某進(jìn)口HIV檢測(cè)試劑的室間質(zhì)評(píng)呈假陰性結(jié)果分析

蘇武錦

（廣西壯族自治區(qū)南寧市中心血站 530003）

人類免疫缺陷病毒（HIV）主要經(jīng)血液以及性傳播途徑傳播。GB18467-2001《獻(xiàn)血者健康檢查要求》明確規(guī)定對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行HIV抗體的篩查，所用方法為酶聯(lián)免疫法。目前第3代試劑檢測(cè)HIV-1／2抗體，第4代試劑既檢測(cè) HIV-1／2抗體，也檢測(cè)HIV-1P24抗原。為保證血液篩查試劑的質(zhì)量，本血站實(shí)驗(yàn)室所選用試劑均符合國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，且每批試劑投入使用前都進(jìn)行確認(rèn)，同時(shí)每年定期參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)，通過(guò)分析實(shí)驗(yàn)中存在的問(wèn)題，采取相應(yīng)措施提高檢驗(yàn)質(zhì)量。本文對(duì)2011年度本站實(shí)驗(yàn)室參加衛(wèi)生部第3次室間質(zhì)評(píng)HIV項(xiàng)目的結(jié)果進(jìn)行了總結(jié)分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料 衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（EQA）樣品5份。

1.2 試劑 某國(guó)產(chǎn)第3代抗-HIV（1／2）型診斷試劑盒；某進(jìn)口第4代HIV抗體（1／2）及抗原（P24）聯(lián)合檢測(cè)試劑盒；兩種試劑均有批準(zhǔn)文號(hào)與批檢報(bào)告，有效期內(nèi)使用。

1.3 儀器 全自動(dòng)加樣器（STAR）、全自動(dòng)酶免分析儀（瑞士Hamilton公司）。

1.4 方法

1.4.1 操作嚴(yán)格按SOP進(jìn)行，常規(guī)條件下進(jìn)行測(cè)定，由進(jìn)行常規(guī)檢測(cè)的工作人員執(zhí)行，EQA樣品按常規(guī)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。

1.4.2 根據(jù)血站系統(tǒng)以血液篩查為目的的檢測(cè)策略，標(biāo)本檢測(cè)兩種試劑都呈無(wú)反應(yīng)性，則判為陰性反應(yīng)；任一種試劑呈反應(yīng)性或同時(shí)兩種試劑都呈反應(yīng)性的標(biāo)本，判為篩查反應(yīng)性。

1.4.3 衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心對(duì)血站系統(tǒng)檢測(cè)項(xiàng)目的兩種試劑的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，但參評(píng)實(shí)驗(yàn)室的成績(jī)僅按最終結(jié)果（1.4.2的結(jié)論）進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2 結(jié) 果

2.1 5份EQA樣品檢測(cè)符合率為100%，但參加質(zhì)評(píng)的1172號(hào)標(biāo)本，國(guó)產(chǎn)試劑檢測(cè)呈反應(yīng)性而進(jìn)口試劑檢測(cè)呈無(wú)反應(yīng)性，見(jiàn)表1。

2.2 衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心1172號(hào)標(biāo)本的確認(rèn)結(jié)果為gp120＋，gp41＋＋，gp31＋，gp117－，gp36－，p24－，p17＋，符合HIV-1抗體陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：（1）至少有2條env帶（gp41和gp160／gp120）出現(xiàn)，或至少1條env帶和p24帶同時(shí)出現(xiàn)；（2）符合試劑盒提供的陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)，見(jiàn)表1。

2.3 5份EQA樣品HIV項(xiàng)目不同試劑檢測(cè)S／CO值結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 5份EQA樣品的HIV項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果

表2 5份EQA樣品HIV項(xiàng)目不同試劑檢測(cè)S／CO值結(jié)果＊

3 討 論

3.1 本次EQA活動(dòng)有5個(gè)樣品，除了1172號(hào)樣品兩種試劑檢測(cè)結(jié)果不一致，其余樣品的兩種試劑檢測(cè)結(jié)果均一致，即1172號(hào)標(biāo)本國(guó)產(chǎn)試劑檢測(cè)有反應(yīng)性而進(jìn)口試劑檢測(cè)呈無(wú)反應(yīng)性，見(jiàn)表1。根據(jù)標(biāo)本檢測(cè)任一種試劑呈反應(yīng)性或同時(shí)兩種試劑都呈反應(yīng)性的標(biāo)本即判為篩查反應(yīng)性的原則，本室判定該標(biāo)本為篩查反應(yīng)性作為樣品篩查的最終結(jié)果，并按要求上報(bào)質(zhì)評(píng)結(jié)果。盡管衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心對(duì)采供血機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)項(xiàng)目的兩次檢測(cè)結(jié)果均進(jìn)行了數(shù)據(jù)采集，但實(shí)驗(yàn)室的成績(jī)僅按最終結(jié)果評(píng)價(jià)；因此本次5個(gè)EQA樣品HIV的檢測(cè)結(jié)論與衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心回報(bào)結(jié)果一致，檢測(cè)結(jié)論符合率為100%。說(shuō)明了國(guó)產(chǎn)試劑檢測(cè)1172號(hào)標(biāo)本呈反應(yīng)性符合預(yù)期結(jié)果，而進(jìn)口試劑檢測(cè)呈無(wú)反應(yīng)性未符合預(yù)期結(jié)果。

3.2 阻斷經(jīng)輸血傳播疾病，保證臨床用血安全，決定了血站系統(tǒng)必須以血液篩查為目的的檢測(cè)策略，這就要求血站實(shí)驗(yàn)室必須加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室管理，選擇特異性好、靈敏度高的檢測(cè)試劑，強(qiáng)化檢測(cè)過(guò)程的質(zhì)量控制。雖然本室參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心血清標(biāo)志物室間質(zhì)評(píng)結(jié)果表明總體結(jié)果成功，但存在個(gè)別試劑檢測(cè)結(jié)果與預(yù)期值不符。而本站實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行EQA活動(dòng)，已經(jīng)從樣品接收、處理、準(zhǔn)備、方法、審核、檢驗(yàn)的每一步驟和結(jié)果的報(bào)告都進(jìn)行了文件化管理；檢測(cè)試劑更是從試劑的采購(gòu)與入庫(kù)、試劑的貯存、試劑的驗(yàn)收與確認(rèn)、試劑的使用等方面進(jìn)行規(guī)范管理。因此本室個(gè)別試劑檢測(cè)結(jié)果與預(yù)期值不符，可以排除：（1）書(shū)寫(xiě)誤差；（2）方法學(xué)問(wèn)題；（3）技術(shù)問(wèn)題；（4）質(zhì)評(píng)樣本問(wèn)題；（5）結(jié)果評(píng)價(jià)問(wèn)題等［1］。

3.3 對(duì)照衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心反饋的117批抗-HIV不同試劑檢測(cè)S／CO值結(jié)果（表2）發(fā)現(xiàn)：全國(guó)血站實(shí)驗(yàn)室參加EQA所使用試劑有13種試劑，分別由11家試劑廠生產(chǎn)，其中8家國(guó)產(chǎn)，3家進(jìn)口；使用單位數(shù)達(dá)886個(gè)，國(guó)產(chǎn)使用單位數(shù)679個(gè)，占使用總數(shù)78.41%，進(jìn)口使用單位數(shù)187個(gè)，占使用總數(shù)21.59%；而1172號(hào)EQA陽(yáng)性標(biāo)本，8家國(guó)產(chǎn)試劑檢測(cè)的S／CO平均值均大于1.0，3家進(jìn)口試劑檢測(cè)的S／CO平均值均未達(dá)到1.0。說(shuō)明了進(jìn)口試劑對(duì)1172號(hào)陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)能力較差。而本站實(shí)驗(yàn)室使用的進(jìn)口3試劑，全國(guó)血站使用單位數(shù)達(dá)130個(gè)，占進(jìn)口試劑使用總數(shù)的69.52%（130／187），其 S／CO平均值僅為0.5，標(biāo)準(zhǔn)差0.24，說(shuō)明了全國(guó)130個(gè)使用單位使用該試劑檢測(cè)1172號(hào)陽(yáng)性標(biāo)本均呈假陰性結(jié)果。

3.4 李秀華等［2］研究報(bào)告指出：我國(guó)目前流行的HIV毒株中以泰國(guó)B亞型（B′亞型）和BC重組型最多，約占80%以上，其次為AE重組型，約占10%左右；而進(jìn)口試劑檢測(cè)不同基因型樣品的敏感性低于大部分國(guó)產(chǎn)試劑，國(guó)產(chǎn)試劑檢測(cè)不同基因型的樣品的敏感性無(wú)明顯差異，而進(jìn)口試劑檢測(cè)B′亞型抗體的能力低于檢測(cè)BC重組型抗體的能力。不少專家在實(shí)際應(yīng)用中也發(fā)現(xiàn)，采用兩種HIV檢測(cè)試劑檢測(cè)，相對(duì)于國(guó)產(chǎn)試劑，進(jìn)口試劑靈敏度、特異性并無(wú)明顯優(yōu)勢(shì)［3－4］，甚至有部分國(guó)產(chǎn)試劑在敏感性和特異性上與進(jìn)口試劑相比具有一定優(yōu)勢(shì)［5］。

因此，為保證獻(xiàn)血者血液檢測(cè)質(zhì)量，防止輸血感染，不是單純選擇用一個(gè)國(guó)產(chǎn)試劑和一個(gè)進(jìn)口試劑來(lái)進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，就能保證HIV抗體試劑檢測(cè)的準(zhǔn)確性。作者在選擇試劑時(shí)，必須對(duì)預(yù)使用的試劑進(jìn)行確認(rèn)，同時(shí)應(yīng)充分利用室間質(zhì)評(píng)的客觀證據(jù)輔助質(zhì)量評(píng)價(jià)（包括使用前、中、后3個(gè)階段），而非盲目推崇進(jìn)口試劑。

［1］ 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：108-109.

［2］ 李秀華，許四宏，宋愛(ài)京，等.不同HIV抗體檢測(cè)試劑檢測(cè)抗HIV-1膜蛋白抗體的敏感性［J］.中國(guó)生物制品學(xué)雜志，2009，22（1）：69-71.

［3］ 秦艷蘭，劉景春，劉仁強(qiáng)，等.國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口HIV酶聯(lián)免疫試劑盒精確性檢測(cè)比較［J］.中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2009，9（3）：546-548.

［4］ 戴涌，陳慧萍，湯恒，等.2004年湖北省內(nèi)使用的HIV抗體ELISA診斷試劑的評(píng)估分析［J］.江西醫(yī)藥，2005，40（10）：623-624.

［5］ 余剛寶.某國(guó)產(chǎn)與進(jìn)口HIV診斷試劑檢測(cè)結(jié)果分析［J］.臨床輸血與檢驗(yàn)，2010，12（1）：57-58.