒光法、X射線晶體衍射法、NMR等)、量熱法以及色譜法等. 這些方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，如NMR能為結(jié)構(gòu)分析提供豐富的信息，但NMR檢測所需的樣品必須是純凈的，而樣品的提純又非常困難[20]；X射線晶體衍射法需要提供樣品的晶體，限制了在結(jié)構(gòu)表征方面的應(yīng)用. 此外，UV、IR等僅僅可以提供有限的結(jié)構(gòu)信息[21]. 質(zhì)譜法雖然不能像NMR和X射線晶體衍射法直接提供結(jié)構(gòu)上的精確信息，但是質(zhì)譜可以提供重要的化學(xué)當(dāng)量信息，對樣品的純度要求不高，所需樣品量少、靈敏度高、檢測時間短. 相對于其他傳統(tǒng)方法，質(zhì)譜法在研究金屬配合物方面具有一些特定的優(yōu)勢，MCLAFFERTY就提出過質(zhì)譜法有4個“S”即: Specificity, Speed,Sensivvity, Stoichiometry[22]方面的優(yōu)勢. 電噴霧電離過程如圖1所示.

圖1 電噴霧電離化過程Fig.1 Electrospray ionization process

2 電噴霧質(zhì)譜在研究金屬配合物中的應(yīng)用

2.1 測定金屬配合物的相對分子質(zhì)量

由于電噴霧質(zhì)譜的“軟電離”特點(diǎn)，使得金屬配合物在電離過程中結(jié)構(gòu)不遭受破壞，從而能得到準(zhǔn)確可靠的相對分子質(zhì)量信息. FENG[23]利用電噴霧質(zhì)譜檢測了不同pH下水溶液中金屬蛋白酶(Matrilysin)與金屬離子(Zn2+和Ca2+)結(jié)合的當(dāng)量關(guān)系. 王志強(qiáng)[24]等利用電噴霧質(zhì)譜負(fù)離子模式測定了反式-二氯四吡啶合釕的電噴霧質(zhì)譜行為，得到了[RuCl2(py)4(CH3OH)]-離子峰，m/z=485.2. 如圖2所示.

圖2 [RuCl2(py)4(CH3OH)]-的電噴霧質(zhì)譜圖Fig.2 ESI-MS spectra of [RuCl2(py)4(CH3OH)]-

孫世國等[25]利用電噴霧質(zhì)譜研究了2,2′-聯(lián)吡啶-4,4′-二羧酸乙酯與過渡金屬錸的系列配合物，測定了其相對分子質(zhì)量，總結(jié)了不同配合物破碎的難易程度.

2.2 用于金屬配合物的結(jié)構(gòu)分析和表征

質(zhì)譜法測定的相對分子質(zhì)量是用來表征化合物結(jié)構(gòu)的基本信息，根據(jù)分子裂解規(guī)律與分子結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系，通過m/z分子離子峰及其強(qiáng)度，可以推測未知化合物的可能結(jié)構(gòu).

WU等[26]對雙金屬氧化釩化合物進(jìn)行了電噴霧質(zhì)譜研究，由串聯(lián)質(zhì)譜測試產(chǎn)生的碎片離子m/z=214，200和182得知，這些碎片元素組成分別為V2O7、C3NV2O3和V2O5，揭示了化合物中含有V-O-V橋鍵.

隨著電噴霧電離技術(shù)和FTICR、FAB以及TOF等高分辨質(zhì)量分析器的聯(lián)用，電噴霧質(zhì)譜能更加精確地測定金屬配合物的相對分子質(zhì)量，為其結(jié)構(gòu)的分析和表征進(jìn)一步提供了準(zhǔn)確、可靠的信息.

2.3 用于研究金屬配合物的選擇性和穩(wěn)定性

用電噴霧質(zhì)譜研究以金屬配合物為代表的非共價鍵化合物的結(jié)合選擇性常采用競爭的方法，在質(zhì)譜圖中比較不同配合物離子的豐度來評估不同配體的結(jié)合選擇性. 該方法所需樣品極少(通常在nmol級)，是衡量體系中結(jié)合選擇性和親和力的有效、準(zhǔn)確、快速的方法.

GANEM等[27]于1991年首次將電噴霧質(zhì)譜用于研究免疫蛋白FKBP12和幾種不同的免疫抑制藥物形成的非共價鍵化合物，電噴霧質(zhì)譜在非共價鍵化合物研究中的應(yīng)用越來越多并逐漸成為研究的主要手段之一.

KEMPEN等人[28]利用電噴霧質(zhì)譜考察了側(cè)基分別為甲氧基、羧酸、酯或酰胺的二苯并-15-冠-5-套索醚對Na+、Li+、K+的結(jié)合選擇性，發(fā)現(xiàn)在甲醇溶液中套索醚對Na+的選擇性最好.

BLAIR等[29]人利用電噴霧質(zhì)譜研究Pb2+、Hg2+、Cu2+、Ca2+與二氮-15冠-5的選擇性結(jié)合，其中Pb2+與籠型穴狀配體衍生物結(jié)合，Hg2+則與大部分籠型化合物結(jié)合. 該方法已經(jīng)用于評估生化體系中的非共價復(fù)合物的親和力和選擇性，如蛋白-藥物[30-32]、DNA-藥物[32-33]、蛋白-多肽[34]等.

由于有些金屬配合物在不同條件下穩(wěn)定性不同，因此測定金屬配合物的結(jié)合常數(shù)對于選擇合成配合物的條件十分重要. 近年來，RAGULAN RAMANATHAN等人[35-38]分別利用電噴霧技術(shù)測定了非共價化合物間的結(jié)合常數(shù)，該方法適合于研究配體和金屬離子形成金屬配合物的結(jié)合常數(shù).

張海震[39]等利用競爭平衡的方法，使用電噴霧質(zhì)譜測定了絡(luò)合物的結(jié)合常數(shù)，推導(dǎo)出了待測絡(luò)合物[18-冠-6—Na]+、[二苯并-18-冠-6—K]+和[二苯并-18-冠-6—Na]+的結(jié)合常數(shù).

YONG等[40]依據(jù)電噴霧質(zhì)譜測定了結(jié)合和游離的主、客體離子豐度，計(jì)算了一系列套索冠醚-堿金屬離子復(fù)合物的結(jié)合常數(shù).

2.4 用于研究相關(guān)反應(yīng)機(jī)理

通過檢測有機(jī)反應(yīng)活性中間體，可以跟蹤反應(yīng)進(jìn)程和探究反應(yīng)機(jī)理. 電噴霧質(zhì)譜可以迅速檢測到反應(yīng)活性中間體的質(zhì)核比、同位素分布、以及活性中間體離子的演變過程[41-42]. 目前，該方法在檢測反應(yīng)活性中間體、驗(yàn)證反應(yīng)機(jī)理方面取得了突破性的進(jìn)展[43-44].

WILSON[45]等驗(yàn)證了電噴霧質(zhì)譜可以用于檢測反應(yīng)瞬態(tài)中間體，他們利用一系列有機(jī)膦反應(yīng)(Wittig、Mitsunobou、Staudinger反應(yīng))進(jìn)行了驗(yàn)證，檢測到了所有的離子以及許多中性物種的質(zhì)子化離子，證明了電噴霧質(zhì)譜方法可直接用于反應(yīng)中間體的研究.

ERBERLIN等[46]利用電噴霧質(zhì)譜研究了Heck偶聯(lián)反應(yīng)的機(jī)理，成功地捕捉到了反應(yīng)的活性中間體，為反應(yīng)機(jī)理的論證提供了依據(jù). 如圖3所示.

圖3 芳烴重氮鹽與Heck反應(yīng)的催化機(jī)理Fig.3 Proposed catalytic cycle for the Heck reaction with arene diazonium salts

麻生明[47]等在無水無氧條件下，通過快速冷卻的方法降低反應(yīng)速度，直接利用電噴霧質(zhì)譜進(jìn)行了Pd(0)催化的三組分串聯(lián)雙加成環(huán)化反應(yīng)研究，成功檢測到了活潑中間體離子(圖4)，并推測了反應(yīng)的可能機(jī)理. 如圖5所示.

圖4 Pd(0)催化的三組分串聯(lián)雙加成環(huán)化反應(yīng)中間體的質(zhì)譜圖Fig.4 Pd(0)-catalyzed three-component tandem double reaction addition-cyclization reaction

圖5 Pd (0)催化三組分串聯(lián)雙加成環(huán)化反應(yīng)研究的機(jī)理圖Fig.5 The mechanism of Pd(0)-catalyzed three-component tandem double addition-cyclization reaction

RAO Dun Yan等[48]利用電噴霧質(zhì)譜研究了SalenCr(Ⅲ)1a/DMAP、SalanCr(Ⅲ-)2a/DMAP催化體系催化CO2與環(huán)氧丙烷(PO)共聚生成脂肪族聚碳酸酯(PPC)的反應(yīng)，成功檢測到了反應(yīng)的活性中間體并探討了可能的反應(yīng)機(jī)理. 如圖6所示.

圖6 Salan-或Salen-Cr(III)X/DMAP催化CO2/PO共聚反應(yīng)機(jī)理Fig.6 Proposed mechanism of CO2/PO copolymerization catalyzed by binary salan- or salen-Cr(III)X/DMAP systems

ZHANG Xing Hong等[49]利用電噴霧質(zhì)譜研究了納米級的DMC(Double metal cyanide complex)催化CO2和PO共聚生成PPC的催化機(jī)理，并根據(jù)電噴霧質(zhì)譜檢測到的分子量信息，推測了可能的反應(yīng)機(jī)理. 其電噴霧質(zhì)譜圖如圖7所示.

圖7 CO2-PO共聚的電噴霧質(zhì)譜圖Fig.7 ESI-MS spectra of the CO2-PO copolymer

本課題組利用電噴霧質(zhì)譜成功檢測到了RuCl3[2,2′-bipy (CH3OH)](2,2′-聯(lián)吡啶釕配合物)/CTAC(十六烷基三甲基氯化銨)催化體系催化CO2和PO反應(yīng)生成環(huán)狀碳酸酯的活性中間體，并提出了可能的反應(yīng)機(jī)理[50](如圖8所示).

圖8 [RuCl3[2,2′-bipy (CH3OH)]/CTAC催化反應(yīng)機(jī)理Fig.8 [RuCl3[2,2′-bipy (CH3OH)]/ CTAC catalytic reaction mechanism

3 儀器參數(shù)的選擇

電噴霧質(zhì)譜儀的參數(shù)設(shè)定以及樣品制備等在研究金屬配合物中至關(guān)重要，會直接影響到金屬配合物離子的組成及穩(wěn)定性[51].

電噴霧離子源部分參數(shù)的優(yōu)化，是測定金屬配合物時首先需要考慮的因素. 電噴霧離子源溫度在保證能使樣品霧化電離的條件下，溫度越低越好，以減少配合物中非共價鍵的斷裂和相互作用，但離子源溫度降低會降低電噴霧離子化過程中的脫除溶劑的效率，會導(dǎo)致離子峰數(shù)目增多、分析靈敏度下降；毛細(xì)管和反電極之間的電壓或源內(nèi)裂解電壓過高會造成配合物結(jié)構(gòu)的改變，產(chǎn)生碎片離子，給譜圖解析帶來困難.

GOODLETT等人[52]研究了電噴霧質(zhì)譜離子源內(nèi)溫度、電壓對s多肽鏈和s蛋白質(zhì)組成的非共價復(fù)合物穩(wěn)定性的影響，發(fā)現(xiàn)溫度和電壓過高都會造成復(fù)合物的分解，引起離子峰消失.

另外如果配合物樣品中含有大量不揮發(fā)性鹽會導(dǎo)致加合離子的形成，降低檢測的靈敏度, 給測定分子質(zhì)量造成困難，因此在調(diào)節(jié)溶液pH時最好采用乙酸-乙酸銨等揮發(fā)性的緩沖鹽. 溶劑應(yīng)盡量選擇極性大(易使樣品離子化)且不與被測物反應(yīng)，通常采用的極性溶劑為乙腈、甲醇、水等，因?yàn)樗鼈兙哂酗@著的質(zhì)子自遞作用，有利于離子的形成.

因此電噴霧質(zhì)譜的檢測條件如溫度、電壓、樣品溶液的pH、有機(jī)溶劑的選擇等是在研究金屬配合物時必須考慮的幾個重要因素.

4 總結(jié)與展望

綜上所述, 電噴霧質(zhì)譜方法為研究金屬配合物的結(jié)構(gòu)、反應(yīng)活性中間體及探究反應(yīng)機(jī)理打開了一扇窗，獨(dú)特的“軟電離”優(yōu)勢，成為當(dāng)今質(zhì)譜最活躍的研究領(lǐng)域，其應(yīng)用范圍比傳統(tǒng)質(zhì)譜有了很大的擴(kuò)展. 隨著具有低流速、超高靈敏度的以納升級電噴霧質(zhì)譜儀為代表的新一代質(zhì)譜儀的出現(xiàn)，可以在最少的樣品消耗量下獲得高靈敏度，其噴霧產(chǎn)生的液滴體積更小，加速了脫溶劑的進(jìn)程，降低了脫溶劑所需的溫度和熱量[54]. 此外，電噴霧電離源與飛行時間 (TOF)和傅立葉變換離子回旋共振 (FTICR) 等新一代高分辨檢測器的聯(lián)用，使電噴霧質(zhì)譜在分辨率、檢測靈敏度、準(zhǔn)確性及質(zhì)量檢測范圍等方面的性能都有了很大提升. 但隨著對樣品檢測要求的不斷提高，電噴霧質(zhì)譜也暴露出了一些需要提高和完善的地方，如：(1)目前電噴霧質(zhì)譜的離子化過程需要對溶液進(jìn)行加熱，以脫去溶劑，一些對溫度敏感的金屬配合物、超分子、蛋白質(zhì)等就不適合使用. (2)電噴霧技術(shù)可以捕捉和跟蹤活性中間體(離子型中間體和中性中間體)，但是由于一些反應(yīng)的活性中間體配位方式復(fù)雜、相互作用力弱、反應(yīng)速度較快, 不易被現(xiàn)有的電噴霧質(zhì)譜所捕獲，所有這些都有待于電噴霧質(zhì)譜技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展和完善. 相信不遠(yuǎn)的將來電噴霧質(zhì)譜在研究金屬配合物及其他方面的應(yīng)用范圍會更加廣泛.

參考文獻(xiàn)：

[1] VIEGAS C J R,SILVA D H S，PIVATTO M，et al. Lipoperoxidation and cyclooxygenase enzyme inhibitory piperidine alkaloids from Cassia spectabilis green fruits [J]. J Nat Prod, 2007, 70(12): 2026-2028.

[2] CROTTI A E M，LOPES J L C，LOPES N P. Triple quadrupole tandem mass spectrometry of sesquiterpene lactones: a study of goyazensolide and its congeners [J]. J Mass Spectrom, 2005, 40(8): 1030-1034.

[3] LOPES N P，GATES P J，WILKINS J P G，et al. Fragmentation studies on lasalocid acid by accurate mass electrospray mass spectrometry [J]. Analyst, 2002, 127(9): 1224-1227.

[4] WANG Yong，SONG Feng Rui，XU Qing Xuan，et al. Characterization of aconitine-type alkaloids in the flowers of Aconitum kusnezoffii by electrospray ionization tandem mass spectrometry [J]. J Mass Spectrom, 2003, 38(9): 962-970.

[5] FONSECA T，LOPES N P，GATES P J，et al. Fragmentation studies on tetronasin by accurate-mass electrospray tandem mass spectrometry [J]. J Am Soc Mass Spectrom, 2004, 15(3): 325-335.

[6] REALE S，TULLIO A D，SPRETI N，et al. Mass spectrometry in the biosynthetic and structural investigation of lignins [J]. Mass Spectrom Rev, 2004, 23(2): 87-126.

[7] SILVA L F J，LOPES N P. A study on the species present in solutions of hypervalent iodine (III) reagents by electrospray ionization mass spectrometry [J]. Tetrahedron Lett, 2005, 46(36): 6023-6027.

[8] SANTOS M D D，MARTINS P R，SANTOS P A D，et al. Oxidative metabolism of 5-O-caffeoylquinic acid (chlorogenic acid), a bioactive natural product, by metalloporphyrin and rat liver mitochondria [J]. Eur J Pharm Sci, 2005, 26(1): 62-70.

[9] GUARATINI T，GATES P J，CARDOZO K H，et al. Letter: radical ion and protonated molecule formation with retinal in electrospray and nanospray [J]. Eur J Mass Spectrom, 2006, 12(1): 71.

[10] MCEWEN C N，SIMONSICK W J J，LARSEN B S，et al. The fundamentals of applying electrospray ionization mass spectrometry to low mass poly (methyl methacrylate) polymers [J]. J Am Soc Mass Spectrom, 1995, 6(10): 906-911.

[11] DONGRE A R，SOMOGYI A，WYSOCKI V H. Surface-induced dissociation: an effective tool to probe structure, energetics and fragmentation mechanisms of protonated peptides [J]. J Mass Spectrom, 1996, 31(4): 339-350.

[12] HARRISON A G，YOUNG A B，BLEIHOLDER C，et al. Scrambling of sequence information in collision-induced dissociation of peptides [J]. J Am Chem Soc, 2006, 128(32): 10364-10365.

[13] JURCHEN J C，WILLIAMS E R. Origin of asymmetric charge partitioning in the dissociation of gas-phase protein homodimers [J]. J Am Chem Soc, 2003, 125(9): 2817-2826.

[14] YU Ying Qing，STUMPF C L，HILKKA I KENTTMAA. Gas-phase fragmentation of di- and tripeptides via ion-molecule reactions with ClPCl+[J]. Int J Mass spectrom, 2000, 195: 609-623.

[15] FENAILLE F，GUY P A，TABET J C. Study of protein modification by 4-hydroxy-2-nonenal and other short chain aldehydes analyzed by electrospray ionization tandem mass spectrometry [J]. J Am Soc Mass Spectrom, 2003, 14(3): 215-226.

[16] HUDGINS R R，WOENCKHAUS J，JARROLD M F. High resolution ion mobility measurements for gas phase proteins: correlation between solution phase and gas phase conformations [J]. Int J Mass Spectrom Ion Processes, 1997, 165: 497-507.

[17] PAIZS B，SUHAI S. Fragmentation pathways of protonated peptides [J]. Mass Spectrom Rev, 2005, 24(4): 508-548.

[18] BECK J L，COLGRAVE M L，RALPH S F，et al. Electrospray ionization mass spectrometry of oligonucleotide complexes with drugs, metals, and proteins [J]. Mass Spectrom Rev, 2001, 20(2): 61-87.

[19] RAY S S，BALARAM P. 1-Anilino-8-naphthalene-sulfonate (ANS) binding to proteins investigated by electrospray ionization mass spectrometry: correlation of gas-phase dye binding to population of molten globule states in solution [J]. Phys Chem B, 1999, 103(34): 7068-7072.

[20] GUO Qi Xiang，WU Zhi Jun，LUO Zhi Bin，et al. Highly enantioselective oxidative couplings of 2-naphthols catalyzed by chiral bimetallic oxovanadium complexes with either oxygen or air as oxidant [J]. J Am Chem Soc, 2007, 129(45): 13927-13938.

[21] SOMEI H，ASANO Y，YOSHIDA T，et al. Dual activation in a homolytic coupling reaction promoted by an enantioselective dinuclear vanadium (IV) catalyst [J]. Tetrahedron Lett, 2004, 45(9): 1841-1844.

[22] MCLAFFERTY F W. Tandem mass spectrometry [J]. Science, 1981, 214(4518): 280-287.

[23] FENG R, CASTELHANO A L,BILLEDEAU R，et al. Study of noncovalent enzyme-inhibitor complexes and metal binding stoichiometry of matrilysin by electrospray ionization mass spectrometry [J]. J Am Soc Mass Spectrom, 1995, 6(11): 1105-1111.

[24] 齊紅衛(wèi)，王志強(qiáng)，曹婷婷，等. 反式-二氯四吡啶合釕催化CO2制備碳酸丙烯酯機(jī)理探討[J]. 河南大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版, 2012, 42(01): 42-46.

[25] 孫世國，彭孝軍，張 蓉，等. 錸聯(lián)吡啶配合物的電噴霧質(zhì)譜研究[J]. 有機(jī)化學(xué), 2003, (10): 1135-1138.

[26] WU Zhi Jun，XU Xiao Ying，LUO Shi Wei，et al. Electrospray mass spectrometry and tandem mass spectrometry of bimetallic oxovanadium complexes [J]. J Am Soc Mass Spectrom, 2008, 19(9): 1247-1254.

[27] GANEM B，LI Y T，HENION J D. Detection of noncovalent receptor-ligand complexes by mass spectrometry [J]. J Am Chem Soc, 1991, 113(16): 6294-6296.

[28] KEMPEN E C，BRODBELT J S. A method for the determination of binding constants by electrospray ionization mass spectrometry [J]. Anal Chem, 2000, 72(21): 5411-5416.

[29] BLAIR S M，BRODBELT J S，ALAN P MARCHAND，et al. Evaluation of binding selectivities of caged crown ligands toward heavy metals by electrospray ionization/quadrupole ion trap mass spectrometry [J]. Anal Chem, 2000, 72(11): 2433-2445.

[30] KEMPEN E C，BRODBELT J S，BARTSCH R A，et al. Investigation of alkali metal cation selectivities of lariat ethers by electrospray ionization mass spectrometry [J]. Anal Chem, 1999, 71(24): 5493-5500.

[31] CHENG Xue Heng，CHEN Rui Dan，BRUCE J E，et al. Using electrospray ionization FTICR mass spectrometry to study competitive binding of inhibitors to carbonic anhydrase [J]. J Am Chem Soc, 1995, 117(34): 8859-8860.

[32] TRIOLO A，ARCAMONE F M，RAFFAELLI A，et al. Non-covalent complexes between DNA-binding drugs and double-stranded deoxyoligonucleotides: a study by ion spray mass spectrometry [J]. J Mass Spectrom, 1997, 32(11): 1186-1194.

[33] GABELICA V，PAUW E D，ROSU F. Interaction between antitumor drugs and a double-stranded oligonucleotide studied by electrospray ionization mass spectrometry [J]. J Mass Spectrom, 1999, 34(12): 1328-1337.

[34] SANNES-LOWERY K A，MEI H Y，LOO J A. Studying aminoglycoside antibiotic binding to HIV-1 TAR RNA by electrospray ionization mass spectrometry [J]. Int J Mass Spectrom Ion Phys, 1999, 193(2): 115-122.

[35] RAMANATHAN R，PROKAI L. Electrospray ionization mass spectrometric study of encapsulation of amino acids by cyclodextrins [J]. J Am Soc Mass Spectrom, 1995, 6(9): 866-871.

[36] LOO J A，PEIFENG H ，MCCONNELL P，et al. A study of Src SH2 domain protein-phosphopeptide binding interactions by electrospray ionization mass spectrometry [J]. J Am Soc Mass Spectrom, 1997, 8(3): 234-243.

[37] GREIG M J，GAUS H，CUMMINS L L，et al. Measurement of macromolecular binding using electrospray mass spectrometry. Determination of dissociation constants for oligonucleotide: serum albumin complexes [J]. J Am Chem Soc, 1995, 117(43): 10765-10766.

[38] GRIFFEY R H，HOFSTADLER S A，SANNES-LOWERY K A，et al. Determinants of aminoglycoside-binding specificity for rRNA by using mass spectrometry [J]. Proc Natl Acad Sci, 1999, 96(18): 10129-10133.

[39] 張海震，顏肖慈. 電噴霧離子化質(zhì)譜測定冠醚與堿金屬離子的結(jié)合常數(shù)[J]. 武漢大學(xué)學(xué)報(bào):理學(xué)版, 2005 (02): 154-156.

[40] YOUNG D S，HUNG H Y，LIU L K. An easy and rapid method for determination of stability constants by electrospray ionization mass spectrometry [J]. Rapid Commun Mass Spectrom, 1997, 11(7): 769-773.

[41] ROBB D B，COVEY T R，BRUINS A P. Atmospheric pressure photoionization: an ionization method for liquid chromatography-mass spectrometry [J]. Anal Chem, 2000, 72(15): 3653-3659.

[42] BERKEL G J V，MCLUCKEY S A，GLISH G L. Electrochemical origin of radical cations observed in electrospray ionization mass spectra [J]. Anal Chem, 1992, 64(14): 1586-1593.

[43] ALIPRANTIS A O，CANARY J W. Observation of catalytic intermediates in the Suzuki reaction by electrospray mass spectrometry [J]. J Am Chem Soc, 1994, 116(15): 6985-6986.

[44] GRIEP-RAMING J，MEYER S，BRUHN T，et al. Investigation of reactive intermediates of chemical reactions in solution by electrospray ionization mass spectrometry: radical chain reactions [J]. Angew Chem Int Ed, 2002, 41(15): 2738-2742.

[45] SANTOS L S，PAVAM C H，ALMEIDA W P，et al. Probing the mechanism of the Baylis-Hillman reaction by electrospray ionization mass and tandem mass spectrometry [J]. Angew Chem Int Ed, 2004, 43(33): 4330-4333.

[46] SABINO A A，MACHADO A H L，ROQUE C D，et al. Probing the mechanism of the Heck reaction with arene diazonium salts by electrospray mass and tandem mass spectrometry [J]. Angew Chem Int Ed, 2004, 43(19): 2514-2518.

[47] GUO Hao，QIAN Rong，LIAO Yuan Xi，et al. ESI-MS studies on the mechanism of Pd (0)-catalyzed three-component tandem double addition-cyclization reaction [J]. J Am Chem Soc, 2005, 127(37): 13060-13064.

[48] RAO Dun Yan，LI Bo，ZHANG Rong，et al. Binding of 4-(N, N-dimethylamino) pyridine to Salen-and Salan-Cr (III) cations: a mechanistic understanding on the difference in their catalytic activity for CO2/epoxide copolymerization [J]. Inorg Chem, 2009, 48(7): 2830-2836.

[49] ZHANG Xing Hong，WEI Ren Jian，SUN Xue Ke，et al. Selective copolymerization of carbon dioxide with propylene oxide catalyzed by a nanolamellar double metal cyanide complex catalyst at low polymerization temperatures [J]. Polymer, 2011, 52(24): 5494-5502.

[50] 卜站偉，王志強(qiáng)，秦 剛，等. 2,2′-聯(lián)吡啶釕配合物催化CO2制備環(huán)狀碳酸酯機(jī)理研究[J]. 化學(xué)學(xué)報(bào), 2010(18): 1871-1875.

[51] PRAMANIK B N，BARTNER P L，MIRZA U A，et al. Electrospray ionization mass spectrometry for the study of non-covalent complexes: an emerging technology [J]. J Mass Spectrom, 1998, 33(10): 911-920.

[52] GOODLETT D R，LOO R R O，LOO J A，et al. A study of the thermal denaturation of ribonuclease S by electrospray ionization mass spectrometry [J]. J Am Soc Mass Spectrom, 1994, 5(7): 614-622.

[54] WILM M，MANN M. Analytical properties of the nanoelectrospray ion source [J]. Anal Chem, 1996, 68(1): 1-8.