電化學生物傳感器在環(huán)境監(jiān)測中的應用及發(fā)展前景

婁童芳，邢歡歡，屈建瑩

(河南大學 化學化工學院 環(huán)境與分析科學研究所，河南 開封 475004)

隨著工、農(nóng)業(yè)的快速發(fā)展，產(chǎn)生了大量的有機和無機污染物，這些物質的無序排放造成的環(huán)境污染和生態(tài)資源破壞將制約著國家和地區(qū)的發(fā)展，影響普通大眾的生活環(huán)境．因此，環(huán)境保護已經(jīng)成為當今世界的熱點問題之一. 對環(huán)境污染物進行實時、在線、原位監(jiān)測，并且提高分析測試方法的靈敏度、穩(wěn)定性和便攜性, 已經(jīng)成為當今環(huán)境監(jiān)測所追求的目標．國家標準中污染物分析檢測方法常用的有：理化分析法、分光光度法、氣相色譜法、氣-質聯(lián)用法和液相色譜法等，但是這些方法操作復雜、試劑消耗量大，因而不能適應環(huán)境現(xiàn)場監(jiān)測和在線監(jiān)測．

電化學生物傳感器是一門綜合了多門學科的高新技術，由于生物分子的特異性，對各類環(huán)境污染物的檢測分析具有靈敏度高、選擇性好、穩(wěn)定性好、重現(xiàn)性好和成本低等優(yōu)點，被廣泛應用于環(huán)境監(jiān)測領域，并引起人們越來越多的關注．

1 電化學生物傳感器及其工作原理

電化學生物傳感器是基于被測物的電化學性質，并將被測物的化學量轉換成電學參量進行檢測的一種傳感器，主要由兩部分組成：一部分是生物分子識別元件，是由對被測物具有高選擇性分子識別功能的生物敏感功能膜組成，可用來制作生物感應元件的物質有酶、細胞、組織、核酸、抗原抗體等，其主要作用是用來感知樣品中是否含有待測物質；另一部分是信號轉換元件，按照信號轉換元件所轉換的電學參量的不同，主要包括電位型傳感器、電流型傳感器和電導型傳感器等．原則上講，任何一種接收器都可與適應的傳導器結合起來制造出具有操作性能的傳感器[1]．

電化學生物傳感器的設計原理是待測物與生物分子識別原件特異性結合后，產(chǎn)生被測物的非電信號通過信號轉換器轉換成可測量的電信息，再經(jīng)過信號放大處理，最后輸出信號，從而達到分析檢測的目的[2]．

2 電化學生物傳感器在環(huán)境監(jiān)測中的應用

2.1 水環(huán)境污染物的監(jiān)測

在環(huán)境監(jiān)測中，生物傳感器應用最多的是水質分析，例如在待測水源處放置一個經(jīng)特殊制作的電化學生物傳感器及其附件達到現(xiàn)場監(jiān)測的目的. 利用傳感器的方法不需要試劑并省去了送樣的費用，因此操作方便、成本低．

2.1.1 用于監(jiān)測BOD的電化學生物傳感器[3]

生化需氧量(BOD)是衡量水體有機污染程度的重要指標，在水污染控制中具有重要作用．即當水中所含有機物與空氣接觸時，由于需氧微生物的作用而分解使之無機化或氣體化時所需消耗的氧氣量(單位mg·L-1)．常規(guī)的BOD測定是用稀釋與接種法來測定，需要5 d的培養(yǎng)期，操作復雜、重復性差、耗時耗力、干擾性大、不能滿足對污染水體在線監(jiān)測的要求[4]，所以迫切需要開發(fā)一些操作簡單、快速準確、自動化程度高、抗干擾能力強的新方法．

BOD電化學傳感器最主要的就是BOD微生物電極，將微生物的單一菌種或混合種群制作成敏感膜固定于電極上．常用于制作BOD電化學生物傳感器的微生物有酵母、假單胞菌、芽孢桿菌、發(fā)光菌和嗜熱菌等．由于水體中BOD物質的加入或降解代謝的發(fā)生，使水中的微生物內(nèi)外源呼吸方式發(fā)生轉化或變化，導致電信號強弱的改變．通常，在適宜的BOD濃度范圍內(nèi)，傳感器輸出的電流值與樣品中BOD的濃度呈線性關系．BOD傳感器不僅能滿足實際監(jiān)測的要求，并且有靈敏快速的特點．

目前，國外兩種新的酵母菌種SPT1和SPT2已被分離出來，并被固定在玻碳電極上，在葡萄糖和谷氨酸的培養(yǎng)基上，以鐵氰化物為電子傳導中介，構成用于測量BOD的微生物傳感器，其重現(xiàn)性為±10%．如將該傳感器用于測量紙漿廠污水中BOD濃度，在5 min內(nèi)其最小值可達到2 mg·L-1 [5]．

胡磊等[6]使用接枝二茂鐵為介體的微生物電化學傳感器測量污水中的BOD含量．以二茂鐵(Fc)為介體，通過縮合反應將其接枝到大分子介孔材料SBA-15表面形成Fc-SBA-15，然后將活性污泥提取微生物與Fc-SBA-15介體懸濁液和聚乙烯醇(PVA)溶膠進行混合包埋．以此制備成的微生物敏感膜，保持了Fc介體傳遞電子速度快和電化學反應低電勢的優(yōu)點．將該微生物敏感膜與玻碳電極耦合，構成三電極系統(tǒng)，實現(xiàn)了對污水水樣中的BOD含量快速測量．結果表明，傳感器的線性范圍在2～300 mg·L-1，精密度和抗干擾能力強，并能用于實際水樣的監(jiān)測．

2.1.2 用于酚類物質的監(jiān)測

酚類化合物是一類應用廣泛的化工原料，主要出現(xiàn)在造紙、合成氨、煉油、煉焦、煤氣洗滌、木材防腐和化工等廢水中，各國普遍采用4-氨基安替比林光度法分析這一類高毒物質，但油類、硫化物、芳香胺類等會干擾測定[7]．用電化學生物傳感器測定酚類化合物則具有靈敏、準確且選擇性高的優(yōu)點，常用的有酶電極、微生物電極和植物組織電極．

酚類化合物能夠被酪氨酸酶催化氧化[8]，并產(chǎn)生相應的電化學信號．ZnO溶膠凝膠和酪氨酸酶等電點存在差異，前者具有較高等電點(約為9.5)[9]，容易通過靜電吸附作用吸附低等電點的酪氨酸酶(等電點大約為4.5)[10]．劉志敏[11]等以此構建了酪氨酸酶電化學生物傳感器，其對苯酚的檢出限達到8.0×10-8mol·L-1，達到95%穩(wěn)態(tài)電流所需時間小于10 s，并且表現(xiàn)出良好的重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和準確性，能抵抗天冬氨酸、谷氨酸、乙酰氨基苯酚等物質的干擾．此外，劉志敏[12]課題組針對酪氨酸酶構建了一種簡單有效的酚類化合物傳感器，該傳感器對鄰苯二酚、苯酚和對甲基苯酚的檢出限依次為3.2×10-7、6.0×10-7和1.8×10-7mol·L-1．

由于酚類反應需要大量的氧，因此也可以將酪氨酸酶或富含酪氨酸酶的新鮮植物組織切片與溶氧電極結合制成測定酚的電化學生物傳感器．穆東燕等[13]利用麥芽糊精修飾的碳糊電極構建了電流型酪氨酸酶生物傳感器，該傳感器對苯酚濃度在2.0×10-7～1.0×10-5mol·L-1的范圍內(nèi)呈線性關系，響應時間為2 min．此傳感器對其他酚類物質如: 鄰苯二酚, 鄰甲酚, 對氯苯酚等都有良好的響應，可以實現(xiàn)對工業(yè)廢水中酚類物質的濃度監(jiān)測．

漆酶(Lac)是一種含有4個銅離子的多酚氧化酶，可以存活于空氣中，發(fā)生反應后的唯一產(chǎn)物是水，因而是一種環(huán)保酵素[14]，也常被固定于電極上實現(xiàn)酚類物質的檢測[15-17]．當還原態(tài)的漆酶與氧氣接觸時，被氧化為氧化態(tài)漆酶，氧化態(tài)漆酶進一步將鄰苯二酚氧化成醌，最后醌在電極表面發(fā)生還原反應，據(jù)此可以根據(jù)峰電流的變化計算鄰苯二酚的濃度，其作用機理如圖1所示.

圖1 漆酶生物傳感器催化機理Fig.1 Catalytic mechanism of laccase biosensor

RAWAL等[18]利用MnO2NPs/cMWCNTs/PANI修飾Au電極，將漆酶共價固定到修飾電極上，制備了漆酶生物傳感器．該傳感器的最適宜使用條件是pH=5.5,0.1 mol·L-1的醋酸鈉緩沖溶液中和35 ℃條件下，對酚的檢出限能夠達到4×10-8mol·L-1，響應時間為4 s，并能檢測茶葉中總酚的含量，在5個月內(nèi)可以進行150次測定．RAHMA等[19]利用高分子聚合物和納米金固定漆酶，構建的漆酶電化學生物傳感器用于對鄰苯二酚的測定，線性范圍為1×10-7～1 ×10-5mol·L-1．

2.1.3 用于陰離子表面活性劑的監(jiān)測

陰離子表面活性劑廣泛應用在日常生活和工業(yè)生產(chǎn)中，大量的陰離子表面活性劑進入水體中可引起水質的惡化，如直鏈烷基苯磺酸鈉(LAS)可造成嚴重的水污染，消耗溶解氧，并在水面產(chǎn)生不易消失的泡沫．NOMURA[20]等人研制出一種由LAS降解細菌和氧電極組成的，用來探測陰離子表面活性劑濃度的電化學生物傳感器．當陰離子表面活性劑存在時，LAS降解細菌的呼吸作用增加，導致溶解氧變化，根據(jù)氧電極電流的變化判斷LAS的濃度．

2.1.4 用于硝酸鹽的監(jiān)測

2.1.5 用于硫化物的監(jiān)測

硫化物的毒性較大，易產(chǎn)生硫化氫，造成嚴重的環(huán)境污染．焦化、選礦、造紙、印染和制革等工業(yè)廢水通常含有硫化物，包括溶解性的H2S、HS-和S2-，酸溶性的金屬硫化物等．因此，硫化物是水體污染的重要指標．

應用硫化桿菌微生物膜檢測S2-的作用機理為：微生物電極在溫度、體積及溶解氧濃度等恒定的緩沖溶液中，當膜內(nèi)硫化桿菌的內(nèi)源呼吸活性一定時，溶液中氧分子通過微生物膜擴散到氧電極的速率就一定．當向待測液中加入含有S2-的溶液，通過擴散進入微生物膜的S2-被膜內(nèi)硫化桿菌同化而耗氧，使氧分子擴散進入氧電極的速率降低，導致電極輸出電流下降．基于此，王曉輝[24]等從酸性土壤和煤粉中分離出選擇性較好的氧化硫桿菌菌株固定化成微生物膜，并于氧電極偶聯(lián)制成硫化物微生物電極．實驗證明，在0.03～0.6 mg·L-1和0.42～3.0 mg·L-1范圍內(nèi)，電極響應值與S2-濃度呈現(xiàn)較好的線性關系．該微生物電極具有良好的精密度、穩(wěn)定性和抗干擾能力，并能應用于實際分析．

2.2 大氣環(huán)境污染物的監(jiān)測

2.2.1 用于二氧化硫的監(jiān)測

圖2 生物傳感器各步反應示意圖Fig.2 Scheme showing the various reactions of the proposed biosensor

此外，一種將噬硫桿菌固定在兩片硝化纖維薄膜之間，并與氧電極耦合而制作的生物傳感器, 能促使微生物新陳代謝加快，溶解氧濃度下降，氧電極響應改變，從而測出亞硫酸物種的含量[26]．

2.2.2 用于氨的監(jiān)測

氨氣作為一種重要的化工產(chǎn)品與原料，在制藥、化肥、醫(yī)療、建筑和裝修材料加工等行業(yè)有著廣泛的應用，因此，對氨的監(jiān)測是環(huán)境保護的一項重要指標．現(xiàn)有測定方法所使用的商品氨電極易受揮發(fā)性胺或離子的影響，于是有人提出用電化學微生物傳感器方法測定氨．

其工作菌株包括硝化單胞菌和硝化桿菌，首先將微生物吸附在多孔醋酸纖維素膜上，然后在貼有微生物膜的氧電極的末端覆蓋上一層透氣膜，制成測定NH3的微生物傳感器．該傳感器測量的線性范圍為0.1～42 mg·L-1, 相對誤差為±4%，整個測量過程只需幾分鐘[27]．該微生物傳感器對氨的測定展現(xiàn)出測量范圍廣、靈敏度高和響應快的優(yōu)點．

2.3 農(nóng)藥殘留的監(jiān)測

農(nóng)藥的長期使用所帶來的農(nóng)藥殘留問題已經(jīng)成為影響環(huán)境安全與人類健康的重大隱患[28-29]，對其毒性和殘留時間的研究已經(jīng)引起了人們廣泛關注．盡管傳統(tǒng)高效液相色譜、氣相色譜和質譜[30-32]在農(nóng)藥含量的檢測中給出了令人滿意的分析結果，但是新的檢測傳感器具有更迅速、更便宜，且可以進行現(xiàn)場分析的優(yōu)點．

對于農(nóng)藥殘留監(jiān)測，乙酰膽堿酯酶類傳感器是目前研究較多的一類．有機磷農(nóng)藥由于其較高的殺蟲活性而被廣泛應用．它可以和乙酰膽堿酯酶(AChE)活性中心絲氨酸上的羥基結合，抑制AChE的活性，導致AChE失去對乙酰膽堿的水解能力．而乙酰膽堿可以在AChE的催化作用下水解為乙酸和膽堿，膽堿是一類電活性物質可產(chǎn)生特征的循環(huán)伏安峰，可以根據(jù)膽堿峰電流的變化來監(jiān)測AChE的抑制程度．例如，孫燕春等[33]用AuNPs/殼聚糖-SiO2雜化的溶膠凝膠將AChE修飾到玻碳電極上．以氯化硫代乙酰膽堿(ATCl)為底物，ATCl在AChE的作用下生成硫代膽堿，硫代膽堿具有電化學活性，能產(chǎn)生1個不可逆的氧化峰．該傳感器對硫代膽堿氧化峰的變化值與久效磷濃度的線性范圍在0.5～12.0 mg·L-1，檢出限為0.02 mg·L-1，表現(xiàn)出良好的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性．

張梅[34]等利用AChE/Nafion/普魯士藍修飾的玻碳電極實現(xiàn)了對有機農(nóng)藥西維因和敵百蟲的檢測，西維因和敵百蟲的檢出限分別為5.0和10.0 nmol·L-1．對于模擬的實際樣品的測定具有較好的重現(xiàn)性、靈敏度和抗干擾能力．劉潤等[35]利用戊二醛將AChE和牛血清白蛋白固定到羧基化的納米管修飾電極表面，構建了一種用于檢測有機磷農(nóng)藥的安培型生物傳感器，該傳感器具有良好的重現(xiàn)性，對辛硫磷及氧化樂果的檢出限分別達到3.6×10-4和5.9×10-4g·L-1．孫霞等[36]將功能化多壁碳納米管(FCNTs)與殼聚糖(CHIT)和戊二醛(GTA)導電聚合物結合形成凝膠溶膠，在玻碳電極(GCE)表面滴涂凝膠溶膠制得FCNTs-CHIT-GTA/GCE電極．該修飾電極與乙酰膽堿酶膜結合，構建一種反應靈敏、快速、穩(wěn)定、用于檢測有機磷農(nóng)藥的電流型生物傳感器．其最低檢出限為20 ng·L-1，適合檢測多種有機磷農(nóng)藥．

此外，相對于酶的禁阻效應的電化學生物傳感器，有機磷水解酶(OPH)也是一種被廣泛應用于有機磷農(nóng)藥檢測的酶．由于OPH能夠水解有機磷農(nóng)藥并且釋放出H+，而生成的H+與有機磷農(nóng)藥的濃度成比例關系．因此，將OPH與pH電極結合構成電位型OPH傳感器．該種傳感器能夠通過檢測反應溶液中H+濃度的變化, 進而確定待測液中有機磷農(nóng)藥的含量[37]．ASHOK等[38]開發(fā)了安培型OPH生物傳感器用于檢測有機磷農(nóng)藥,其檢出限遠低于電位型傳感器．由于OPH水解對氧磷、對硫磷等農(nóng)藥生成具有電活性的對硝基酚(PNP)，因此，通過測定PNP的氧化電流以達到檢測有機磷農(nóng)藥含量的目的[39]．ASHOK等[38]用印刷技術制成條形碳糊電極，將含OPH的Nafion溶液滴于其上, 制成的OPH傳感器充分發(fā)揮了高的生物催化活力, 對氧磷、甲基對硫磷這兩種農(nóng)藥的最低檢測限分別低達9×10-8和7×10-8mol·L-1．

3 電化學生物傳感器的發(fā)展趨勢與展望

電化學生物傳感器已經(jīng)發(fā)展了近40年，但是由于生物活性單元的不穩(wěn)定性和易變性等缺點，致使電化學生物傳感器的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性還較差．然而，電化學生物傳感器作為多學科交叉的高科技領域，將會在生物學、信息學、材料學和微電子學的共同發(fā)展下，朝著多功能化、微型化、智能化，以及高靈敏度、高穩(wěn)定性及高壽命的方向發(fā)展，并期望達到與其他技術聯(lián)用的目的．相信在不久的將來，新一代低成本、高靈敏度及高穩(wěn)定性的電化學生物傳感器將在環(huán)境監(jiān)測領域發(fā)揮更大的作用．

參考文獻：

[1] 李彥文. 生物傳感器及其在環(huán)境監(jiān)測方面的應用[J]. 環(huán)境保護科學, 2004, 30(1):35-38.

[2] 佟 巍, 張紀梅, 張 麗. 電化學生物傳感器的應用研究進展[J]. 武警醫(yī)學院學報, 2008, 17(1):62-64.

[3] 董文賓, 胡獻麗, 鄭 丹, 等．生物傳感器在水質分析監(jiān)測中的應用[J]. 工業(yè)水處理，2005，25(3):35-38.

[4] KOBAYASHI H A, STENSTROM M K, MAH R A. Treatment of low strength domestic wastewater using the anaerobic filter [J]. Water Res, 1983, 17(8):903-909.

[5] TROSOK S P, DRISCOLL B T, LUONG H T. Mediated microbial biosensor using a novel yeast strain for wastewater BOD measurement [J]. Appl Microbiol Biotechnol, 2001, 56 (3/4):550-554.

[6] 胡 磊, 李 軼. 接枝二茂鐵介體微生物傳感器對污水BOD的快速測定[J]. 凈化技術, 2012, 31(3):49-53.

[7] 李 真, 戴媛靜, 陳 曦. 生物傳感器及其在環(huán)境分析中的應用[J]. 福建分析測試, 2001, 10(3):1483-1492.

[8] 李 章, 秦立平, 李瑞顯. 生物傳感器在環(huán)境監(jiān)測中的應用進展[J]. 山西建筑, 2010, 36(18):169-171.

[9] TOPOGLIDIS E，CASS A E G，O’REGAN B，et al. Immobilisation and bioelectrochemistry of proteins on nanoporous TiO2and ZnO films [J]. J Electroanal Chem, 2001, 517(1/2):20-27.

[10] GERRITSEN Y A M, CHAPELON C G J, WICHERS H J. The low-isoelectric point tyrosinase of agaricus bisporus may be a glycoprotein [J]. Phytochem, 1994, 35(3):573-577.

[11] 劉志敏, 胡樂乾, 沈國勵, 等. 基于ZnO溶膠-凝膠固定的酪氨酸酶傳感器的研制[J]. 分析科學學報, 2007, 23(5):555-558.

[12] 劉志敏, 李志成, 沈國勵, 等. 基于胱胺/殼聚糖/酶標納米金自組裝的的酪氨酶傳感器的研制[J]. 化學研究與應用, 2007, 19(7):756-759.

[13] 穆東燕, 崔莉鳳. 用酪氨酸酶生物傳感器測水中酚類物質的研究[J]. 北京工商大學學報：自然科學版, 2002, 20(1):12-16.

[14] 李玉英, 楊震宇. 漆酶的特性和應用研究進展[J]. 江西科學，2009, 27(5):680-684．

[15] XU Xin Hua, LU Ping, ZHOU Yu Mei, et al. Laccase immobilized on methylene blue modified mesoporous silica MCM-41/PVA [J]. Mater Sci Eng C，2009, 29:2160-2164.

[16] PANG Ya, ZENG Guang Ming, TANG Lin, et al. Laccase biosensor using magnetic multiwalled carbon nanotubes and chitosan/silica hybrid membrane modified magnetic carbon paste electrode [J]. J Cent South Univ Technol, 2011, 18:1849-1856.

[17] 章 毅, 曾光明, 湯 琳, 等. 基于磁性納米粒子固定技術的漆酶傳感器用于垃圾堆肥中鄰苯二酚的檢測[J]. 環(huán)境科學, 2007, 28(10):2320-2325.

[18] RAWAL R, CHAWLA S, MALIK P, et al. An amperometric biosensor based on laccase immobilized onto MnO2NPs/cMWCNT/PANI modified Au electrode [J]. Int J Biol Macromol, 2012, 51:175-181.

[19] RAHMAN M A, NOH H B, SHIM Y B. Direct electrochemistry of laccase immobilized on Au nanoparticles encapsulated-dendrimer bonded conducting polymer: application for a catechin sensor [J]. Anal Chem, 2008, 80:8020-8027.

[20] NOMURA Y, IKEBUKURO K, YOKOYAMA K, et al. A novel microbial sensor for anionic surfactant determination [J]. Anal Lett, 1994, 27(15):3095.

[21] COSNIER S, INNOCENT C, JOUANNEAU Y, et al. Amperometric detection of nitrateviaa nitrate reductas immobilized and electrically wired at the electrode surface [J]. Anal Chem, 1994, 66(19):3198-3201.

[22] DAMGAARD L R, LARSEN L H, REVSBECH N P. Microscale biosensors for environmental monitoring[J]. TrAC, 1995, 14(7):300-303.

[23] KJAER T, LARSEN L H, REVSBECH N P. Sensitibity control of ion-selective biosensor by electrophoretically mediated analyte transport [J]. Anal Chim Acta, 1999, 391(1):57-63.

[24] 王曉輝, 孫裕生, 王艷茹, 等. 一種測定硫化物的微生物電極[J]. 分析儀器, 2001, (1):7-10.

[25] HART J P, ABASS A K, COWELL D. Development of disposable amperometric sulfur dioxide biosensors based on screen printed electrodes [J]. Biosens Bioelectr, 2002, 17:389-394.

[26] 李彥文, 楊仁斌, 郭正元. 生物傳感器在環(huán)境污染物檢測中的應用[J]. 環(huán)境科學動態(tài), 2004(1):27-29.

[27] KERMAN K, KOBAYASHI M, TAMIYA E. Recent trends in electrochemical DNA biosensor technology [J]. Meas Sci Technol, 2004, 15:R1-R11.

[28] GAN Ning, YANG Xin, XIE Dong Hua, et al. A disposable organophosphorus pesticides enzyme biosensor based on magnetic composite nano-particles modified screen printed carbon electrode [J]. Sensors, 2010, 10:625-638.

[29] SUN Xiang Ying, XIA Kai Hao, LIU Bin. Design of fluorescent self-assembled multilayers and interfacial sensing for organophosphorus pesticides [J]. Talanta, 2008, 76(4):747-751.

[30] BIAN Ying Hui, LI Chun Ya, LI Hai Bing. Para-sulfonatocalix[6]arene-modified silver nanoparticles electrodeposited or glassy carbon electrode: preparation and electrochemical sensing of methyl parathion [J]. Talanta, 2010, 81(3):1028-1033.

[31] LIU Guo Dong, WANG Jun, BARRY R, et al. Nanoparticle-based electrochemical immunosensor for the detection of phosphorylated acetylcholinesterase: an exposure biomarker of organophosphate pesticides and nerve agents [J]. Chem Eur J, 2008, 14:9951-9959.

[32] 于春偉, 李順華, 許金鉤. 一種有機磷農(nóng)藥的新型光學分子探針[J]. 高等學校化學學報, 2006, 27(9):1650-1652.

[33] 孫春燕, 李宏坤, 平 紅, 等. AuNPs/Sol-gel復合膜法固定乙酰膽堿酯酶生物傳感器檢測有機磷農(nóng)藥[J]. 高等學?；瘜W學報, 2011, 32(11):2533-2538.

[34] 張 梅, 汪 莉, 袁慧珍, 等. 乙酰膽堿酯酶/Nafion/普魯士藍修飾玻碳電極的制備及其在有機農(nóng)藥檢測中的應用[J]. 應用化學, 2011, 28(12):1429-1435.

[35] 劉 潤, 郝玉翠, 康天放. 基于碳納米管修飾電極檢測有機磷農(nóng)藥的生物傳感器[J]. 分析試驗室, 2007, 26(9):9-12.

[36] 孫 霞, 趙文蘋, 劉中合, 等. 基于功能化多壁碳納米管的乙酰膽堿酯酶生物傳感器制備[J]. 食品科學, 2012, 33(4):282-286.

[37] 陳 帆, 陳歡林, 何 奕. 有機磷水解酶傳感器及其應用研究進展[J]. 傳感器技術, 2004, 23(4):5-9.

[38] ASHOK M, PRITI M, WILFRED C. Amperometric thick-film strip electrodes for monitoring organophosphate nerve agents based on immobilized organophosphorus hydrolase [J]. Anal Chem, 1999, 71:2246-2249.

[39] 許翠玲, 王改萍, 胡勝水. 有機磷農(nóng)藥生物電化學傳感器的研究進展[J]. 分析科學學報, 2002, 18(6):502-507.