微柱凝膠技術(shù)檢測521例O型血孕婦IgG A（B）抗體效價(jià)

朱 瑩，王 婧（江蘇省南通市婦幼保健院檢驗(yàn)科 226001）

新生兒溶血病（hemolytic disease of new－born，HDN）是一種母嬰血型不合而引起胎兒或新生兒被動免疫性溶血性疾病。多見于ABO、Rh等血型系統(tǒng)，可引起胎兒貧血、水腫、流產(chǎn)、死胎、早產(chǎn)。本文對2011年1～12月南通市婦幼保健院產(chǎn)科門診送檢的521例孕婦IgG抗－A（B）效價(jià)測定的結(jié)果進(jìn)行分析研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年1～12月就診于南通市婦幼保健院產(chǎn)科門診的O型孕婦521例，年齡21～39歲，孕16周以上，其丈夫?yàn)锳型者239例，B型者223例，AB型者59例。

1.2 標(biāo)本采集 取孕婦未抗凝靜脈血3～5mL，丈夫抗凝靜脈血2mL，參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》改進(jìn)微柱法技術(shù)，根據(jù)丈夫血型不同，分別進(jìn)行IgG抗體效價(jià)測定。

1.3 儀器與試劑 微柱凝膠檢測卡及專用孵育器、血型血清學(xué)離心機(jī)、2－巰基乙醇（2－Me）應(yīng)用液由上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供，抗人球蛋白由長春博訊生物技術(shù)有限公司提供。

1.4 檢測方法 取200μL待檢血清與等量2－Me混合，37℃孵育30～60min，破壞血清中的IgM抗體后用生理鹽水倍比稀釋，稀釋度分別為16、32、64、128、256、512。將稀釋好的血清50μL分別加入標(biāo)記好的微柱凝膠檢測卡中，分別加入0.8%A型（或B型）標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液50μL后放入專用孵育器15min，然后用血型血清學(xué)離心機(jī)離心5min（900r／min離心2 min，1 500r／min離心3min），結(jié)果判定以肉眼觀察凝集為陽性的最高稀釋度的為其抗體效價(jià)。

2 結(jié) 果

檢測O血型孕婦血清IgG抗－A（B）521例，陽性檢出率（效價(jià)大于或等于1∶128）為49.66%。其中IgG抗－A檢出率為54.03%，IgG抗－B檢出率為45.04%。效價(jià)大于或等于1∶128的患者例數(shù)中，隨著抗體效價(jià)增高，患者例數(shù)逐漸減少，檢出率亦減低。檢測結(jié)果見表1。

表1 521例O型孕婦產(chǎn)前IgG抗－A、抗－B效價(jià)檢測［n（%）］

3 討 論

HDN發(fā)生在胎兒和新生兒，在我國以血型不合導(dǎo)致的ABO－HDN多見。ABO溶血病占HDN的85.3%，RH溶血病占14.6%［1］，也可見于MH等血型系統(tǒng)。ABO系統(tǒng)溶血病是母子ABO血型不合引發(fā)的HDN，主要是由于胎兒紅細(xì)胞A／B抗原與來自母體的抗體反應(yīng)的結(jié)果。O型人具有IgG抗－A（B）的人數(shù)比A型或B型人的IgG抗體的人數(shù)多，所以ABO溶血病以母親為O型的發(fā)病率為最高［2］。臨床癥狀常表現(xiàn)為黃疸、水腫、貧血、肝脾腫大，甚至死胎、新生兒死亡等溶血病癥狀和并發(fā)癥。一般孕婦血清中IgG抗體效價(jià)的高低與胎兒受害程度呈正相關(guān)。準(zhǔn)確測定孕婦血清中IgG抗－A（B）效價(jià)可作為產(chǎn)前診斷和預(yù)防ABO－HDN提供依據(jù)［3］。一般傳統(tǒng)的方法認(rèn)為，當(dāng)IgG抗－A（B）效價(jià)小于64時(shí)，即使母嬰血型不同，很少發(fā)生新生兒黃疸，當(dāng)抗體效價(jià)大于或等于1∶64時(shí)，就有可能使新生兒發(fā)生溶血，如果母親血清中IgG抗－A（B）效價(jià)大于或等于1∶128時(shí)，提示嬰兒很可能受害，如果IgG抗－A（B）效價(jià)大于或等于1∶512時(shí)，幾乎100%受害，必須進(jìn)行臨床預(yù)防性治療［4］。傳統(tǒng)的抗人球蛋白試管法經(jīng)改良為微柱凝膠法后靈敏度大為提高，有多家文獻(xiàn)報(bào)道［5－7］。本院根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)合長期的臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，采用1∶128作為臨床判斷異常臨界值。

本文所檢測的521例O型孕婦，其中IgG抗－A效價(jià)大于或等于1∶128者有161例，占IgG抗－A總?cè)藬?shù)的54.03%；IgG抗－B效價(jià)大于或等于1∶128者有127例，占IgG抗－B總?cè)藬?shù)的45.04%。結(jié)果顯示O－A不合者例數(shù)高于O－B不合者，前者為后者的1.27倍，與有關(guān)資料報(bào)道的前者為后者的1.22接近，這可能與紅細(xì)胞上A抗原較強(qiáng)有關(guān)。本研究中抗體效價(jià)大于或等于1∶128的檢出率高達(dá)49.66%，明顯高于其他文獻(xiàn)的報(bào)道［8］，這可能與實(shí)驗(yàn)方法或樣本量的大小以及地區(qū)分布有關(guān)。隨著抗體效價(jià)的增高，患者的陽性檢出率逐漸降低，這可能與孕婦的及早檢查與積極治療有關(guān)。

總之，產(chǎn)前孕婦IgG抗－A（B）效價(jià)的測定對預(yù)防和評估新生兒ABO－HDN是很有必要的，特別是對于效價(jià)大于或等于1∶128者，應(yīng)定期復(fù)檢，及時(shí)給予中西醫(yī)結(jié)合治療，可預(yù)防和減少新生兒溶血病的發(fā)生。這對優(yōu)生優(yōu)育、提高新生兒生存質(zhì)量有重要意義。

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