恩替卡韋口腔崩解片的制備及質(zhì)量研究*

陸 軍，黃晶晶，鄭 緋，徐 偉

(1.南京優(yōu)科生物醫(yī)藥有限公司，南京 210009； 2.江蘇省中國科學(xué)院植物研究所，南京 210014 ； 3.南京工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院，南京 211816； 4.中國人民解放軍第302醫(yī)院，北京 100039； 5.福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，福州 350003)

恩替卡韋(entecavir) 能夠高效抑制乙肝病毒復(fù)制,抗乙肝病毒活性比其他核苷類藥物強(qiáng)300倍以上,能非常顯著地降低乙肝病毒DNA水平，在組織學(xué)、病毒學(xué)、生化學(xué)等各項(xiàng)指標(biāo)的改善上較拉米夫定等核苷類似物有明顯優(yōu)勢(shì)。恩替卡韋可以憑著對(duì)乙肝病毒的高效抑制能力,將成為抗病毒藥物中的新的一線用藥[1]。近些年,口腔崩解片 (口崩片,orally disintegrating tablet)是一種新型口服固體制劑，在臨床上有很多的應(yīng)用,其優(yōu)點(diǎn)為不需要飲水服用,在口腔中可快速崩解[2]。將恩替卡韋制成口崩片,能解決吞咽困難的老年人和小孩吃藥問題。采用直壓法,效應(yīng)面圖和等高線圖優(yōu)化處方,生產(chǎn)恩替卡韋口腔崩解片,并對(duì)其口腔崩解時(shí)間、體外溶出度進(jìn)行了研究。

1 儀器與材料

DP30A單沖壓片機(jī)(北京國藥龍立科技有限公司)，ZS-2E振實(shí)儀(天津天大天發(fā)科技有限公司)，YD-2片劑硬度儀(天津市鑫洲科技有限公司)，TT-2000AE脆碎度檢測(cè)儀(天津天大天發(fā)科技有限公司)，ZB-2E智能崩解儀(天津天大天發(fā)科技有限公司)，ZRS-8G智能溶出試驗(yàn)儀(天津天大天發(fā)科技有限公司) , 粒度檢測(cè)儀(英國馬爾文公司)，電子天平(梅特勒-托利多)，LC-2010AT高效液相色譜儀(島津),KQ5200E超聲波清洗器儀(昆山市超聲儀器有限公司)，秒表(上海秒表廠)。恩替卡韋原料、對(duì)照品(江蘇省藥物研究所)，甘露醇( man,江蘇正大豐海制藥有限公司)，微晶纖維素(MCC PH101,安徽山河藥用輔料股份有限公司)， 交聯(lián)羧甲基纖維素鈉(Ac-Di-Sol美國 FMC公司)，蘋果香精(泰興市三華食品添加劑廠)，硬脂酸鎂(上海藥用輔料廠)。

2 方法

2.1恩替卡韋口腔崩解片的制備 取處方量的恩替卡韋、微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、甘露醇、蘋果香精、硬脂酸鎂,先將恩替卡韋、微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉過60目篩混合，用等量遞加法，Φ8 mm沖頭壓片,即得。

2.2崩解時(shí)間測(cè)定 依照文獻(xiàn)方法[2，3]自制了相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)裝置(見圖1)。連續(xù)測(cè)定6片均應(yīng)符合規(guī)定。

圖1 自制口腔崩解片崩解實(shí)驗(yàn)裝置

2.3口腔崩解片溶出度考察

2.3.1檢測(cè)波長的選擇 稱取處方量的恩替卡韋原料藥和輔料,放在50 ml量瓶中,用甲醇溶解，定容后用0.45 μm微孔濾膜過濾,在200～400 nm波長范圍掃描。結(jié)果表明, 恩替卡韋原料在254 nm處有最大吸光度,在此處輔料無吸收。故254 nm定為檢測(cè)波長。

2.3.2體外溶出度 精密稱取恩替卡韋對(duì)照品10.69 mg，置100 ml量瓶中，加溶出介質(zhì)超聲溶解并稀釋至刻度，精密移取1.0 ml，置100 ml量瓶中，加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，作為貯備液。分別精密量取1、3、5、7、9 ml置10 ml量瓶中，加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，照高效液相色譜法(《中國藥典》2010版二部附錄Ⅴ D)測(cè)定。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以水-乙腈(92∶8)為流動(dòng)相，流速為1.0 ml/min，檢測(cè)波長為254 nm，并以進(jìn)樣濃度(C)為橫坐標(biāo)，恩替卡韋的峰面積(A)為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸,得回歸方程為：A=2.9313×103+9.3159×105C(r=0.9999)，線性范圍：0.1006～0.9005 μg/ml。照溶出度測(cè)定法(《中國藥典》2010年版二部附錄X C第二法)，以0.05 mol/L 磷酸二氫鉀溶液(用1 mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為6.8)1000 ml為溶出介質(zhì)，溫度為(37±0.5) ℃，轉(zhuǎn)速為50 r/min，依法操作，分別在2、4、6、8、10、15、20、30和45 min時(shí)，依照文獻(xiàn)方法[2]繪制溶出曲線，口腔崩解片比普通片釋藥快速。見圖2。

2.3.3含量均勻度 取恩替卡韋口崩片10片,分別置50 ml量瓶中, 加入約80%的稀釋劑[0.01 mol/L鹽酸溶液：0.1 mol/L鹽酸稀釋10倍或濃鹽酸(約12 mol/L)用純水稀釋(2.5→3000)], 超聲30 min使溶解，放置室溫，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，取溶液適量，在3000 r/min條件下離心10 min，取上清液，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。另取恩替卡韋對(duì)照品適量，精密稱定，用稀釋劑配制約10 μg/ml的溶液作為對(duì)照品溶液，照高效液相色譜法(《中國藥典》2010版二部附錄Ⅴ D)測(cè)定。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以水-乙腈-三氟乙酯(990∶10∶1)為流動(dòng)相A，以水-乙腈-三氟乙酯(700∶300∶1)為流動(dòng)相B，按表1進(jìn)行線性梯度洗脫，流速為1.0 ml/min，檢測(cè)波長為254 nm，柱溫為30 ℃。計(jì)算方法參考文獻(xiàn)[2],三批A+1.80S值分別為5.87、6.43和5.15，均符合《中國藥典》規(guī)定。

圖2 恩替卡韋口崩片與普通片的溶出比較 (n=6)

時(shí)間(min)流動(dòng)相組成A(%)B(%)0．01～3．510003．5～21100～690～3121～2469～5131～4924～2751～049～10027～280～100100～028～351000

2.4處方篩選與優(yōu)化 依據(jù)文獻(xiàn)方法[2],考察處方中MCC和Man的重量比、片劑的硬度、孔隙大小和交聯(lián)羧甲基纖維素鈉的用量,實(shí)驗(yàn)中對(duì)上述因素進(jìn)行刪選以判定最好處方和工藝。

2.4.1輔料對(duì)處方的流動(dòng)性影響考察 方法見參考文獻(xiàn)[2],結(jié)果見表2。

2.4.2崩解劑用量的選擇 方法見參考文獻(xiàn)[2],結(jié)果見圖3。Ac-Di-Sol的最佳質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%，所以選擇處方中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%。

表2 粉末流動(dòng)性影響考察

圖3 AcDiSol的使用量對(duì)崩解時(shí)間的影響(n=6)

2.4.3處方優(yōu)化 方法見相關(guān)文獻(xiàn)[2]，分別作三維效應(yīng)面圖(圖4)和等高線圖(圖5),考察孔隙大小和微晶纖維素/甘露醇值對(duì)口腔崩解時(shí)間的影響，處方優(yōu)化見表3。結(jié)果顯示，微晶纖維素/甘露醇值在0.70～0.90 (即處方M3、M4、M5)且孔隙大小在0.18～0.28內(nèi),均能使崩解時(shí)間取得理想效果(小于30 s)。

圖4 口崩片崩解時(shí)間的三維效應(yīng)面圖(n=30)

表3 口腔崩解片處方 mg/片

2.4.4硬度范圍的選擇 方法見文獻(xiàn)[2]，結(jié)果見圖6。由圖6可知,硬度對(duì)孔隙大小的影響很大。各處方片劑的孔隙均隨硬度的增大而減小,考察3個(gè)處方,硬度可選定為0.3～0.6 MPa。參考處方選擇和硬度選擇,采用M4處方進(jìn)行優(yōu)化,壓片硬度定為0.4 MPa。

硬度/MPa

硬度/MPa

2.5確定處方工藝 經(jīng)處方篩選及優(yōu)化，可確定最好處方： 恩替卡韋 0.5 mg、微晶纖維素PH 101 77 mg,甘露醇97 mg、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉 20 mg、蘋果香精 5 mg、硬脂酸鎂0.5 mg,按照“2.1”項(xiàng)下方法生產(chǎn)。取處方量500倍的恩替卡韋、微晶纖維素PH 101、甘露醇、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、蘋果香精、硬脂酸鎂依照“2.1”項(xiàng)下方法制備,并依法測(cè)定含量、崩解時(shí)間、溶出度,結(jié)果含量為97.4%，崩解時(shí)間為27.4 s，溶出度為98.6%，均符合規(guī)定,說明本處方和工藝是可行的。

3 討論

3.1輔料的選擇 由于微晶纖維素具有可壓性的優(yōu)點(diǎn),在片劑生產(chǎn)過程中具有預(yù)防裂片的優(yōu)點(diǎn)[2，4],恩替卡韋味微苦,加入香精可以改善。

3.2崩解劑用量的選擇[2]由于交聯(lián)羧甲基纖維素鈉作為高效崩解劑，有非常強(qiáng)的吸水，因此在一定的質(zhì)量分?jǐn)?shù)內(nèi),隨濃度增加崩解時(shí)間是逐漸減小的;又因?yàn)榻宦?lián)羧甲基纖維素鈉中含有水溶性成分,超過一定的質(zhì)量分?jǐn)?shù)會(huì)阻止了水分的滲透,使崩解時(shí)限增加。

3.3微晶纖維素/甘露醇值、孔隙大小對(duì)崩解的影響[2]微晶纖維素/甘露醇值一定時(shí),崩解時(shí)間隨孔隙率的增大而減小?？紫堵室欢〞r(shí)，在微晶纖維素/甘露醇值小于0.9時(shí),崩解時(shí)間隨微晶纖維素/甘露醇值增大而減小;在微晶纖維素/甘露醇值大于0.9時(shí),隨微晶纖維素/甘露醇值減小反而使崩解時(shí)間增大。

1 李霖，李玉珍. 抗乙肝病毒新藥——恩替卡韋[J]. 新藥與臨床, 2006,4(4)：56

2 陸軍，黃晶晶.鹽酸托烷司瓊口腔崩解片的制備[J].華西藥學(xué)雜志，2010，25(6)：669

3 周定君, 徐秀卉, 陸振宇. 多潘立酮口腔崩解片崩解時(shí)限檢查方法探討[J]. 藥學(xué)進(jìn)展, 2006, 30(8): 371

4 SUGIMOR I K,MOR I S, KAWASH IMA Y. The roleofbinders in the prevention of capping within a tablet[J]. Chem Pharm Bull,1989,37(4):1064