血脂檢測(cè)試劑對(duì)脂蛋白（a）測(cè)定結(jié)果的影響因素及防范措施

王玉敏

（吉林省人民醫(yī)院，吉林長(zhǎng)春130021）

血脂檢測(cè)試劑對(duì)脂蛋白（a）測(cè)定結(jié)果的影響因素及防范措施

王玉敏

（吉林省人民醫(yī)院，吉林長(zhǎng)春130021）

目的 探討血脂檢測(cè)試劑對(duì)脂蛋白（a）測(cè)定結(jié)果的影響因素并制定出相應(yīng)的防范措施。方法 采用Olympus AU2700全自動(dòng)生化儀先對(duì)新鮮混合血清進(jìn)行脂蛋白（a）單獨(dú)檢測(cè)，再取同份標(biāo)本分別置于高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）檢測(cè)后進(jìn)行脂蛋白（a）的測(cè)定，記錄上述各組結(jié)果并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 本次研究發(fā)現(xiàn)低密度脂蛋白膽固醇、總膽固醇、三酰甘油檢測(cè)試劑對(duì)脂蛋白（a）測(cè)定結(jié)果具有明顯的正干擾，高密度脂蛋白膽固醇對(duì)脂蛋白（a）（P＞0.05）測(cè)定結(jié)果則沒(méi)有干擾作用。結(jié)論 采用全自動(dòng)生化儀測(cè)定脂蛋白（a），其不同測(cè)定項(xiàng)目之間存在試劑干擾，因此檢測(cè)人員應(yīng)該熟悉待檢試劑的生化物理性質(zhì)，并且盡量合理安排檢測(cè)順序，從而才能有效避免血脂檢測(cè)試劑對(duì)脂蛋白（a）測(cè)定的干擾。

血脂檢測(cè)試劑；脂蛋白（a）；影響因素；防范措施

血清脂蛋白（a）是在肝臟中合成的，能夠?qū)е聞?dòng)脈硬化的一類脂蛋白。血清脂蛋白（a）的濃度不受年齡、性別、體質(zhì)、降固醇類藥物等多種因素的影響，主要由基因調(diào)控，當(dāng)其血漿濃度≥300mg/L，血清脂蛋白（a）則被認(rèn)為是心肌梗死和動(dòng)脈硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因子[1]。另外，血清脂蛋白（a）水平不僅是是反映冠心病發(fā)展與轉(zhuǎn)歸的重要指標(biāo)之一，同時(shí)與急性心肌梗死的病情發(fā)展、演化也具有密切的聯(lián)系，因此準(zhǔn)確而又合理地測(cè)定血清脂蛋白（a）的濃度對(duì)疾病的診治具有重要的意義[2]。目前，有研究資料表明不同血脂檢測(cè)試劑如高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、總膽固醇、三酰甘油等檢測(cè)條件下血清脂蛋白（a）的測(cè)定結(jié)果具有比較明顯的差異。近年來(lái)，筆者對(duì)血脂檢測(cè)試劑對(duì)脂蛋白（a）測(cè)定結(jié)果的影響因素進(jìn)行探討并制定出相應(yīng)的防范措施，現(xiàn)將本次研究簡(jiǎn)單介紹如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

采用日本OLYMPUS公司生產(chǎn)的Olympus AU2700全自動(dòng)生化儀，該儀器采用了點(diǎn)光源技術(shù)，最小反應(yīng)體積可設(shè)置為120μL，精確度高；Olympus AU2700全自動(dòng)生化儀采用內(nèi)外雙圈比色杯（即inner和outer），具有使分析儀發(fā)揮最大的測(cè)試速度，提高分析儀的使用效率的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)還可以通過(guò)內(nèi)外圈的合理分開(kāi)而避免交叉污染的特點(diǎn)[3]?？偰懝檀迹═C，膽固醇氧化酶法）、三酰甘油（TG，去游離甘油法）、低密度脂蛋白膽固醇（選擇保護(hù)法）、高密度脂蛋白膽固醇（抗體阻礙法）試劑檢測(cè)盒由日本wako公司提供；脂蛋白（a）（免疫比濁法）檢測(cè)試劑申索佑福醫(yī)學(xué)診斷用品有限公司。

1.2 臨床標(biāo)本

選取我院檢驗(yàn)科的20份無(wú)黃疸、無(wú)脂血、無(wú)溶血的新鮮血清標(biāo)本，制備出混合血清。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 血脂試劑對(duì)脂蛋白（a）檢測(cè)的干擾程度

首先分析血脂試劑對(duì)脂蛋白（a）檢測(cè)的干擾程度，取混合血清在無(wú)干擾條件下單獨(dú)測(cè)定脂蛋白（a）12次，作為對(duì)照組；再取同份標(biāo)本分別置于高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）檢測(cè)后進(jìn)行脂蛋白（a）的測(cè)定，記錄上述結(jié)果并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1.3.2 血脂試劑的干擾持續(xù)時(shí)間

取混合血清在無(wú)干擾條件下單獨(dú)測(cè)定脂蛋白（a）12次，作為對(duì)照組；再取同份混合血清在血脂檢測(cè)后測(cè)定脂蛋白（a）3次，然后再重復(fù)檢測(cè)血脂和脂蛋白（a）12次。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS11.0軟件來(lái)完成對(duì)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與處理，然后進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 血脂試劑對(duì)脂蛋白（a）檢測(cè)的干擾程度

對(duì)于同一份血清標(biāo)本，單獨(dú)檢測(cè)其脂蛋白（a）以及高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）檢測(cè)后再進(jìn)行脂蛋白（a）的測(cè)定，其檢測(cè)結(jié)果分別為（227±2.62）、（223±3.21）、（255±2.78）、（249± 3.11）、（251±2.92），低密度脂蛋白膽固醇、總膽固醇、三酰甘油檢測(cè)試劑（P＜0.05）對(duì)脂蛋白（a）測(cè)定結(jié)果具有明顯的正干擾，高密度脂蛋白膽固醇（P＞0.05）對(duì)脂蛋白（a）測(cè)定結(jié)果則沒(méi)有干擾作用。

2.2 血脂試劑的干擾持續(xù)時(shí)間

本研究中，低密度脂蛋白膽固醇、總膽固醇、三酰甘油檢測(cè)試劑對(duì)脂蛋白（a）的干擾持續(xù)到第三個(gè)測(cè)試，高密度脂蛋白膽固醇試劑則對(duì)脂蛋白（a）沒(méi)有干擾作用。

3 討 論

全自動(dòng)生化分析儀對(duì)提高檢測(cè)率具有重要的作用，尤其是對(duì)于檢測(cè)工作量較大的醫(yī)院檢驗(yàn)科室而言非常適用[4]。但全自動(dòng)生化分析儀也存在一定的局限性，其主要局限表現(xiàn)為：當(dāng)采用同一根試劑針吸取試劑時(shí)，往往為了提高效率，清洗程序和過(guò)程短暫而快速，特別是對(duì)于較高濃度的試劑，試劑針更加難以被清洗干凈；此外，對(duì)于部分檢測(cè)項(xiàng)目，前一項(xiàng)檢測(cè)的殘留成分可能會(huì)被帶到后一項(xiàng)的檢測(cè)成分中，并且發(fā)生生化反應(yīng)，導(dǎo)致后面的檢測(cè)項(xiàng)目的測(cè)定結(jié)果出現(xiàn)較大的偏離，盡管在一定范圍內(nèi)的偏離基本上不會(huì)對(duì)病情的判斷造成影響，但是如果偏離過(guò)大可能會(huì)導(dǎo)致誤判，從而造成嚴(yán)重的后果，因此探討血脂檢測(cè)試劑對(duì)脂蛋白（a）測(cè)定結(jié)果的影響因素并制定出相應(yīng)的防范措施非常重要。全自動(dòng)生化分析儀的攜帶污染是影響檢測(cè)結(jié)果的重要原因之一。攜帶污染不僅來(lái)自于樣品間，還來(lái)自于試劑間的化學(xué)污染，包括攪拌棒、比色杯污染、試劑針等。本研究中采用的Olympus AU2700全自動(dòng)生化儀，其比色杯是硬質(zhì)的PV材料，具有嚴(yán)格的清洗檢測(cè)程序及正常的保養(yǎng)措施，因此本儀器的交叉感染主要來(lái)自于攪拌棒和試劑針。在每次加樣完成之后，如果試劑中含對(duì)下面測(cè)試有影響的成分或者沖洗次數(shù)不夠，都將會(huì)對(duì)下一測(cè)試項(xiàng)目造成不同程度的干擾，導(dǎo)致其測(cè)定結(jié)果發(fā)生偏離，從而對(duì)檢驗(yàn)診斷和臨床治療造成明顯的影響[5]。本研究中脂蛋白（a）的檢測(cè)采用免疫比濁法，其原理也就是現(xiàn)將人體血清脂蛋白（a）與結(jié)合在膠乳顆粒表面的羊抗人血清脂蛋白（a）抗體，使二者發(fā)生凝集反應(yīng)，研究發(fā)現(xiàn)在反應(yīng)體系600nm處的吸光度與血清脂蛋白（a）的含量呈正相關(guān)。因此可以判斷，如果血脂試劑中含有某種能與膠乳顆粒表面的羊抗人血清脂蛋白（a）抗體結(jié)合的物質(zhì)，將會(huì)增加膠乳凝集的濁度，從而會(huì)對(duì)血清脂蛋白（a）的檢測(cè)造成一定的影響，使其測(cè)定結(jié)果偏高。而高密度脂蛋白膽固醇試劑檢測(cè)采用的是抗體阻礙法，其原理就是檢測(cè)之前先除去血脂試劑中含有的能與膠乳顆粒表面的羊抗人血清脂蛋白（a）抗體結(jié)合的物質(zhì)，從而避免脂蛋白（a）的測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生干擾[6]。為了避免試劑間的交叉污染，最有效的防范措施就是在每次檢測(cè)之后都進(jìn)行比較徹底的清洗，但是卻不能保證全自動(dòng)生化分析儀的高效進(jìn)行，同時(shí)這在臨床實(shí)際檢測(cè)中也是不可能的。目前，卻又不少關(guān)于清除交叉污染的報(bào)道，如采用堿性、酸性清洗劑以及蒸餾水等以加強(qiáng)試劑針的清洗，雖然能夠減少干擾但卻不能完全清除，也有專家提出采用下面的方法消除干擾：隔絕某兩個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的聯(lián)系，可以從反應(yīng)原理和試劑組成的角度上分析上一個(gè)項(xiàng)目對(duì)下一個(gè)項(xiàng)目干擾的可能性，從而合理安排項(xiàng)目分析的順序，將可能會(huì)被干擾的項(xiàng)目置于干擾項(xiàng)目之前；還可以通過(guò)設(shè)置特殊的沖洗程序來(lái)減少干擾，即對(duì)于可設(shè)定沖洗程序的生化分析儀，應(yīng)該在存在干擾檢測(cè)項(xiàng)目之間設(shè)置加強(qiáng)沖洗程序[6]。并且在實(shí)際操作中，盡量將總膽固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白膽固醇等對(duì)脂蛋白（a）測(cè)定有影響的項(xiàng)目設(shè)定在不同的位置上，在試劑間還應(yīng)該多間隔一些其他對(duì)脂蛋白（a）測(cè)定沒(méi)有影響的試驗(yàn)，這樣才能有效避免對(duì)脂蛋白（a）測(cè)定的交叉感染，還可以將一些有交叉感染的試驗(yàn)放在不同的批次進(jìn)行測(cè)定。

此外，對(duì)于樣品針、攪拌棒、試劑針每天也都應(yīng)該用75%的乙醇擦洗，在更換不同方法的試劑時(shí)應(yīng)該觀察新選用的試劑對(duì)鄰近項(xiàng)目是否會(huì)有被其影響或者干擾的可能性，認(rèn)真挑選異常結(jié)果并進(jìn)行復(fù)查以最大限度的減少誤差[7]?？傊捎萌詣?dòng)生化儀測(cè)定脂蛋白（a），其不同測(cè)定項(xiàng)目之間存在試劑干擾，因此檢測(cè)人員在工作中應(yīng)該加強(qiáng)儀器的日常維護(hù)和保養(yǎng)，熟悉待檢試劑的生化物理性質(zhì)和儀器工作流程，并且盡量合理安排檢測(cè)順序，才能有效避免血脂檢測(cè)試劑對(duì)脂蛋白（a）測(cè)定的干擾，獲得準(zhǔn)確的測(cè)定結(jié)果，從而為臨床提供客觀可靠的診斷依據(jù)。

[1] 李家偉,殷昌斌,王立秋.血脂檢測(cè)試劑對(duì)脂蛋白(a)測(cè)定結(jié)果的影響及防范措施[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,33(5):616-617.

[2] 胡俊萍,毛美嬌,梁燕,等.血脂檢測(cè)方法評(píng)價(jià)及影響因素研究[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(5):585-587.

[3] 朱武軍,邰飛,邵燕麗,等.循環(huán)酶法測(cè)定總膽汁酸試劑交叉污染及預(yù)防措施[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(9):990.

[4] 唐衡,桂滿元,易斌.血脂檢測(cè)試劑對(duì)總膽汁酸測(cè)定結(jié)果的影響及防范措施[J].醫(yī)學(xué)研究雜志,2009,38(10):92-95.

[5] 吳劍楊,黃燕爾.血脂檢測(cè)試劑對(duì)總膽汁酸測(cè)定結(jié)果的影響及防范措施探討[J].中國(guó)醫(yī)藥指南,2012,10(17):17-18.

[6] 鄧正輝,張華,李龍平.生化試劑對(duì)膽汁酸測(cè)定的交叉污染及防范措施[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2008,3(10):55-56.

[7] 于嘉屏.全自動(dòng)生化分析儀及其試劑問(wèn)化學(xué)污染對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,30(11):1301-1302.

R589.2

B

1671-8194（2013）33-0102-02