破格救心湯對(duì)離體蟾蜍心臟功能的影響

李旭偉 姜黛雪 王 歡 王嘉聆 周 偉 應(yīng) 淞 王飛鴻

川北醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院機(jī)能實(shí)驗(yàn)中心，四川 南充 637000

破格救心湯為山西省中醫(yī)名家李可老先生經(jīng)40年臨證實(shí)踐創(chuàng)制，本方重用附子破陰回陽(yáng);人參大補(bǔ)元?dú)?，滋陰和?yáng)，益氣生津;干姜通心助陽(yáng)，輔助附子回陽(yáng)救逆之功，減低附子毒性;大量甘草既能解附子之毒，蜜炙后又具扶正作用;山茱萸肉能收斂元?dú)猓虜z滑脫，兼具條暢之性;龍骨、牡蠣二藥有固腎攝精，收斂元?dú)庵?活磁石吸納上下，維系陰陽(yáng);麝香為急救醒神要藥，組方嚴(yán)謹(jǐn)，諸藥合用，主要用于難治性心力衰竭的治療，具有回陽(yáng)救逆、扶正固脫、活血化瘀、開(kāi)竅醒神之功［1］。本試驗(yàn)通過(guò)觀(guān)察破格救心湯對(duì)離體蟾蜍心臟功能的影響，旨在提示其對(duì)心臟作用規(guī)律，為臨床應(yīng)用和新藥開(kāi)發(fā)提供試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 選用體重 (170±10)g中華大蟾蜍8只，雌雄兼用，由川北醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2 儀器 聯(lián)想啟天M7370電子計(jì)算機(jī);BL－420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng) (四川成都泰盟科技有限公司);JH－2型張力傳感器(北京航空醫(yī)學(xué)研究所);電子天平 (上海力能電子儀器公司)。

1.3 藥材與試劑 任氏液:每1000ml中含NaC1 6.5g、KC1 0.14g、NaH2PO40.01g、CaCl20.12g、NaHC030.20g、葡萄糖2.0g，所用試劑均為化學(xué)純，購(gòu)自成都科龍化工試劑廠(chǎng);破格救心湯:熟附子60g，干姜60g，炙甘草60g，高麗參30g，山茱萸肉60g，生龍骨30g，生杜蠣粉30g，活磁石粉30g，麝香0.5g。購(gòu)于川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，將上述藥材置于砂鍋中，加2000ml任氏液文火煮取兩小時(shí)濃縮、過(guò)濾、定容至500ml(相當(dāng)于0.12g.ml－1附子生藥)，取50ml湯劑以任氏液分別稀釋至0.015 g·ml－1，0.0075 g·ml－1，0.00375 g·ml－1，0.0019 g·ml－1，0.001 g·ml－1，備用。

1.4 離體蛙心標(biāo)本的制備 采用斯氏法，取蟾蜍1只，破壞腦和脊髓，以四肢軟軟為度，仰臥固定于蛙板上，粗剪刀剪開(kāi)腹胸部皮膚和肌肉，剪除胸骨，充分暴露心臟，蛙心直接結(jié)扎右主動(dòng)脈，在主動(dòng)脈干下穿一根線(xiàn)，打一松節(jié)作為備用，在左主動(dòng)脈干遠(yuǎn)端穿線(xiàn)并結(jié)扎線(xiàn)扣。心臟插管:持眼科剪在左主動(dòng)脈根部剪一“V”字形切口，左手將結(jié)扎線(xiàn)提起，右手將盛有任氏液的蛙心插管沿血管方向由切口插入，當(dāng)插管頭剛到動(dòng)脈圓錐時(shí)，向右轉(zhuǎn)動(dòng)45℃左右至心室中央，并輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)插管，左手松開(kāi)結(jié)扎線(xiàn)將心臟固定，用食指輕輕抬起心臟，用右手將插管緩慢向前推進(jìn)。待心室收縮主動(dòng)脈瓣打開(kāi)時(shí)插入心室，此時(shí)可見(jiàn)插管內(nèi)液面上下浮動(dòng) (插管成功)，立即將備用線(xiàn)結(jié)扎在插管上并套在插管的側(cè)鉤上固定，剪斷各血管使心臟離體，用新鮮任氏液沖洗插管3～5次，并保持蛙心套管內(nèi)液面高度的恒定 (約2cm)［2］。

1.5 觀(guān)察指標(biāo) 采用BL－420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)檢測(cè)蛙心收縮力峰峰值及心率，記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。先在蛙心套管內(nèi)加入2ml任氏液，觀(guān)察離體蛙心在正常情況下的自主收縮5min，記錄曲線(xiàn)以此作為對(duì)照，依次加入不同濃度藥液2ml，觀(guān)察并記錄每次加藥及沖洗后蛙心收縮力峰峰值及搏動(dòng)頻率變化。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件，數(shù)據(jù)以 (±s)表示，組間比較用配對(duì)t檢驗(yàn)。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

破格救心湯在高濃度0.015 g·ml－1時(shí)抑制心收縮力明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05);而在低濃度0.0075 g· ml－1，0.00375 g·ml－1，0.0019 g·ml－1，0.001 g·ml－1時(shí)增強(qiáng)收縮力作用明顯 (P＜0.05)，以0.00375 g·ml－1最為顯著 (P＜0.01);在低濃度0.0075 g·ml－1，0.00375 g ·ml－1時(shí)，對(duì)心自律性正性影響較大，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其他濃度差異未達(dá)統(tǒng)計(jì)意義，見(jiàn)表1。

表1 破格救心湯對(duì)離體蟾蜍心臟心率及收縮力的影響 (±s)

表1 破格救心湯對(duì)離體蟾蜍心臟心率及收縮力的影響 (±s)

*P＜0.05，＊＊p＜0.01;n=8。

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3 討論

破格救心湯中重用君藥附子，以達(dá)回陽(yáng)救逆、助陽(yáng)行水之功。歷代醫(yī)家對(duì)附子的運(yùn)用總結(jié)了豐富經(jīng)驗(yàn)，《神農(nóng)本草經(jīng)》、《傷寒論》、《傷寒六書(shū)》、《魏氏家藏方》、《本草匯言》對(duì)附子臨床應(yīng)用均有記載，李可名老中醫(yī)經(jīng)四十年實(shí)踐創(chuàng)制破格救心湯亦重用制附子破陰回陽(yáng)。

附子臨床實(shí)踐時(shí)應(yīng)在辨證論治的基礎(chǔ)上，準(zhǔn)確把握影響附子毒性的諸多因素，控制煎煮時(shí)間、劑量、炮制方法、適應(yīng)病癥、配伍應(yīng)用、服用方法等因素，才能安全有效地運(yùn)用附子。附子主要含次烏頭堿、烏頭堿、新烏頭堿、川烏堿甲、川烏堿乙等多種生物堿，其主要毒性成分為烏頭堿，烏頭堿對(duì)神經(jīng)和心臟都有損害［3］。附子入湯劑宜先煎，久煎30～60min，烏頭堿經(jīng)加熱水解后變?yōu)槎拘暂^小的苯甲酰烏頭胺，再繼續(xù)水解則生成烏頭原堿，有研究證實(shí)，烏頭堿水解產(chǎn)物烏頭原堿的毒性?xún)H為原生物堿的1/2000～1/ 4000［4］?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》(2005版)規(guī)定附子的用量為3～15 g，若因治療需要可用至15～30g，而破格救心湯用量達(dá)30～200～300g，本研究表明附子以15g單劑一次服用為最佳(4200ml血液計(jì))。

附子強(qiáng)心作用與去甲烏藥堿、去甲豬毛菜堿、氯化甲基多巴胺、尿嘧啶有密切關(guān)系［5］。其中以去甲烏藥堿活性最強(qiáng)，將其稀釋至10－9濃度，仍然體現(xiàn)強(qiáng)心作用，強(qiáng)心的主要機(jī)理是興奮和激動(dòng)β受體，小鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明去甲烏藥堿對(duì)β受體有上調(diào)作用［6－7］。

破格救心湯始創(chuàng)于60年代初期，經(jīng)40年臨證實(shí)踐，逐漸定型。本方脫胎于《傷寒論》四逆湯類(lèi)方，四逆湯合參附龍牡救逆湯及張錫純氏來(lái)復(fù)湯，破格重用附子、山萸肉加麝香而成。方中四逆湯為中醫(yī)強(qiáng)心主劑，臨床應(yīng)用1700余年，救治心衰療效卓著。心衰病人病情錯(cuò)綜復(fù)雜，不但陽(yáng)氣衰微，而且陰液內(nèi)竭，故加人參，成為四逆加人參湯，大補(bǔ)元?dú)?，滋陰和?yáng)，益氣生津，使本方更臻完善。歷代用傷寒方，劑量過(guò)輕，主藥附子，僅10g左右。之所以不敢重用附子，乃因畏懼附子之毒性。古今本草，已有定論，附子有大毒。但附子為強(qiáng)心主將，其毒性正是其起死回生藥效之所在。當(dāng)心衰垂危，病人全身功能衰竭，五臟六腑表里三焦，已被重重陰寒所困，生死存亡，系于一發(fā)之際，陽(yáng)回則生，陽(yáng)去則死。非破格重用附子純陽(yáng)之品，大辛大熱之性，雷霆萬(wàn)均之力，不能斬關(guān)奪門(mén)，破陰回陽(yáng)，挽救垂絕之生命［8］。

［1］陳南官，周智文，李建漢.不同附子劑量破格救心湯治療難治性心衰的臨床研究［J］.中國(guó)中醫(yī)急癥，2012，21(1):8－9.

［2］林平，攀慧，蘇付榮.離體蛙心灌流實(shí)驗(yàn)方法的比較研究［J］.中國(guó)病理生理雜志，2005，21(7):1455－1456.

［3］黎明.中國(guó)醫(yī)藥指南雜志.附子的毒性與臨床應(yīng)用［J］.2011，9 (14):116－117.

［4］杜貴友，方文賢.有毒中藥現(xiàn)代研究與合理應(yīng)用［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2003:561－561.

［5］考玉萍，劉滿(mǎn)軍，袁秋貞.附子的化學(xué)成分與藥理作用［J］.陜西中醫(yī)，2010，31(12):1658－1660.

［6］向榮，徐江濤，易寧育.去甲烏藥堿的藥理作用與心臟β—AR關(guān)系的初步研究［J］.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，1995，11(2):113－115.

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［8］李可.李可老中醫(yī)急危重癥疑難病經(jīng)驗(yàn)專(zhuān)輯［M］.太原:山西科學(xué)技術(shù)出版社，2004:1－17.