標(biāo)本不同處理因素對部分生化項(xiàng)目的影響

胡鶴娟，徐銀根，徐喜林，張雅娟（蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院檢驗(yàn)藥學(xué)系，江蘇蘇州 215009）

臨床生化檢驗(yàn)在輔助臨床醫(yī)生診斷疾病、觀察療效等醫(yī)療過程中具有重要地位。但在日常檢測中常存在一些分析誤差，甚至超過病情變化，導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確。影響生化檢驗(yàn)結(jié)果的因素很多，也很復(fù)雜，其中標(biāo)本因素是主要的原因之一。血液標(biāo)本采集后若不能及時(shí)檢測，其放置時(shí)間，是否封閉放置保存，是否血清分離放置保存都可能影響檢驗(yàn)結(jié)果。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本 健康成年人靜脈血液標(biāo)本。

1.2 儀器與試劑 日立7020型自動(dòng)生化分析儀，試劑使用德賽診斷系統(tǒng)（上海）有限公司生產(chǎn)的相關(guān)分析試劑和質(zhì)控血清（TruLab N復(fù)合定值質(zhì)控血清Lot.No.15207）及標(biāo)準(zhǔn)品（Tru－Cal U復(fù)合校準(zhǔn)血清 Lot.No.6480）。

1.3 方法

1.3.1 放置時(shí)間對部分項(xiàng)目的影響 以丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、γ－谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）、乳酸脫氫酶（LDH）為分析項(xiàng)目，根據(jù)《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》［1］，靜脈采集血液標(biāo)本后，靜置20 min待血液收縮，4 000r／min離心10min，分離血清，立即檢測，作為對照組；3h組：靜脈血室溫放置3h后離心，檢測血清；7h組：靜脈血室溫放置7h后離心，檢測血清；24h組：靜脈血室溫放置24h后離心，檢測血清。

1.3.2 全血保存與血清分離保存對檢測結(jié)果的影響 以ALT、LDH、血糖（GLU）為例，對照組：根據(jù)操作規(guī)程，血液標(biāo)本采集后，靜置20min待血塊收縮，4 000r／min離心10min，分離血清，立即檢測；全血保存組：全血4℃保存24h離心，檢測血清；血清保存組：血液標(biāo)本分離出血清，4℃保存24h，檢測血清。

1.3.3 是否密封保存對檢測結(jié)果的影響 以ALP為例，對照組：根據(jù)操作規(guī)程，血液標(biāo)本采集后，靜置20min待血塊收縮，4 000r／min離心10min，分離血清，立即檢測；實(shí)驗(yàn)組1：加蓋密封全血4℃保存24h離心，檢測血清；實(shí)驗(yàn)組2：分離出血清，加蓋密封4℃保存24h，檢測血清；實(shí)驗(yàn)組3：全血未密封4℃保存24h，檢測血清；實(shí)驗(yàn)組4：分離出血清后，未密封4℃保存24h，檢測血清。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0進(jìn)行配對t檢驗(yàn)處理。

2 結(jié) 果

2.1 放置時(shí)間對生化檢驗(yàn)部分指標(biāo)檢測結(jié)果的影響，以ALT、AST、ALP、GGT為例，結(jié)果見表1。

表1 放置時(shí)間對部分酶指標(biāo)的影響（，U／L）

表1 放置時(shí)間對部分酶指標(biāo)的影響（，U／L）

注：與對照組比較，＊P＜0.01，＊＊P＜0.01。

組別 n 2 183.8±21.96 3h組 10 16.01±6.72 18.2±4.68 77.1±15.82 11.3±5.65 183.3±22.74 7h組 10 16.37±6.92 19.1±4.33 78.2±16.55 12.0±5.33 188.4±25.15＊24h組 10 16.57±7.09 17.8±4.75 77.4±16.15 12.0±5.69 196.2±26.41 ALT AST ALP GGT LDH對照組 10 16.00±6.48 18.3±4.72 78.1±16.28 11.4±5.6＊＊

2.2 全血保存與血清分離保存對生化檢驗(yàn)指標(biāo)檢測結(jié)果的影響，以ALT、LDH、GLU為例，結(jié)果表2。

表2 全血保存與血清分離保存對部分指標(biāo)的影響（n＝12，）

表2 全血保存與血清分離保存對部分指標(biāo)的影響（n＝12，）

注：與對照組比較，＊P＜0.01，＊＊P＜0.01。

組別 ALT（U／L） LDH（U／L） GLU（mmol／L）11.29±3.19 194.83±27.09 4.88±0.68全血保存 12.14±3.07 217.41±28.35＊ 3.30±0.81＊＊血清保存對照組11.41±2.97 202.75±27.22 5.08±0.80

2.3 是否密封保存對檢測結(jié)果的影響，以ALP為例，未密封保存時(shí)數(shù)值升高，并且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，結(jié)果見表3。

表3 是否密封保存對ALP檢測結(jié)果的影響（，U／L）

表3 是否密封保存對ALP檢測結(jié)果的影響（，U／L）

注：與對照組比較，＊P＜0.01，＊＊P＜0.01。

組別 n ALP對照組（密封）15 74.33±11.79實(shí)驗(yàn)組1 15 74.60±12.05實(shí)驗(yàn)組2 15 74.66±11.61對照組（未密封） 15 70.80±7.85實(shí)驗(yàn)組3 15 85.86±6.65＊實(shí)驗(yàn)組4 15 92.60±5.67＊＊

3 討 論

生化標(biāo)本應(yīng)盡早測定，盡量降低影響因素［2－3］，但臨床工作中，從病區(qū)標(biāo)本采集，經(jīng)集中運(yùn)輸、標(biāo)本分類、編號(hào)及前處理到上機(jī)檢測，至少3h甚至更長時(shí)間。本文通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，血液標(biāo)本長時(shí)間（3、7、24h）保存對部分酶指標(biāo)，如 ALT、AST、ALP、GGT，沒有顯著性影響，而對LDH檢測結(jié)果有明顯影響，尤其是7h組、24h組。紅細(xì)胞中LDH活性比血清約高100倍［4－6］，而且全血保存24h后，由于 ATP能量產(chǎn)生障礙，細(xì)胞膜通透性增加，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成分發(fā)生轉(zhuǎn)移和釋放，酶活性受到影響，因而LDH顯著升高。

與對照組比較，全血保存及血清分離保存對ALT檢測無差異。參照對照組，血清分離保存24h，對LDH和GLU指標(biāo)分析無影響；但全血保存24h，LDH值升高，GLU下降，均有顯著差異。由于紅細(xì)胞中進(jìn)行糖酵解，室溫下糖酵解速率為每小時(shí)5%～7%，使血中GLU濃度減少，差異顯著。所以，臨床實(shí)際工作中，血液標(biāo)本較長時(shí)間放置對部分酶指標(biāo)影響不顯著，但是對LDH、GLU檢測值產(chǎn)生明顯差異，故對LDH項(xiàng)目，標(biāo)本采集后若3h內(nèi)不能完成檢測，應(yīng)分離血清保存或采用含惰性分離膠的真空采血管采集標(biāo)本。對GLU項(xiàng)目，標(biāo)本離體后應(yīng)立即檢測，若不能完成，則應(yīng)分離血清保存。

血液標(biāo)本敞開保存時(shí)，ALP檢驗(yàn)結(jié)果升高，與對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？赡苡捎谖疵芊獗４鏁r(shí)，標(biāo)本水分蒸發(fā)，血清濃縮，檢驗(yàn)結(jié)果升高；對比全血保存組，血清分離保存組升高值更大，可能與全血保存時(shí)，血液細(xì)胞中水分?jǐn)U散有關(guān)。細(xì)胞膜存在水通道，水分子從滲透壓低的一側(cè)向滲透壓高的一側(cè)移動(dòng)［7－8］。在密封保存狀態(tài)下，全血保存組及血清分離保存組與對照組比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在臨床工作中，為保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，標(biāo)本采集后，若不能立即檢測，建議用真空采血管密封保存或普通試管上加蓋保存。作者將進(jìn)一步分析探討血液標(biāo)本放置時(shí)間及全血、血清分離保存對其他生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響，以期為臨床實(shí)際工作提供有用信息，從而降低分析前誤差，做好室內(nèi)質(zhì)控。

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