頭孢克肟殘留溶劑的測定

王喜軍

【摘 要】建立一種氣相色譜法同時測定頭孢克肟中甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷的殘留量。方法：本法采用外標(biāo)法，在6%氰丙基苯基94%二甲基聚硅氧烷為固定相的毛細(xì)管柱上進(jìn)行組分分離，效果良好。載氣為氮氣；檢測器為FID；進(jìn)樣口溫度250℃；柱溫60℃；檢測器溫度300℃；結(jié)果：甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷的回收率分別為97.51%、97.44%、94.46%、94.10%，對照品在0.6到1.6倍濃度范圍內(nèi)濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系，甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷重復(fù)性的RSD分別為1.58%、2.00%、1.67%、4.50%，甲醇定量限為3.60μg/ml，檢測限為1.20μg/ml，丙酮定量限為0.61μg/ml，檢測限為0.20μg/ml，乙腈定量限為1.39μg/ml，檢測限為0.42μg/ml，二氯甲烷定量限為0.32μg/ml，檢測限為0.09μg/ml。結(jié)論：該方法能同時檢出甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷四種殘留溶劑，重現(xiàn)性好，精度高。

【關(guān)鍵詞】頭孢克肟 外標(biāo)法 甲醇 丙酮 乙腈 二氯甲烷

【中圖分類號】R927 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1672-5158（2013）03-0371-01

頭孢克肟，英文名Cefixime，中文別名氨噻肟烯頭孢菌素、世伏素細(xì)粒，是廣譜第三代頭孢抗菌素。大多數(shù)革蘭氏陰性（G-）需氧菌對CFX敏感，而產(chǎn)酶和不產(chǎn)酶的金葡菌、表皮萄葡球菌則不敏感。而頭孢克肟則對β內(nèi)酰胺酶高度穩(wěn)定，與青霉素結(jié)合蛋白3、1a和1b有高度親和力，使細(xì)菌細(xì)胞壁合成受阻，細(xì)菌迅速溶解、死亡。另外，頭孢克肟對腸道球菌及擬桿菌屬作用很弱，對假單孢菌屬如綠膿桿菌基本無效。將頭孢克肟與頭孢氨芐頭孢克羅以及奧格門汀等口服抗生素的抗菌作用進(jìn)行了比較，頭孢克肟對大腸桿菌、肺炎桿菌和傷寒桿菌的作用比頭孢氨芐和奧格門汀強8～10倍。頭孢克肟對各種細(xì)菌產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶高度耐受，因而對粘膜炎布蘭漢氏球菌及流感嗜血桿菌相當(dāng)敏感。頭孢克肟（cefixime）在其C7位上結(jié)合有苯甘氨酸類的基團，從而具備可口服吸收的結(jié)構(gòu)，治療下呼吸道感染有較高的療效，因此開發(fā)頭孢克肟新劑型、新工藝具有很好的前景。固體分散技術(shù)主要是通過微粉化、固體分散體和粉狀溶液或溶劑沉積等技術(shù)達(dá)到高度分散，從而提高藥物制劑生物利用度。頭孢克肟適用于支氣管炎、肺炎、腎盂腎炎、膀胱炎、尿道炎、膽囊炎、膽管炎、猩紅熱、中耳炎、鼻竇炎的治療。

1.目的：

通過氣相色譜法（中國藥典2010年版二部附錄Ⅷ P）檢測頭孢克肟中甲醇、丙酮、乙腈與二氯甲烷的殘留量。

儀器：Agilent 7890。色譜柱：6%氰丙基苯基94%二甲基聚硅氧烷為固定相的毛細(xì)管柱為色譜柱。檢測器：氫火焰離子化檢測器（FID）柱溫：60oC進(jìn)樣口溫度：250oC；檢測器溫度：300oC；頂空瓶平衡溫度：80oC；平衡時間：30分鐘。

供試品溶液： 取頭孢克肟約0.1g，精密稱定，置頂空瓶中，加入pH7.0磷酸鹽緩沖溶液4ml使溶解，再加入水1ml，搖勻，密封瓶口，作為供試品溶液。

對照品溶液：分別稱取丙酮、乙腈、二氯甲烷、甲醇適量，加水制成每1ml中含丙酮500μg，乙腈41μg，二氯甲烷60μg，甲醇300μg的對照品儲備液，精密量取pH7.0磷酸鹽緩沖溶液4ml置頂空瓶中，再精密加入1ml對照品儲備液，搖勻，密封瓶口，作為對照品溶液。

系統(tǒng)適用性：取對照品溶液頂空進(jìn)樣，記錄色譜圖，出峰順序依次為：甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷與二氧六環(huán)（內(nèi)標(biāo)），各色譜峰間的分離度均應(yīng)符合要求。

分析步驟：取供試品溶液和對照品溶液分別頂空進(jìn)樣，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積進(jìn)行計算頭孢克肟中各溶劑的殘留量，甲醇不得過0.3%、丙酮不得過0.5%、已經(jīng)不得過0.041%、二氯甲烷不得過0.06%。

2.重復(fù)性試驗

取對照品溶液按測定法測定，分別連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不得超過5.0%，結(jié)果RSD 為4.50%，表明本方法重復(fù)性較好。

3.線性試驗

分別精密配制含甲醇3mg/ml，丙酮5mg/ml，乙腈410μg/ml，二氯甲烷600μg/ml的對照品溶液作為儲備液，于儲備液中分別精密量取0.6ml，0.8ml，1.0ml，1.2ml，1.4ml和1.6ml置10ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。精密量取pH7.0磷酸鹽緩沖溶液4ml置20ml頂空瓶中，再分別精密加入上述各濃度對照品儲備液1ml，混勻，密封。按測定法分別進(jìn)行測定，記錄色譜圖。以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，結(jié)果甲醇回歸方程Y=7.4429+644.05X（r=0.999），丙酮回歸方程Y=8.0695+6095.4X（r=0.999），乙腈回歸方程Y=3641.1X-7.4095（r=0.999），二氯甲烷回歸方程Y=10182X+19.879（r=0.999）。試驗結(jié)果證明甲醇，丙酮，乙腈，二氯甲烷在0.6到1.6倍濃度范圍內(nèi)濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

4.異丙醇的回收率試驗

精密配制含甲醇3mg/ml，丙酮5mg/ml，乙腈410μg/ml，二氯甲烷600μg/ml的混合溶液，于儲備液中量取0.8ml，1.0ml，1.2ml置于10ml量瓶中，用水稀釋至刻度，作為對照品儲備液。精密稱取頭孢克肟0.1g 9份，分別置9個20ml頂空瓶中，每個瓶中精密加入pH7.0磷酸鹽緩沖溶液4ml，溶解，并從3瓶對照品儲備液中各精密量取1ml溶液3份加入到9個頂空瓶中，混勻，密封，按測定法分別進(jìn)行測定。同時取3個濃度對照品溶液和供試品溶液按測定法測定，記錄色譜圖，計算理論含量、測得含量及回收率，甲醇、丙酮、乙腈、二氯甲烷的回收率分別為97.51%、97.44%、94.46%、94.10%，回收率良好。

5.定量限

精密配制不同濃度的甲醇、丙酮、乙腈和二氯甲烷對照品溶液，按測定法分別進(jìn)行測定，記錄峰高為10倍基線噪音時被測物的量，以此作為定量限，結(jié)果見表99. 記錄峰高為3倍基線噪音時被測物的量，以此作為檢測限，測定結(jié)果是甲醇定量限為3.60μg/ml，檢測限為1.20μg/ml，丙酮定量限為0.61μg/ml，檢測限為0.20μg/ml，乙腈定量限為1.39μg/ml，檢測限為0.42μg/ml，二氯甲烷定量限為0.32μg/ml，檢測限為0.09μg/ml。

6. 結(jié)論：

新建立的方法分離速度快，操作簡便，靈敏度高，能精確檢測頭孢克肟中的甲醇、丙酮、乙腈和二氯甲烷四種殘留溶劑。

參考文獻(xiàn)：

2010年版中國藥典