表面活性劑對丹參酮固體分散體的體外溶出的影響

★ 周燾 桂菲菲 潘俊杰(.廣州醫(yī)藥研究總院 廣州5040;.南昌大學(xué) 南昌00;.江西中醫(yī)學(xué)院 南昌0004)

丹參脂溶性成分系從唇形科鼠尾草屬植物丹參(Salvia miltiorrhiza Bunge)的根中提取純化得到的二萜醌類化合物，多為共軛醌、酮類化合物，是多種紅色物質(zhì)的混合物。藥代動力學(xué)研究表明丹參酮類口服吸收差，生物利用度低，其吸收機制是載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運兼有被動擴散，跨膜轉(zhuǎn)運通透性良好，溶出是吸收的限速步驟。表面活性劑不但可以增加藥物的溶出，而且也可以促進一些藥物的吸收。近年來，固體分散體的研究出現(xiàn)了單一載體或混合載體加表面活性劑的趨勢，同時表面活性劑可以促進藥物在胃腸道的吸收。相同藥物以不同載體或載體比例不同時可以得到不同的粒徑和晶型，從而會有不同的溶出速率［1］。因此本文針對表面活性劑對丹參酮固體分散體的體外溶出的影響進行研究。

1 實驗材料與儀器

1.1儀器

恒溫磁力攪拌器(78HW－1，億通電子有限公司);超聲機(KQ－250VDB型雙頻數(shù)顯，昆山超聲儀器公司);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(OSB－2000，EYELA);數(shù)顯恒溫水浴鍋(HH－2，國華電器有限公司);HL－2S恒流泵(上海青浦滬西儀器廠);UV－2102PC紫外可見分光光度計(美國UNICOUV);Angilent1200高效液相色譜儀。

1.2 材料

丹參酮IIA提取物(陜西昂盛生物醫(yī)藥科技有限公司，批號:20070618);聚乙烯吡咯烷酮 K30(PVP－K30)(上海宏遠化工有限公司，批號:G43377PTO);聚山梨酯80(Tween－80，溫州清明化工有限公司);戊巴比妥鈉(中國醫(yī)藥集團的上?；瘜W(xué)試劑公司);流動相為色譜甲醇(漢邦);其他的試劑均為分析純。丹參酮IIA對照品(由中國生物制品檢定所提供，批號110766－200417)。

2 方法與結(jié)果

2.1 丹參酮固體分散體的研究

2.1.1 制備方法

(1)丹參酮－PVP固體分散體的制備。采用溶劑法按質(zhì)量比 1∶2、1∶4、1∶6、1∶8精密稱量丹參酮提取物和PVP，用適量的乙醇攪拌溶解得澄清溶液，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上回收乙醇，放置50℃水浴上蒸干，放置真空干燥箱中50℃干燥，24小時后取出粉碎，過5號篩，備用。

(2)丹參酮－PVP物理混合物的制備。按質(zhì)量比1∶4的比例精密稱量丹參酮和PVP(均過5號篩)，按等量遞增原則進行混勻，保存?zhèn)溆谩?/p>

(3)加表面活性劑的丹參酮/PVP固體分散體的制備。采用溶劑法按質(zhì)量比 1∶6∶0.5、1∶6∶1、1∶6∶1.5、1∶6∶2精密稱量丹參酮提取物、PVP、SDS 和吐溫－80，用適量的乙醇攪拌溶解得澄清溶液，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上回收乙醇，放置50℃水浴上蒸干，放置真空干燥箱中50℃干燥，24小時后取出粉碎，過5號篩，即得。

2.1.2 體外溶出的含量測定方法

(1)檢測波長的測定。吸取適量丹參酮IIA對照品溶液用0.5%吐溫－80溶液稀釋一倍，在200－500nm處作全波長掃描，結(jié)果其在270nm處有最大吸收。并取相應(yīng)比例的PVP K30和十二烷基硫酸鈉用甲醇－0.5%吐溫－80混合溶液溶解，于200－500nm全波長掃描，于270nm處無明顯吸收，對丹參酮的測定不產(chǎn)生干擾。

(2)標準曲線的制備。精密稱量丹參酮IIA對照品適量，分別配成濃度為 2.12、4.25、6.36、8.48、10.5μg·mL－1丹參酮 IIA 對照品溶液。以甲醇為空白溶液，分別于270nm處測定丹參酮IIA的吸光度，以吸光度(A)對濃度(μg/mL)進行線性回歸，回歸方程為:A=0.085 8C －0.029 9(r=0.999 5)，由此可見，丹參酮IIA濃度在2.12－10.5μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

(3)回收率測定。精密吸取丹參酮IIA對照品溶液用0.5%吐溫80溶液稀釋一倍;精密稱量適量PVP K30粉末用甲醇溶解，再用0.5%吐溫80溶液稀釋一倍，按不同比例配制丹參酮IIA和PVP K30的高、中、低三種濃度的混合溶液(搖勻，模擬溶出操作)平行三次，分別于270nm處測定丹參酮的吸光度，計算丹參酮IIA在不同濃度比的PVP K30溶液中的回收率均在98%以上，RSD為0.90%，說明該含測方法精密度很好。

2.1.3 溶出度的測定 精密稱量丹參酮提取物及其不同比例的固體分散體(相當于丹參酮34mg)，按《中國藥典》2005版附錄XC中有關(guān)漿法規(guī)定進行，轉(zhuǎn)速100 r/分，水浴溫度37±0.5℃，溶出介質(zhì):0.5%吐溫80溶液900mL，自藥物接觸溶出介質(zhì)時，分別于 2，5，8，10，15，20，30，40，60 分鐘取樣 2mL，過微孔濾膜，同時補充同溫度的等量的介質(zhì)，于270nm處測定丹參酮IIA的含量并計算累積溶出百分率。

(1)同溶出介質(zhì)對丹參酮固體分散體溶出的影響。丹參酮－PVP(1∶6)固體分散體在人工胃液和脫氣蒸餾水中的溶出曲線都呈先上升后下降趨勢，而在0.5%吐溫80溶液中的溶出曲線不存在下降趨勢。究其原因可能是因為丹參酮固體分散體在人工胃液和蒸餾水中溶出是以粒子狀態(tài)擴散，釋放的粒子處于高度分散狀態(tài)，具有高自由能，容易相互聚集成大顆粒而沉淀下來［2］;而0.5%吐溫80溶液屬于表面活性劑降低了丹參酮溶出粒子的能量，增大了丹參酮的溶解度，從而抑制溶出粒子的聚集。結(jié)果如圖1。

(2)丹參酮/PVP K30比例不同對釋放度的影響。不同比例的丹參酮－PVP固體分散體在0.5%吐溫80溶液中的溶出曲線見圖2。

結(jié)果表明:丹參酮－PVP固體分散體比丹參酮和PVP的物理混合物的溶出有顯著性提高，并且隨著載體PVP在固體分散體中的比例的增大，溶出度也增大，丹參酮/PVP的比例在1∶6以上的溶出度已經(jīng)達到96%，綜合溶出度和載藥量因素選擇丹參酮/PVP比例為1∶6制備丹參酮－PVP固體分散體。

圖1 丹參酮固體分散體中丹參酮IIA在不同溶出介質(zhì)中的溶出曲線

圖2 不同比例丹參酮固體分散體中丹參酮IIA的溶出曲線

(3)表面活性劑對丹參酮固體分散體溶出度的影響。由圖3可知，加表面活性劑的丹參酮固體分散體在脫氣蒸餾水中溶出沒有聚集，因為吐溫80和SDS均能增加丹參酮的溶解度，降低了丹參酮溶出粒子的能量，改善丹參酮固體分散體的溶出聚集問題。由圖4可知，吐溫80對丹參酮的增溶作用比SDS的效果較好，可能是因為吐溫80在37℃時的臨界膠束濃度比SDS的要小;不加表面活性劑的丹參酮固體分散體的溶出比加表面活性劑的固體分散體的溶出要好，可能是因為丹參酮在丹參酮－PVP、丹參酮－PVP－吐溫和丹參酮－PVP－SDS的固體分散體中的分散狀態(tài)的不同導(dǎo)致溶出度不同。

圖3 加表面活性劑的丹參酮固體分散體在脫氣蒸餾水中的溶出曲線

圖4 加表面活性劑的丹參酮固體分散體在0.5%吐溫溶液中的溶出曲線

3 討論

丹參酮－PVP固體分散體在脫氣蒸餾水和人工胃液中的溶出會產(chǎn)生聚集現(xiàn)象，而表面活性劑吐溫80降低了溶出粒子的表面自由能，使得溶出不會產(chǎn)生聚集。但是實驗過程中也發(fā)現(xiàn)，表面活性劑在液相色譜柱中會產(chǎn)生死吸附，對色譜柱損害很大，因此建議改用紫外分光光度法或者將樣品進行萃取處理進行含測。

體外研究結(jié)果表明，丹參酮－PVP(1∶6)固體分散體能夠顯著的提高丹參酮的溶出度，其溶出度較原料藥提高了16倍;表面活性劑可以增加藥物的溶出以及促進一些藥物的吸收，但是制成制劑結(jié)果就不一定，應(yīng)該視藥物或制劑的不同而不同，為進一步研究丹參酮的高生物利用度奠定了基礎(chǔ)。

［1］陸彬.藥物新劑型與新技術(shù)［M］.第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2005，7:9 －16.

［2］王凌.丹參脂溶性成分吸收機理及促吸收方法研究［D］.四川大學(xué)博士學(xué)位論文，2006，4:38.