梔子水提取物對實(shí)驗(yàn)性2型糖尿病大鼠血糖及同型半胱氨酸水平的影響

周瑞華，王虹玉，喇萬英，唐詠梅，寧鴻珍，康瑞雪，夏 青

河北聯(lián)合大學(xué)，唐山 06300

隨著我國人口老齡化及生活方式的改變，糖尿病(diabetes mellitus，DM)［1］也已經(jīng)成為一種常見病和多發(fā)病。糖尿病導(dǎo)致的病殘、病死率僅次于癌癥和心血管疾病，成為危害人類健康的第三頑癥，嚴(yán)重危害社會和家庭，已受到世界各國的高度重視，其中糖尿病慢性并發(fā)癥特別是糖尿病大血管病變，是糖尿病病人致殘和死亡的主要原因。

梔子(Gardenia jasminoides Ellis)為茜草科植物梔子的干燥成熟果實(shí)。早在《藥性論》中有記載“除熱及消渴口干”，其中解消渴與2型糖尿病有關(guān)。日本學(xué)者 Kimura［2］和 Miura［3］最早報(bào)道了梔子中的環(huán)烯醚萜苷具有降糖作用。本實(shí)驗(yàn)的目標(biāo)就是研究和探討梔子提取物對實(shí)驗(yàn)性2型糖尿病大鼠的血糖、血脂及同型半胱氨酸的作用。

1 試驗(yàn)材料

1.1 動物

SPF級健康雄性wistar大鼠，體重(180±20)g，購自北京華阜康生物科技股份有限公司，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物研究，合格證號為SCXK(京)2010-0004。

1.2 藥品

梔子購自安國市，經(jīng)喇萬英教授鑒定為正品。制備方法:水提2次，合并濾液過濾，濃縮，干燥，粉碎。鹽酸二甲雙胍，規(guī)格0.5 g/片，20片/盒，由中美上海施貴寶制藥有限公司提供，批號1007000。

1.3 試劑

鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)Sigma公司提供，批號S0130，購自北京博愛港商貿(mào)中心，-24℃保存。用檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液冰浴下配置成1%的STZ溶液，現(xiàn)配現(xiàn)用;STZ緩沖液，包括檸檬酸(FW:210.14)及檸檬酸鈉(FW:294.10)，天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號20090302。其配法:0.1 mol/L的檸檬酸及檸檬酸鈉溶液，按1:1的比例混合，調(diào)節(jié) pH4.2 ～4.5［4］，并用孔徑為 0.45 μm 的微孔濾膜過濾。AGM-2300型唐博士血糖儀(A8H4316)及唐博士血糖試紙(北京唐博士醫(yī)學(xué)科技有限公司)，血糖試紙，批號 S09F15202;膽固醇(TC)試劑盒，批號20100907;甘油三酯(TG)試劑盒，批號20100728;高密度脂蛋白膽固醇(HDLC)試劑盒，批號20100702;低密度脂蛋白膽固醇(LDLC)試劑盒，批號20100702;均為北京北化康泰臨床試劑有限公司出品;大鼠同型半胱氨酸試劑盒(Hcy)。

1.4 儀器

AGM-2300型唐博士血糖儀(A8H4316)及唐博士血糖試紙(北京唐博士醫(yī)學(xué)科技有限公司)，血糖試紙，批號S09F15202;北京唐博士醫(yī)學(xué)科技有限公司;FDV型原泰奇氣引式粉碎機(jī)，佑崎有限公司;JM5102型電子天平及JM型電子分析天平，浙江余姚紀(jì)銘稱重校驗(yàn)設(shè)備有限公司;日立7180全自動生化分析儀，日本日立公司。

2 試驗(yàn)方法

2.1 分組與造模

正常Wistar大鼠70只，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)抽取10只作為正常對照組，普通維持飼料喂養(yǎng)，其余大鼠高糖高脂飼料喂養(yǎng)，喂養(yǎng)4周后，禁食不禁水12 h 后，ip 30 mg/kgSTZ 造模［5］，7 d 后，尾靜脈采血測血糖，其空腹血糖≥11.1 mol/L為造模成功。棄掉未成模大鼠，將成模大鼠隨機(jī)分為模型對照組(ig同體積生理鹽水)、鹽酸二甲雙胍組ig 0.5 g/kg、梔子提取物組(低、中、高劑量組以生藥計(jì)分別為 0.2、0.4、0.6 g/kg)，每組 10 只。

2.2 觀察指標(biāo)

給藥4周后，腹主動脈取血測空腹 FBG、TC、TG、LDLC、HDLC 及 Hcy。

2.3 數(shù)據(jù)處理

3 試驗(yàn)結(jié)果

3.1 對FBG的影響

表1的結(jié)果顯示，用藥前，與正常組相比，模型組大鼠的血糖值顯著升高，說明造模成功。梔子提取物3個劑量組用藥4周后，均可使糖尿病大鼠的血糖明顯降低，并且用藥前后大鼠的血糖值有顯著性差異(P ＜0.05)。

表1 梔子提取物對糖尿病模型大鼠血糖的影響(n=10，)Table 1 Effect of gardenia extract on blood glucose of diabetic rats(n=10，)

表1 梔子提取物對糖尿病模型大鼠血糖的影響(n=10，)Table 1 Effect of gardenia extract on blood glucose of diabetic rats(n=10，)

注:▲表示與正常對照組比較，P＜0.01;*表示與模型對照組比較，P＜0.01;#表示用藥前后組間比較，P＜0.05，下同。Note:Compare with normal comparison group，▲meant P ＜ 0.01;Compare with model treatment group，*meant P ＜ 0.01;Compare with between group，#meant P ＜0.05，below was the same.

組別Group數(shù)量No.用藥前空腹血糖值The fasting blood glucose before administration(mmol/L)用藥后空腹血糖值The fasting blood glucose after administration(mmol/L)正照組 Normal comparison group 10 5.10 ±0.48 5.14 ±0.19*模 型 組 Model treatment group 10 20.39 ±1.23▲ 22.91 ±1.70#梔子低劑量組 gardenia-L 10 20.30 ±1.54▲ 12.98 ±1.67*#梔子中劑量組 gardenia-M 10 20.54 ±1.83▲ 12.19 ±1.63*#梔子高劑量組 gardenia-H 10 20.83 ±1.85▲ 10.88 ±1.25*#鹽酸二甲雙胍組 metformin hydrochloride group 10 21.90 ±6.13▲ 11.23 ±1.24*#

3.2 對 TC、TG、LDLC、HDLC 的影響

由表2的結(jié)果可見:與正常對照組相比，模型對照組組大鼠的TC、TG、LDL含量均顯著升高(P＜0.01)，HDL明顯下降(P ＜0.01);給藥后各組大鼠的TC、TG、LDL含量均降低，HDL含量升高，與模型對照組大鼠相比，有顯著性差異(P＜0.01);各給藥組間比較，差異無顯著性(P＞0.05)。

表2 梔子提取物對糖尿病大鼠血脂的影響(n=10，)Table 2 Effect of gardenia extract on blood lipids of diabetic rats(n=10，)

表2 梔子提取物對糖尿病大鼠血脂的影響(n=10，)Table 2 Effect of gardenia extract on blood lipids of diabetic rats(n=10，)

組別Group數(shù)量No.膽固醇cholesterol(mmol/L)甘油三酯triglycerides(mmol/L)高密度脂蛋白High density lipoprotein(mmol/L)低密度脂蛋白Low density lipoprotein(mmol/L)11 0.92 ±0.05 0.87 ±0.12模型組 Model treatment group 10 5.48 ±0.34▲ 2.26±0.25▲ 0.41±0.05▲ 2.04±1.58▲梔子低劑量組 gardenia-L 10 2.87±0.26▲＊ 1.67±0.21▲＊ 0.77±0.06▲＊ 1.62±0.14▲＊梔子中劑量組 gardenia-M 10 2.90±0.26▲＊ 1.67±0.18▲＊ 0.75±0.08▲＊ 1.65±0.08▲＊梔子高劑量組 gardenia-H 10 2.85±0.21▲＊ 1.67±0.18▲＊ 0.77±0.09▲＊ 1.62±0.06▲＊鹽酸二甲雙胍組 metformin hydrochloridegroup 10 2.80±0.31▲＊ 1.66±0.11▲＊ 0.71±0.10▲＊ 1.56±0.05正常組 Normal comparison group 10 1.71 ±0.09 0.89 ±0.▲＊

3.3 對Hcy的影響

由表3的結(jié)果可見:模型對照組大鼠的同型半胱氨酸顯著高于正常對照組大鼠(P＜0.05)，給藥后，各組的同型半胱氨酸降低，與模型對照組相比，有顯著性差異(P＜0.05)，但與正常對照組比較，仍有差異(P ＜0.05)。

表3 梔子提取物對糖尿病大鼠同型半胱氨酸的影響(n=10，)Table 3 Effect of gardenia extract on homocysteine of diabetic rats(n=10，)

表3 梔子提取物對糖尿病大鼠同型半胱氨酸的影響(n=10，)Table 3 Effect of gardenia extract on homocysteine of diabetic rats(n=10，)

組別Group數(shù)量No.同型半胱氨酸Homocysteine(μmol/L)正常組Normal comparison group 10 5.46 ±1.35模型組Model treatment group 10 10.25 ±1.28▲梔子低 劑量組gardenia-L 10 8.21±1.51▲＊梔子中劑量組 gardenia-M 10 8.26±1.81▲＊梔子高劑量組 gardenia-H 10 7.56±1.48▲＊鹽酸二甲雙胍組metformin hydrochloride group 10 7.35 ±1.21▲＊

4 討論

2型糖尿病動物模型的建立，是研究糖尿病發(fā)病機(jī)制及治療糖尿病的藥物篩選的基礎(chǔ)。高脂高糖飲食誘導(dǎo)結(jié)合STZ建立的2型糖尿病動物模型［7］，不僅縮短了造模時(shí)間，而且成功率高，方法簡單易行，是最接近人類2型糖尿病的模型。

近年來，國內(nèi)外很多學(xué)者在研究糖尿病與血脂代謝的關(guān)系時(shí)發(fā)現(xiàn)，大部分糖尿病病人伴有繼發(fā)性高脂血癥，因此動脈粥樣硬化的發(fā)病率較高。又有研究表明，同型半胱氨酸是心血管疾病發(fā)病的一個獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，梔子提取物各治療組均能降低由鏈脲佐菌素導(dǎo)致的糖尿病大鼠的血糖水平，還能降低LDLC及升高HDLC，調(diào)節(jié)大鼠的血脂，并且降低糖尿病大鼠同型半胱氨酸水平，對預(yù)防和治療糖尿病和糖尿病并發(fā)癥有一定的作用。

糖尿病是目前尚無根治方法的一種慢性代謝性疾病，需長期甚至終身用藥。化學(xué)藥物在治療糖尿病及并發(fā)癥方面雖效果明顯，但長期服用可能會損害肝腎，引起過敏，腹脹、惡心嘔吐、乳酸性酸中毒等不良反應(yīng)。梔子作為國家衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源食品之一，既是藥物，又是食物，長期服用無毒副作用。綜上所述，本次實(shí)驗(yàn)為以后開發(fā)研制藥食同源的輔助降血糖、降血脂及治療和預(yù)防并發(fā)癥的保健食品提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 Jiang P(姜斐)，Shi H(士輝).Traditional Chinese medicine in the treatment of diabetes overview.Chin Wild Plant Res(中國植物野生資源)，2009，28(5):1-5.

2 Kimura Y，Okuda H，Arichi S.Effect of geniposide isolated from Gardenia jasminoides on Metabolil Allerations in high sugar diet-fed rats.Chem Pharm Bull，1982，30:4444-4447.

3 Miura T，Nishiyama Y，Ichimaru M，et al.Hypoglycemic activity and structure-activity relationship of iridoidal glycosides.Biol pharm Bull，1996，19:160-161.

4 Yang JJ(楊金晶)，Yang QP(楊秋萍).The study of the Streptozotocin induced diabetes animal model.J Kunming Med Univ(昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào))，2008，29(2B):164.

5 Sun GJ(孫桂菊)，Wang SK(王少康)，Zhang XQ(張小強(qiáng))，et al.Type II diabetic rat model and the complications of diabetes elated indicators.Shanghai Lab Animal Sci(上海實(shí)驗(yàn)動物科學(xué))，2003，23(2):79.

6 Wang BW(王保偉)，Li Y(李穎)，Liu XH(劉曉紅)，et al.High fat feeding time and STZ doses in experimental type 2 diabetic rat model of influence.Health Res(衛(wèi)生研究)，2011，40:100-106.

7 Shi H(施紅)，Jin GQ(金國琴)，Yu WZ(余文珍).Induction of constructing the best similar to human type 2 diabetes rat model method.Chin J Clin Rehab(中國臨床康復(fù))，2005，9(39):69-71.