某進(jìn)口HIV檢測試劑的室間質(zhì)評呈假陰性結(jié)果分析

蘇武錦

（廣西壯族自治區(qū)南寧市中心血站 530003）

人類免疫缺陷病毒（HIV）主要經(jīng)血液以及性傳播途徑傳播。GB18467-2001《獻(xiàn)血者健康檢查要求》明確規(guī)定對獻(xiàn)血者進(jìn)行HIV抗體的篩查，所用方法為酶聯(lián)免疫法。目前第3代試劑檢測HIV-1／2抗體，第4代試劑既檢測 HIV-1／2抗體，也檢測HIV-1P24抗原。為保證血液篩查試劑的質(zhì)量，本血站實驗室所選用試劑均符合國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，且每批試劑投入使用前都進(jìn)行確認(rèn)，同時每年定期參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心的室間質(zhì)量評價，通過分析實驗中存在的問題，采取相應(yīng)措施提高檢驗質(zhì)量。本文對2011年度本站實驗室參加衛(wèi)生部第3次室間質(zhì)評HIV項目的結(jié)果進(jìn)行了總結(jié)分析，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料 衛(wèi)生部臨床檢驗中心提供室間質(zhì)量評價（EQA）樣品5份。

1.2 試劑 某國產(chǎn)第3代抗-HIV（1／2）型診斷試劑盒；某進(jìn)口第4代HIV抗體（1／2）及抗原（P24）聯(lián)合檢測試劑盒；兩種試劑均有批準(zhǔn)文號與批檢報告，有效期內(nèi)使用。

1.3 儀器 全自動加樣器（STAR）、全自動酶免分析儀（瑞士Hamilton公司）。

1.4 方法

1.4.1 操作嚴(yán)格按SOP進(jìn)行，常規(guī)條件下進(jìn)行測定，由進(jìn)行常規(guī)檢測的工作人員執(zhí)行，EQA樣品按常規(guī)標(biāo)本進(jìn)行檢測。

1.4.2 根據(jù)血站系統(tǒng)以血液篩查為目的的檢測策略，標(biāo)本檢測兩種試劑都呈無反應(yīng)性，則判為陰性反應(yīng)；任一種試劑呈反應(yīng)性或同時兩種試劑都呈反應(yīng)性的標(biāo)本，判為篩查反應(yīng)性。

1.4.3 衛(wèi)生部臨床檢驗中心對血站系統(tǒng)檢測項目的兩種試劑的檢測結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，但參評實驗室的成績僅按最終結(jié)果（1.4.2的結(jié)論）進(jìn)行評價。

2 結(jié) 果

2.1 5份EQA樣品檢測符合率為100%，但參加質(zhì)評的1172號標(biāo)本，國產(chǎn)試劑檢測呈反應(yīng)性而進(jìn)口試劑檢測呈無反應(yīng)性，見表1。

2.2 衛(wèi)生部臨床檢驗中心1172號標(biāo)本的確認(rèn)結(jié)果為gp120＋，gp41＋＋，gp31＋，gp117－，gp36－，p24－，p17＋，符合HIV-1抗體陽性判定標(biāo)準(zhǔn)：（1）至少有2條env帶（gp41和gp160／gp120）出現(xiàn)，或至少1條env帶和p24帶同時出現(xiàn)；（2）符合試劑盒提供的陽性判定標(biāo)準(zhǔn)，見表1。

2.3 5份EQA樣品HIV項目不同試劑檢測S／CO值結(jié)果見表2。

表1 5份EQA樣品的HIV項目檢測結(jié)果

表2 5份EQA樣品HIV項目不同試劑檢測S／CO值結(jié)果＊

3 討 論

3.1 本次EQA活動有5個樣品，除了1172號樣品兩種試劑檢測結(jié)果不一致，其余樣品的兩種試劑檢測結(jié)果均一致，即1172號標(biāo)本國產(chǎn)試劑檢測有反應(yīng)性而進(jìn)口試劑檢測呈無反應(yīng)性，見表1。根據(jù)標(biāo)本檢測任一種試劑呈反應(yīng)性或同時兩種試劑都呈反應(yīng)性的標(biāo)本即判為篩查反應(yīng)性的原則，本室判定該標(biāo)本為篩查反應(yīng)性作為樣品篩查的最終結(jié)果，并按要求上報質(zhì)評結(jié)果。盡管衛(wèi)生部臨床檢驗中心對采供血機構(gòu)實驗室的檢測項目的兩次檢測結(jié)果均進(jìn)行了數(shù)據(jù)采集，但實驗室的成績僅按最終結(jié)果評價；因此本次5個EQA樣品HIV的檢測結(jié)論與衛(wèi)生部臨床檢驗中心回報結(jié)果一致，檢測結(jié)論符合率為100%。說明了國產(chǎn)試劑檢測1172號標(biāo)本呈反應(yīng)性符合預(yù)期結(jié)果，而進(jìn)口試劑檢測呈無反應(yīng)性未符合預(yù)期結(jié)果。

3.2 阻斷經(jīng)輸血傳播疾病，保證臨床用血安全，決定了血站系統(tǒng)必須以血液篩查為目的的檢測策略，這就要求血站實驗室必須加強實驗室管理，選擇特異性好、靈敏度高的檢測試劑，強化檢測過程的質(zhì)量控制。雖然本室參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心血清標(biāo)志物室間質(zhì)評結(jié)果表明總體結(jié)果成功，但存在個別試劑檢測結(jié)果與預(yù)期值不符。而本站實驗室進(jìn)行EQA活動，已經(jīng)從樣品接收、處理、準(zhǔn)備、方法、審核、檢驗的每一步驟和結(jié)果的報告都進(jìn)行了文件化管理；檢測試劑更是從試劑的采購與入庫、試劑的貯存、試劑的驗收與確認(rèn)、試劑的使用等方面進(jìn)行規(guī)范管理。因此本室個別試劑檢測結(jié)果與預(yù)期值不符，可以排除：（1）書寫誤差；（2）方法學(xué)問題；（3）技術(shù)問題；（4）質(zhì)評樣本問題；（5）結(jié)果評價問題等［1］。

3.3 對照衛(wèi)生部臨床檢驗中心反饋的117批抗-HIV不同試劑檢測S／CO值結(jié)果（表2）發(fā)現(xiàn)：全國血站實驗室參加EQA所使用試劑有13種試劑，分別由11家試劑廠生產(chǎn)，其中8家國產(chǎn)，3家進(jìn)口；使用單位數(shù)達(dá)886個，國產(chǎn)使用單位數(shù)679個，占使用總數(shù)78.41%，進(jìn)口使用單位數(shù)187個，占使用總數(shù)21.59%；而1172號EQA陽性標(biāo)本，8家國產(chǎn)試劑檢測的S／CO平均值均大于1.0，3家進(jìn)口試劑檢測的S／CO平均值均未達(dá)到1.0。說明了進(jìn)口試劑對1172號陽性標(biāo)本的檢測能力較差。而本站實驗室使用的進(jìn)口3試劑，全國血站使用單位數(shù)達(dá)130個，占進(jìn)口試劑使用總數(shù)的69.52%（130／187），其 S／CO平均值僅為0.5，標(biāo)準(zhǔn)差0.24，說明了全國130個使用單位使用該試劑檢測1172號陽性標(biāo)本均呈假陰性結(jié)果。

3.4 李秀華等［2］研究報告指出：我國目前流行的HIV毒株中以泰國B亞型（B′亞型）和BC重組型最多，約占80%以上，其次為AE重組型，約占10%左右；而進(jìn)口試劑檢測不同基因型樣品的敏感性低于大部分國產(chǎn)試劑，國產(chǎn)試劑檢測不同基因型的樣品的敏感性無明顯差異，而進(jìn)口試劑檢測B′亞型抗體的能力低于檢測BC重組型抗體的能力。不少專家在實際應(yīng)用中也發(fā)現(xiàn)，采用兩種HIV檢測試劑檢測，相對于國產(chǎn)試劑，進(jìn)口試劑靈敏度、特異性并無明顯優(yōu)勢［3－4］，甚至有部分國產(chǎn)試劑在敏感性和特異性上與進(jìn)口試劑相比具有一定優(yōu)勢［5］。

因此，為保證獻(xiàn)血者血液檢測質(zhì)量，防止輸血感染，不是單純選擇用一個國產(chǎn)試劑和一個進(jìn)口試劑來進(jìn)行聯(lián)合檢測，就能保證HIV抗體試劑檢測的準(zhǔn)確性。作者在選擇試劑時，必須對預(yù)使用的試劑進(jìn)行確認(rèn)，同時應(yīng)充分利用室間質(zhì)評的客觀證據(jù)輔助質(zhì)量評價（包括使用前、中、后3個階段），而非盲目推崇進(jìn)口試劑。

［1］ 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程［M］.3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：108-109.

［2］ 李秀華，許四宏，宋愛京，等.不同HIV抗體檢測試劑檢測抗HIV-1膜蛋白抗體的敏感性［J］.中國生物制品學(xué)雜志，2009，22（1）：69-71.

［3］ 秦艷蘭，劉景春，劉仁強，等.國產(chǎn)和進(jìn)口HIV酶聯(lián)免疫試劑盒精確性檢測比較［J］.中國熱帶醫(yī)學(xué)，2009，9（3）：546-548.

［4］ 戴涌，陳慧萍，湯恒，等.2004年湖北省內(nèi)使用的HIV抗體ELISA診斷試劑的評估分析［J］.江西醫(yī)藥，2005，40（10）：623-624.

［5］ 余剛寶.某國產(chǎn)與進(jìn)口HIV診斷試劑檢測結(jié)果分析［J］.臨床輸血與檢驗，2010，12（1）：57-58.