金華市RhD陰性獻血者Rh血型表型庫的建立及應(yīng)用

蔡雋(金華市中心血站，浙江金華 321000)

Rh血型系統(tǒng)是最具多態(tài)性的紅細(xì)胞血型系統(tǒng)，在我國漢族人群中RhD陰性血型所占比例僅為0.2% ～0.5%，屬于稀有血型，了解本地區(qū)Rh血型表現(xiàn)型分布情況，掌握分布規(guī)律，建立完善稀有血型數(shù)據(jù)庫，有利于為臨床及時提供合適的RhD陰性血液，我們調(diào)查了近2年來所做的RhD陰性血樣239份，對其Rh血型抗原表型進行分型，建立RhD陰性血型檔案，從而為保證臨床應(yīng)急供應(yīng)稀有血型提供參考價值，同時也對獻血者的科學(xué)管理提供了依據(jù)，現(xiàn)將調(diào)查報道如下。

1 材料與方法

1.1 對象 對2011年1月～2012年11月，金華市50 480名經(jīng)體檢合格后參加獻血的自愿無償獻血者，年齡:18～55歲，標(biāo)本采用EDTA-K2抗凝，5 mL/份。50 480名無償獻血者中，共篩選確認(rèn)RhD陰性為239名。

1.2 檢測試劑 抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清(長春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司、上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司);ABO試劑紅細(xì)胞由金華市中心血站自制;IgM抗D、IgG抗D、多特異性抗球蛋白(抗 IgG+C3d)、抗-C、抗-c、抗-E、、抗-e及篩選紅細(xì)胞均為上海血液生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)，且均在有效期內(nèi)使用。

1.3 儀器 瑞士TECAN RSP 150全自動加樣器、北京雷勃爾久離心機、TECAN酶標(biāo)儀。

1.4 方法 采用全自動微板法檢測ABO血型及RhD血型，RhD陰性確認(rèn)分別用3個不同批號的單克隆抗血清進行抗人球蛋白試驗，以排除Du型，篩查出RhD陰性標(biāo)本采用試管法進行Rh血型抗原表型進行分型，所有實驗均設(shè)有陰、陽性對照。

1.5 RhD陰性血型表型庫建立 采用BIS2.0計算機管理軟件，錄入239名RhD陰性供血者的個人資料及ABO血型、RhD陰性表型、不規(guī)則抗體等結(jié)果，建立RhD陰性供血者信息庫。當(dāng)臨床需要RhD陰性血液，可以通過機算機及時檢索查找到相配合的血液，并將有關(guān)資料提供給相關(guān)科室，及時滿足臨床用血的需要。

2 結(jié)果(表1，2)

表1 RhD陰性與RhD陽性獻血者在ABO血型中的分布

表2 239名RhD陰性獻血者Rh血型抗原表型分布

3 討論

本次調(diào)查顯示，在金華地區(qū)RhD陰性血型占0.47%，符合中國人RhD陰性0.2% ～0.5%的分布特點［1］，與本省寧波地區(qū)報道的0.53%、溫州地區(qū)報道的0.43%［2，3］漢族獻血者RhD陰性群體分布相符。從表1結(jié)果顯示:RhD陰性與RhD陽性血型人群在AB0血型中分布基本吻合，表明RhD陰性表型在ABO血型中呈均勻分布，兩個血型系統(tǒng)不具備相關(guān)性，在遺傳上相互獨立。本文統(tǒng)計的RhD陰性血液在AB0血型中分布為 A∶B∶O∶AB 為3.0∶2.4∶3.8∶0.7，可指導(dǎo)血站和各臨床醫(yī)院充分了解不同血型血液用量的比例，提示各型血液的庫存比例是否在適合的范圍之內(nèi)。

Rh血型系統(tǒng)是最復(fù)雜的遺傳多態(tài)性紅細(xì)胞血型系統(tǒng)之一，其臨床意義僅次于ABO血型系統(tǒng)，Rh系統(tǒng)內(nèi)由45個抗原組成［4］，與臨床密切相關(guān)的主要是 D、E、C、c、e，以 D 抗原性最強，RhD陰性患者輸注了RhD陽性血液后，大多數(shù)人可以產(chǎn)生免疫性RhD抗體，當(dāng)再次輸注RhD陽性血液后，多出現(xiàn)嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)，所以目前臨床工作中把RhD列為輸血前常規(guī)檢查項目。然而近年來，即使是RhD配合相符，由C、c、E、e抗原配合不符引起的配血困難或輸血反應(yīng)的報道越來越多，抗Rh通常由于輸血及妊娠等免疫作用產(chǎn)生，當(dāng)再次輸入不相合血液時，輕者發(fā)生遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)，重者可引起嚴(yán)重的輸血反應(yīng)，甚至死亡，對于長期需要輸血維持和治療的RhD陰性患者，輸血時不僅僅滿足配血要求，還需要考慮Rh表型因素，盡量輸入Rh表型相同的血液，以減少輸血反應(yīng)的發(fā)生。RhD陰性血型的患者本來存在供血較為困難的情況，如有Rh血型系統(tǒng)抗體的存在，會使供血更為困難，所以Rh血型系統(tǒng)配合輸注越來越受到臨床的重視。本組調(diào)查中在金華地區(qū)RhD陰性獻血者中共檢出6種表型，以ccdee 為主，由高到低依次為 dccee、dCcee、dCCee、dccEe、dC-cEe、dccEE，未檢出 dCCEe及dCcEE。經(jīng)從表2可以看出，RhD陰性Rh血型表型頻率特點為dccee(50.62%)＞dCcee(32.21%)＞dCCee(8.78%)＞dccEe(5.02%)＞dCcEe(2.51%)＞dccE(0.84%)，這反映出金華地區(qū)Rh血型系統(tǒng)中各表型所占的比例特點，可以指導(dǎo)稀有血型庫的庫存比例，保證患者同型輸注，滿足臨床需要。近年來我站通過建立稀有血型QQ群，實現(xiàn)RhD陰性者互助獻血，通過RhD陰性獻血者進行Rh表型抗原譜查，建立實用型稀有血型庫指導(dǎo)血型庫中各型血液的庫存比例，并采用深低溫(-80℃)冰凍保存RhD陰性血液技術(shù)，血液保存期延長至10年，使RhD陰性血液得以調(diào)劑使用，通過以上措施，從金華市供血狀況來看，日常RhD陰性紅細(xì)胞的供應(yīng)能夠滿足臨床需求。綜上所述，掌握金華市無償獻血者RhD陰性抗原表型分布規(guī)律，完善稀有血型數(shù)據(jù)庫，推廣應(yīng)用紅細(xì)胞甘油凍存技術(shù)，建立稀有血型血液品種儲備庫，對稀有血型患者的緊急用血及降低免疫性輸血反應(yīng)具有非常重要的作用。

［1］ 趙桐茂.人類血型遺傳學(xué).北京:科學(xué)出版社，1987:103-109.

［2］ 鄔麗芳，張奕琴.寧波地區(qū)無償獻血者ABO、RH血型分布調(diào)查.現(xiàn)代實用醫(yī)學(xué)，2012，24(6):696-697.

［3］ 林碧，陳筱華，陳榮倉，等.溫州市無償獻血者ABO、Rh血型分布特征的調(diào)查分析.浙江醫(yī)學(xué)，2008，30(5):518-520.

［4］ 劉達(dá)莊.免疫血液學(xué).上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2002:58-68.