氣相色譜法檢測寧夏枸杞中聯(lián)苯菊酯殘留量

摘要：以寧夏中寧枸杞為研究對象，建立了檢測枸杞中聯(lián)苯菊酯殘留量的毛細管氣相色譜法。試樣用乙腈提取，過ＣＡＲＢ／ＮＨ２固相萃取柱，經(jīng)丙酮∕二氯甲烷凈化洗脫，再過Florisil柱，經(jīng)正己烷∕二氯甲烷淋洗除雜，乙酸乙酯洗脫，正己烷定容，采用ＤＢ－１７０１毛細管色譜柱分離，ＧＣ－ＥＣＤ進行分析。結果表明，中寧枸杞中聯(lián)苯菊酯含量為０．００２ ２ μｇ／ｇ，ＲＳＤ為３．５５％，樣品加標回收率為９２．４７％，ＲＳＤ為１．７０％。該方法簡便、快速、靈敏、準確，符合農(nóng)藥殘留分析要求，研究結果為枸杞質(zhì)量控制提供了一定的參考價值。

關鍵詞：枸杞；聯(lián)苯菊酯；氣相色譜法；殘留量

中圖分類號：Ｏ６５７．７＋１ 文獻標識碼：Ａ 文章編號：0439－８114（２０12）07－1453-03

Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｒｅｓｉｄｕｅ ｏｆ Ｂｉｆｅｎｔｈｒｉｎ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｗｏｌｆｂｅｒｒｙ ｏｆ Ｎｉｎｇｘｉａ ｂｙ Ｇａｓ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ

ＬＩ Ｐｅｎｇ，ＨＡＯ Ｆｅｎｇ－ｘｉａ

（Ｓｔａｔｅ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ Ｂａｓｅ ｏｆ Ｎａｔｕｒａｌ Ｇａｓ Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ，Ｎｉｎｇｘｉａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５００２１，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ bｉｆｅｎｔｈｒｉｎ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｗｏｌｆｂｅｒｒｙ ｉｎ Ｎｉｎｇｘｉａ ｗａｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｂｙ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ． Ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ， ｐｕｒｉｆｉｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ＣＡＲＢ／ＮＨ２ ＳＰＥ ｃｏｌｕｍｎ， ａｎｄ ｅｌｕｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｃｅｔｏｎｅ－ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ ｃｈｌｏｒｉｄｅ． Ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｅｌｕａｔｅ ｗａｓ ｃｌｅａｎｅｄ ｕｐ ｂｙ ｐａｓｓｉｎｇ ｔｈｒｏｕｇｈ ａ Florisil ｃａｒｔｒｉｄｇｅ， ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｗａｓｈｅｄ ｗｉｔｈ ｎ－ｈｅｘａｎｅ－ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ ｃｈｌｏｒｉｄｅ， ａｎｄ ｔｈｅ ａｎａｌｙｔｅ ｗａｓ ｅｌｕｔｅｄ ｗｉｔｈ ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ， ａｎｄ ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｅｄ ｗｉｔｈ ｎ－ｈｅｘａｎｅ， ｆｉｎａｌｌｙ ａｎａｌｙｚｅｄ ｗｉｔｈ ＧＣ－ＥＣＤ ａｆｔｅｒ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｂｙ ＤＢ－１７０１ ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｃｏｌｕｍｎ． Ｔｈｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｒｅｓｉｄｕｅ ｏｆ ｂｉｆｅｎｔｈｒｉｎ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｗｏｌｆｂｅｒｒｙ ｗａｓ ０．００２ ２ μｇ／ｇ and ｔｈｅ ＲＳＤ was ３．５５％． Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ９２．４７％ and ｔｈｅ ＲＳＤ was １．７０％． Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｓｉｄｕｅ ｏｆ ｂｉｆｅｎｔｈｒｉｎ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｗｏｌｆｂｅｒｒｙ， ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｓｉｍｐｌｅ， ｒａｐｉｄ， ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｕｓｅｆｕｌ ｆｏｒ the ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｗｏｌｆｂｅｒｒｙ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｃｈｉｎｅｓｅ ｗｏｌｆｂｅｒｒｙ； bｉｆｅｎｔｈｒｉｎ； gas chromatography（ＧＣ）； ｒｅｓｉｄｕｅ

枸杞為茄科多年生落葉灌木，別名枸杞果、白疙針、旁米布如，是一種名貴的中藥材，主要分布在寧夏、內(nèi)蒙古、新疆等地。寧夏中寧是枸杞原產(chǎn)地，品質(zhì)優(yōu)良，是寧夏第一個“世界第一產(chǎn)業(yè)”［１］。枸杞是一種很好的保健食品，不僅含鐵、磷、鈣等物質(zhì)，而且還含有大量糖、脂肪、蛋白質(zhì)、多糖、色素和維生素等［２，３］。枸杞有益于健康，但在其種植、加工和貯藏過程中容易受到一些農(nóng)藥如有機磷、有機氯以及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的污染［４］。聯(lián)苯菊酯，別名氟氯菊酯，是擬除蟲菊酯的一種，由于其殺蟲譜廣、效果好、殘留低、無蓄積作用等優(yōu)點，近年來在枸杞病蟲害應用非常廣泛。

固相萃取是近年發(fā)展起來的一種樣品預處理技術，可以提高分析物的回收率，更有效地將分析物與干擾組分分離，減少樣品預處理過程，操作簡單、省時、省力［５，６］。本研究以寧夏中寧枸杞為研究對象，建立一種簡單、快捷、高效的聯(lián)苯菊酯殘留量的檢測方法，采用組織搗碎法對枸杞試樣中的聯(lián)苯菊酯進行提取，運用固相萃取技術對濃縮液進行凈化，凈化后的樣品溶液用氣相色譜進行檢測。研究結果對提高寧夏中寧枸杞的安全性及更好地控制寧夏枸杞的質(zhì)量提供一定參考。

１ 材料與方法

１．１ 試驗材料

枸杞采自寧夏中寧，常溫下陰干制成干果，于－１８℃下冷凍２４ ｈ，取出立即粉碎，置于具塞聚乙烯瓶中于－１８ ℃下冷凍保存。

聯(lián)苯菊酯標準品（購于國家標準物質(zhì)中心，１００ μｇ／ｍＬ）；乙腈、無水硫酸鈉、氯化鈉為分析純；丙酮、正己烷、乙酸乙酯、二氯甲烷均為色譜純。取濃度為１００ μｇ／ｍＬ的聯(lián)苯菊酯標準品１ ｍＬ，加入到１０ ｍＬ容量瓶中，用正己烷定容至刻度，即為１０ μｇ／ｍＬ的儲備液。

１．２ 儀器

ＶＡＲＩＡＮ ４５０氣相色譜儀（配有ＥＣＤ檢測器，美國瓦里安公司）；超聲波清洗儀；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；氮吹儀；固相萃取裝置；組織搗碎機；Ｆｌｏｒｉｓｉｌ固相萃取小柱，ＣＡＲＢ／ＮＨ２柱（杭州福裕科技服務有限公司）。

１．３ 試驗條件

采用ＤＢ－１７０１色譜柱（３０ ｍ × ０．３２ ｍｍ × ０．２５ μｍ）；進樣口溫度：２６０ ℃；檢測器溫度：３００ ℃；采用程序升溫，初始溫度１８０ ℃，保持１０ ｍｉｎ，以５ ℃／ｍｉｎ升溫至２７０ ℃，保持１０ ｍｉｎ；載氣：氮氣（純度＞９９．９９％）；恒流流速：１．３ ｍＬ／ｍｉｎ；分流比：１０∶１；進樣量：１ μＬ。

１．４ 試驗方法

１．４．１ 樣品提取 稱取粉碎好的枸杞試樣３０ ｇ于１００ ｍＬ燒杯中，加入２０ ｍＬ蒸餾水，振蕩１ ｍｉｎ，然后加入６０ ｍＬ乙腈，用高速組織勻漿機勻漿１ ｍｉｎ，超聲提?。?ｍｉｎ。過濾，收集濾液，蓋上塞子，劇烈振蕩１ ｍｉｎ，室溫靜置１ ｈ后，吸取乙腈濾液３０ ｍＬ，無水硫酸鈉干燥，濃縮至近干。

１．４．２ 樣品凈化

１）ＣＡＲＢ／ＮＨ２柱第一次凈化。用體積比為１∶１的丙酮和二氯甲烷的混合溶液活化ＣＡＲＢ／ＮＨ２柱。再用３ ｍＬ丙酮和二氯甲烷的混合溶液分３次洗滌上述濃縮后的樣品，并分別把洗滌液吸入ＣＡＲＢ／ＮＨ２柱，液面達到柱表面后，再加入淋洗液１２ ｍＬ，收集此淋洗液于５０ ｍＬ平底燒瓶中，濃縮近干，用２ ｍＬ正己烷溶解。

２）弗羅里硅土柱第二次凈化。取弗羅里硅土柱，上層加１．０ ｇ無水硫酸鈉，先用５ ｍＬ正己烷淋洗，然后加入上述用２ ｍＬ正己烷溶解的濃縮液過柱，先用５ ｍｌ ５％二氯甲烷／正己烷淋洗除雜，再用１０ ｍＬ 含１０％乙酸乙酯的正己烷洗脫，洗脫液于４０ ℃氮氣吹干，加２ ｍＬ正己烷溶解，移入２ ｍＬ自動進樣器樣品瓶中，待氣相色譜測定。

２ 結果與分析

２．１ 標準曲線的繪制

分別取不同體積的上述１０ μｇ／ｍＬ的聯(lián)苯菊酯標準儲備液，用正己烷稀釋配制成一系列溶液，濃度分別為０．０５、０．１、０．３、０．５和１．０ μｇ／ｍＬ，移入２ ｍＬ自動進樣器樣品瓶中，采用１．３方法檢測，以聯(lián)苯菊酯含量為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制聯(lián)苯菊酯標準曲線，得到聯(lián)苯菊酯濃度（ｘ）與峰面積（ｙ）的線性回歸方程：ｙ＝２．２４×１０６ｘ＋２．７９×１０４，相關系數(shù)為 Ｒ２＝０．９９５ ０。聯(lián)苯菊酯標準曲線如圖１所示。

２．2 加標回收試驗

采用標樣添加法，在已知含量的樣品中加入一定量的標準品，按１．４方法制備３份不同的樣品溶液，采用１．３方法測定，計算加標回收率，結果如表１所示。

２．3 樣品測定

按１．４方法平行制備３份樣品溶液，采用１．３方法測定，計算樣品中聯(lián)苯菊酯的含量，結果見表２所示，聯(lián)苯菊酯標準品和枸杞樣品色譜圖見圖２、圖３。

３ 小結與討論

試驗結果表明，寧夏中寧枸杞中的聯(lián)苯菊酯含量為０．００２ ２ μｇ／ｇ，ＲＳＤ為３．５５％。根據(jù)國家農(nóng)藥殘留檢測行業(yè)標準，可判斷此結果符合要求。樣品中聯(lián)苯菊酯農(nóng)藥殘留濃度未超標，對寧夏中寧枸杞對外出口無影響。

分別采用ＣＡＲＢ／ＮＨ２柱和Florisil柱對枸杞粗提取液進行固相萃取，進一步分離、純化及富集，樣品的加標回收率為９２．４７％， ＲＳＤ為１．７０％，由此可見，此方法準確度較高。

本研究采用氣相色譜法測定枸杞中聯(lián)苯菊酯農(nóng)藥殘留量，方法操作簡便、靈敏度較高、重現(xiàn)性較好、適合枸杞中聯(lián)苯菊酯農(nóng)藥殘留分析。

參考文獻：

［１］ 竇國華． 枸杞子［Ｍ］． 天津：天津科學出版社，２００４.５３－５６．

［２］ 王向紅，崔 同，劉孟軍，等．不同品種棗的營養(yǎng)成分分析［Ｊ］．營養(yǎng)學報，２００２，２４（２）：２０６－２０８．

［３］ 蔡 ?。?大棗的營養(yǎng)保健作用及貯藏加工技術［Ｊ］． 中國食物與營養(yǎng)，２００４（９）：１６－１９．

［４］ 任月萍，胡忠慶． 寧夏枸杞主要病蟲害化學防治研究進展［Ｊ］． 寧夏農(nóng)學院學報，２００４，２５（３）：８８－９１．

［５］ 肖 珂，路 鑫，孔宏偉， 等．固相微萃?。瓪庀嗌V／質(zhì)譜測定工業(yè)廢水中痕量有機物的研究［Ｊ］． 色譜，２００３，２１（１）：７６－８０．

［６］ 賈金平，何 翊，黃駿雄．固相微萃取技術與環(huán)境樣品前處理［Ｊ］． 化學進展，１９９８，１０（１）：７４－８４．