四君子湯對(duì)賽鴿抗氧化機(jī)能的影響

摘要：將７２只４５日齡賽鴿隨機(jī)分成４組，Ⅰ組為對(duì)照組，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組為試驗(yàn)組。飼養(yǎng)至５２日齡時(shí)試驗(yàn)組灌服四君子湯（劑量分別為0.125、0.250、0.500 ｇ／Ｌ），每天２次，每次１ ｍＬ，對(duì)照組灌服等量生理鹽水，連喂７ ｄ。并分別于５２、５９、６６日齡心臟采血分離血清，測(cè)定血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、過(guò)氧化氫酶（ＣＡＴ）活性及丙二醛（ＭＤＡ）活性。結(jié)果顯示，四君子湯可以提高賽鴿血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、過(guò)氧化氫酶（ＣＡＴ）活性，降低血清中丙二醛（ＭＤＡ）含量，尤其以高劑量組作用較明顯。證明四君子湯能夠提高賽鴿抗氧化功能。

關(guān)鍵詞：賽鴿；四君子湯；抗氧化機(jī)能

中圖分類號(hào)：Ｑ５５４；Ｒ２８５．５ 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ 文章編號(hào)：0439－８114（２０12）07－1410-03

Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｓｉｊｕｎｚｉ Ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｏｎ Ａｎｔｉｏｘｙｇｅｎｉｃ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ｉｎ Ｒａｃｅ Ｐｉｇｅｏｎｓ

ＧＯＮＧ Ｓｕ－ｍｅｉ１，ＧＵＯ Ｈｏｎｇ－ｂｉｎ１，ＬＩＵ Ｚｈａｎ－ｍｉｎ２

（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｈｅｂｅｉ， Ｄｉｎｇｚｈｏｕ ０７３０００，Hebei，China；

２．Ｏｃｅａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｈｅｂｅｉ，Ｑｉｎｈｕａｎｇｄａｏ ０６６０００，Hebei，China）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： ７２ ｒａｃｅ ｐｉｇｅｏｎｓ ａｔ ａｇｅ ｏｆ 45 ｄａｙｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｅｓｉｇｎｅｄ inｔｏ ｆｏｕｒ ｇｒｏｕｐｓ． ＧｒｏｕｐⅠｗａｓ the ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ， ａｎｄ ｇｒｏｕｐⅡ－Ⅳ ｗｅｒｅ the treatment ｇｒｏｕｐｓ． Ｔｈｅ treatment ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｓｕｐｐｌｉｅｄ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ Ｓｉｊｕｎｚｉ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｓｕｃｈ ａｓ ｍｉｄｄｌｅ ｄｏｓａｇｅ（０．２５0 ｇ／ｍＬ）， ｌｏｗ ｄｏｓａｇｅ（０．１２５ ｇ／ｍＬ） ａｎｄ ｈｉｇｈ ｄｏｓａｇｅ（０．５00 ｇ／ｍＬ） ｗｈｅｎ ａｔ ５２ ｄａｙｓ ｏｌｄ ａｎｄ ｔｗｉｃｅ ａ ｄａｙ ｗｉｔｈ １ｍｌ ｆｏｒ ７ ｄａｙｓ． Ｃａｒｄｉａｃ ｂｌｏｏｄ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｔａｋｅｎ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｔ ｔｈｅ ａｇｅ ｏｆ ５２， ５９ ａｎｄ ６６． Ａｎｄ ｔｈｅｎ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ（ＳＯＤ）， ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＧＳＨ－Ｐｘ）， ｃａｔａｌａｓｅ（ＣＡＴ） ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ（ＭＤＡ） ｉｎ ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ Ｓｉｊｕｎｚｉ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｃｏｕｌｄ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ（ＳＯＤ）， ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＧＳＨ－Ｐｘ） ａｎｄ ｃａｔａｌａｓｅ（ＣＡＴ）， ａｎｄ ｄｅｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ（ＭＤＡ）ｉｎ ｓｅｒｕｍ， ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｄｉｓｔｉｎｃｔｉｖｅｌｙ ｉｎ ｈｉｇｈ ｄｏｓａｇｅ treatment ｇｒｏｕｐ． Ｉｔ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ Ｓｉｊｕｎｚｉ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｃｏｕｌｄ ｅｎｈａｎｃｅ ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｙｇｅｎｉｃ ｐｒｏｐｅｒｔｙ ｏｆ ｒａｃｅ ｐｉｇｅｏｎ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｒａｃｅ ｐｉｇｅｏｎ； Ｓｉｊｕｎｚｉ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ； ａｎｔｉｏｘｙｇｅｎｉｃ ｐｒｏｐｅｒｔｙ

俗話說(shuō)“三分治療七分養(yǎng)”，中獸醫(yī)在畜禽疾病的防制中應(yīng)該重視以防為主［１］。中醫(yī)理論的平衡調(diào)節(jié)作用，能夠維持機(jī)體的健康狀態(tài)，實(shí)際上說(shuō)的就是中獸醫(yī)“治未病”的宗旨，也是預(yù)防保健的原則。四君子湯出自宋代太醫(yī)局編著的《太平惠民和劑局方》，由人參（可用黨參代替）、白術(shù)、茯苓、炙甘草四味中藥組成，是中獸醫(yī)調(diào)補(bǔ)正氣的基礎(chǔ)方，臨床運(yùn)用范圍較廣［２］。據(jù)報(bào)道，四君子湯能夠提高機(jī)體免疫功能，促進(jìn)肝細(xì)胞內(nèi)非核酸物質(zhì)的儲(chǔ)存，有利于發(fā)揮細(xì)胞的正常功能［３］。賽鴿屬陽(yáng)性之體，體溫高，代謝率高，所以在選用飼料添加劑的時(shí)候，宜選用一些平補(bǔ)消導(dǎo)之類的藥物，而不宜用大溫大寒藥物［４］。黨參偏溫，多補(bǔ)脾胃、補(bǔ)氣，而人參大補(bǔ)元?dú)?，偏熱性［５］，所以四君子湯作為賽鴿飼料添加劑?yīng)以黨參代替人參。本試驗(yàn)對(duì)賽鴿飼喂四君子湯，通過(guò)測(cè)定其對(duì)血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、過(guò)氧化氫酶（ＣＡＴ）的影響，探討其對(duì)機(jī)體抗氧化機(jī)能的影響。旨在開(kāi)發(fā)利用能夠預(yù)防和增強(qiáng)機(jī)體抗病能力的中草藥飼料添加劑。

１ 材料與方法

１．１ 材料

１．１．１ 中藥方劑 四君子湯，由黨參、白術(shù)（麩炒）、茯苓、炙甘草四味中藥組成，質(zhì)量比為２∶２∶２∶１；上述中藥材均購(gòu)于安國(guó)市藥材中藥經(jīng)銷部。

１．１．２ 主要試劑 超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、過(guò)氧化氫酶（ＣＡＴ）試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

１．２ 方法

１．２．１ 中藥方劑的制備 將黨參、茯苓、白術(shù)（麩炒）、炙甘草四味中藥按照質(zhì)量比２∶２∶２∶１的比例稱取，于容器內(nèi)加水煎煮２５～３０ ｍｉｎ，過(guò)濾取汁。按上述方法煎煮２次，將２次藥液混合濃縮，使每１ ｍＬ含生藥１ ｇ，高壓滅菌后于４ ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

１．２．２ 試驗(yàn)動(dòng)物分組及處理 石家莊同翔賽鴿公棚贈(zèng)送的４５日齡賽鴿７２只， 飼養(yǎng)至５２日齡，隨機(jī)分成４組，每組１８只。Ⅰ組為對(duì)照組，灌服生理鹽水；Ⅱ組為四君子湯０．１２５ ｇ／ｍＬ低劑量組；Ⅲ組為四君子湯０．２５０ ｇ／ｍＬ中劑量組； Ⅳ組為四君子湯０．５００ ｇ／ｍＬ高劑量組。以上各組從５２日齡開(kāi)始灌服藥物，每天早晚各１次，每次１ ｍＬ，連喂７ ｄ。

１．２．３ 血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、過(guò)氧化氫酶（ＣＡＴ）檢測(cè) 分別在５２、５９、６６日齡時(shí)，每組隨機(jī)抽?。吨毁慀?，心臟采血分離血清，－２０ ℃保存，按試劑盒說(shuō)明測(cè)定。ＳＯＤ活性的檢測(cè)：黃嘌呤氧化酶法；ＭＤＡ含量的檢測(cè)：硫代巴比妥酸法；ＧＳＨ－Ｐｘ活性的檢測(cè)：ＤＴＮＢ顯色法；ＣＡＴ活性的檢測(cè)：可見(jiàn)光分光光度法。

１．３ 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析

用Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌ和ＳＰＳＳ．Ｖ１３．０軟件處理，數(shù)據(jù)均以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，用Ｏｎｅ－Ｗａｙ ＡＮＯＶＡ進(jìn)行方差分析，差異顯著性用Ｄｕｎｃａｎ進(jìn)行多重比較。

２ 結(jié)果與分析

２．１ 血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量測(cè)定結(jié)果

由表１可以看出，在５２日齡時(shí)各組賽鴿血清ＳＯＤ含量差異不顯著（Ｐ＞０．０５），５９日齡和６６日齡時(shí)，不同濃度四君子湯組賽鴿血清ＳＯＤ含量逐漸升高。５９日齡時(shí)不同濃度四君子湯組賽鴿血清ＳＯＤ含量與對(duì)照組相比均差異顯著（Ｐ＜０．０５），低、中、高劑量四君子湯組間差異顯著（Ｐ＜０．０５）；６６日齡時(shí)不同濃度四君子湯組賽鴿血清ＳＯＤ含量與對(duì)照組相比差異均極顯著（Ｐ＜０．０１），低、中、高劑量四君子湯組間差異極顯著（Ｐ＜０．０１）。由此可見(jiàn)，隨著賽鴿日齡的增長(zhǎng)，低、中、高劑量四君子湯均可以提高賽鴿血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量，加強(qiáng)ＳＯＤ清除Ｏ２－·的能力，從而保護(hù)機(jī)體細(xì)胞免受損傷。

２．２ 血清中丙二醛（ＭＤＡ）含量測(cè)定結(jié)果

由表２可以看出，在５２日齡時(shí)各組賽鴿血清MDA含量差異不顯著（Ｐ＞０．０５），５９和６６日齡時(shí)不同濃度四君子湯組賽鴿血清ＭＤＡ含量逐漸下降。５９日齡時(shí)，低劑量組和中劑量組賽鴿血清MDA含量與對(duì)照組相比差異顯著（Ｐ＜０．０５），高劑量組與對(duì)照組相比差異極顯著（Ｐ＜０．０１），低、中、高劑量組間差異顯著（Ｐ＜０．０５）；６６日齡時(shí)，低劑量組賽鴿血清MDA含量與對(duì)照組相比差異顯著（Ｐ＜０．０５），中、高劑量組與對(duì)照組相比差異極顯著（Ｐ＜０．０１），低、中、高劑量組間差異極顯著（Ｐ＜０．０１）。由此可見(jiàn)，隨著賽鴿日齡的增長(zhǎng)，高劑量四君子湯可以顯著降低其血清中丙二醛（ＭＤＡ）含量，從而降低機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化作用形成的脂質(zhì)過(guò)氧化物，提高機(jī)體的抗氧化能力。

２．３ 血清中谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）含量測(cè)定結(jié)果

由表３可以看出，在５２日齡時(shí)各組賽鴿血清GSH-Px含量差異不顯著（Ｐ＞０．０５），５９日齡和６６日齡時(shí)，不同濃度四君子湯組賽鴿血清ＧＳＨ－Ｐｘ含量逐漸升高。５９日齡時(shí)，低劑量組賽鴿血清ＧＳＨ－Ｐｘ含量與對(duì)照組相比差異不顯著（Ｐ＞０．０５），中劑量組與對(duì)照組相比差異顯著（Ｐ＜０．０５），高劑量組與對(duì)照組相比差異極顯著（Ｐ＜０．０１）；６６日齡時(shí)，低劑量組賽鴿血清ＧＳＨ－Ｐｘ含量與對(duì)照組相比差異不顯著（Ｐ＞０．０５），高、中劑量組與對(duì)照組相比差異極顯著（Ｐ＜０．０１），高、中、低劑量組間差異極顯著（Ｐ＜０．０１）。由此可見(jiàn)，隨著賽鴿日齡的增長(zhǎng)，中、高劑量四君子湯可以明顯提高其血清中ＧＳＨ－Ｐｘ含量，從而提高機(jī)體的抗氧化能力。

２．４ 血清中過(guò)氧化氫酶（ＣＡＴ）含量測(cè)定結(jié)果

由表４可以看出，在５２日齡時(shí)，各組賽鴿血清ＣＡＴ含量差異不顯著（Ｐ＞０．０５）；在５９日齡和６６日齡時(shí)，不同濃度四君子湯組賽鴿血清ＣＡＴ含量逐漸升高。５９日齡時(shí)，不同濃度四君子湯組賽鴿血清ＣＡＴ含量與對(duì)照組相比均差異顯著（Ｐ＜０．０５），高、中、低劑量組間差異顯著（Ｐ＜０．０５）；６６日齡時(shí)不同濃度的四君子湯組賽鴿血清ＣＡＴ含量與對(duì)照組相比差異均極顯著（Ｐ＜０．０１），高、中、低劑量組間差異極顯著（Ｐ＜０．０１）。由此可見(jiàn)，隨著賽鴿日齡的增長(zhǎng)，低、中、高劑量四君子湯均可明顯提高其血清中ＣＡＴ含量，從而清除細(xì)胞內(nèi)過(guò)多的過(guò)氧化氫，提高機(jī)體的抗氧化能力。

３ 小結(jié)與討論

賽鴿在３０日齡至性成熟稱為童鴿，這個(gè)階段應(yīng)該精心地喂養(yǎng)管理。童鴿生理特點(diǎn)與成年鴿有所不同，身體各部分發(fā)育未成熟，抵抗力較差，疾病的發(fā)生和傳播比成年鴿嚴(yán)重［６］。所以，在這個(gè)階段做好疾病的預(yù)防可以保證其健康生長(zhǎng)發(fā)育。

機(jī)體防御體系的抗氧化能力與機(jī)體的健康程度存在著密切聯(lián)系，機(jī)體抗氧化能力降低，常常導(dǎo)致各種疾病的產(chǎn)生［７］。保護(hù)機(jī)體免受過(guò)氧化損傷的抗氧化酶防御系統(tǒng)有ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＧＳＨ－Ｐｘ等，其中ＳＯＤ可將超氧陰離子自由基轉(zhuǎn)換為過(guò)氧化氫（Ｈ２Ｏ２），過(guò)氧化氫是一種代謝過(guò)程中產(chǎn)生的廢物，它能夠?qū)C(jī)體造成損害。為了避免這種損害，過(guò)氧化氫必須被快速地轉(zhuǎn)化為其他無(wú)害或毒性較小的物質(zhì)。ＧＳＨ－Ｐｘ和ＣＡＴ可以將Ｈ２Ｏ２轉(zhuǎn)化為水，從而使有毒性的Ｏ２－·和Ｈ２Ｏ２均被轉(zhuǎn)化為無(wú)害的水分子，起到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的作用。ＭＤＡ是自由基攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化作用形成的脂質(zhì)過(guò)氧化物，因而其含量的高低?？煞从硻C(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化的程度，由此可判斷機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的損傷程度［８］。

試驗(yàn)中，四君子湯對(duì)賽鴿血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、過(guò)氧化氫酶（ＣＡＴ）的值均有不同程度的提高，且提高的程度與四君子湯的濃度成正比。同時(shí)，四君子湯可降低賽鴿血清中丙二醛（ＭＤＡ）含量。超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、過(guò)氧化氫酶（ＣＡＴ）值的提高顯示了賽鴿體內(nèi)抗氧化酶防御系統(tǒng)能力的增強(qiáng)，正是抗氧化能力的增強(qiáng)，使得機(jī)體清除自由基的能力加強(qiáng)，由過(guò)多的自由基攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸而產(chǎn)生的ＭＤＡ的含量也得到了控制，避免了對(duì)機(jī)體的氧化損傷，保證了賽鴿的健康。因此，本研究表明四君子湯可以增加賽鴿?rùn)C(jī)體抗氧化能力，為四君子湯保障賽鴿的健康成長(zhǎng)提供了依據(jù)。

試驗(yàn)通過(guò)飼喂賽鴿不同濃度的四君子湯，驗(yàn)證了其能夠增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力，可以將四君子湯作為童鴿保健及預(yù)防疾病的飼料添加劑，為開(kāi)發(fā)綠色、安全、低或無(wú)藥物殘留的中草藥飼料添加劑提供了依據(jù)［９，１０］。

參考文獻(xiàn)：

［１］ 王長(zhǎng)林，侯春彬，樊克鋒．中獸醫(yī)學(xué)預(yù)防思想的現(xiàn)代應(yīng)用［Ｊ］． 鄭州牧業(yè)工程高等?？茖W(xué)校學(xué)報(bào)，２００６，２６（１）：２６－２８．

［２］ 李如焱． 四君子湯在獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用［Ｊ］． 中獸醫(yī)學(xué)雜志，２００７（６）：１７－１８．

［３］ 楊 斌．四君子湯加味在獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用［Ｊ］．獸藥與飼料添加劑，２００７，１２（５）：３７－３８．

［４］ 韓阿玲．鴿子常發(fā)傳染病的防治［Ｊ］．農(nóng)村養(yǎng)殖技術(shù)，２００８（２０）：２１．

［５］ 韋 生．冬令進(jìn)補(bǔ)三參有別［Ｊ］．農(nóng)村實(shí)用技術(shù)與信息，２００６（１０）：５８．

［６］ 劉成印，張廣華，李慶洋．鴿子常見(jiàn)疾病的防治［Ｊ］． 山東畜牧獸醫(yī)，２０１１，３２（４）：２９－３０．

［７］ 張菊娥，陳小讓，張翠英，等．四君子湯加柴胡對(duì)長(zhǎng)期攝酒小鼠血脂及抗氧化作用的影響［Ｊ］．鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），２００９，４４（５）：１０４５－１０４６．

［８］ 韓春楊，劉翠艷，史江彬，等． 微生物發(fā)酵四君子湯制劑對(duì)荷瘤小鼠抗氧化功能的影響［Ｊ］． 中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志，２０１０，２２（７）：５９１－５９３．

［９］ 刑攸荷．淺談飼料內(nèi)加入中獸藥對(duì)畜禽的防病作用［Ｊ］．北方牧業(yè)，２００７（８）：２７．

［１０］ 莫花濃，張 慧．中草藥添加劑的研究進(jìn)展［Ｊ］．玉林師范學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），２００７，２８（５）：８７－９１．