市售9批丹參藥材中丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量測(cè)定

童巧珍，黃政德*，張聰子，郭 婷，李鳳娟，孫夢(mèng)姍

（湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長沙 410208）

市售9批丹參藥材中丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量測(cè)定

童巧珍，黃政德*，張聰子，郭 婷，李鳳娟，孫夢(mèng)姍

（湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長沙 410208）

目的 比較市售9批丹參藥材中丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量差異。方法 按照2010年版《中華人民共和國藥典》要求，采用HPLC測(cè)定9批市售丹參藥材中丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量。結(jié)果 丹參酮ⅡA含量6號(hào)（安徽野生）樣品最高，為0.3093%；8號(hào)（山東栽培）樣品最低，僅為0.0447%。丹酚酸B含量9號(hào)（山東野生）樣品最高，為4.4100%；2號(hào)（四川栽培）樣品最低，為3.5333%。結(jié)論 目前市場(chǎng)上丹參質(zhì)量差異很大，建議加強(qiáng)對(duì)丹參藥材種植的規(guī)范化管理。

丹參；HPLC；丹參酮ⅡA；丹酚酸B；含量測(cè)定

丹參為唇形科植物丹參Salviae Mitiorrhia Bge.的干燥根及根莖，歸心、肝經(jīng)。具有祛瘀止痛、活血通經(jīng)、清心除煩的功效[1]70。臨床上廣泛應(yīng)用于治療心血管疾病、腎病、肝病等。

丹參活性成分可以分為脂溶性的二萜醌類化合物及水溶性的酚性酸類化合物兩大類[2]?！吨腥A人民共和國藥典》(2010年版一部)規(guī)定丹參酮ⅡA含量不得少于0.20%，丹酚酸B含量不得少于3.0%[1]72。

近年來，隨著國家對(duì)中藥現(xiàn)代化理念的提出，要求中藥材采用規(guī)范化種植，但栽培品的質(zhì)量是否與野生藥材一致，是廣大科研工作者和消費(fèi)者普遍關(guān)注的問題。本文對(duì)市售丹參藥材中丹參酮ⅡA和丹酚酸B的含量進(jìn)行了測(cè)定，以期為丹參的應(yīng)用提供一些實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器與試劑

Agilent高效液相色譜儀（UV-VIS檢測(cè)器，Solution色譜工作站）；HEMGDING FA 2004型電子分析天平（上海恒平科學(xué)儀器有限公司）；KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；丹參酮ⅡA（編號(hào):111539)、丹酚酸 B(編號(hào):111428)由中國藥品生物制品檢定所提供，供含量測(cè)定用；甲醇、乙腈均為色譜純；其他試劑為分析純；重蒸水（自制）。

1.2 藥材

市售丹參樣品來源于不同產(chǎn)地、批號(hào)，見表1，經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學(xué)中藥資源教研室周日寶教授鑒定為正品。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件[1]72

參照 《中華人民共和國藥典》（2010版一部）中丹參項(xiàng)下的條件，C18色譜柱 （4.6mm×250mm，5μm）。 丹參酮ⅡA：流動(dòng)相為甲醇-水（75∶25），流速1 mL/min，柱溫 30 ℃，λ=270 nm；丹酚酸 B：流動(dòng)相為甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59)，流速 1 mL/min，柱溫30℃，λ=286 nm，理論塔板數(shù)應(yīng)不低于2000。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取丹參酮ⅡA5.0mg置25 mL容量瓶中，精密量取4 mL，置50 mL棕色量瓶中，加甲醇溶解定容至刻度搖勻，制成濃度為16 μg/mL的丹參酮ⅡA對(duì)照品溶液，備用。

精密稱定丹酚酸B 3.5mg置25 mL容量瓶中，加75%甲醇定容至刻度搖勻，制成濃度為140 μg/mL的丹酚酸B對(duì)照品溶液，備用。

2.3 供試品溶液的制備

取丹參藥材粉末（過40目篩），約0.3 g精密稱定，置圓底燒瓶中，加甲醇50 mL，稱定質(zhì)量，加熱回流1 h，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，濾過，取濾液，即得。

2.4 樣品測(cè)定

取9批市售藥材按“2.3”法，分別制備丹參酮ⅡA和丹參酚酸B供試品溶液，按“2.1”相應(yīng)的液相檢測(cè)條件檢測(cè)，用外標(biāo)法計(jì)算，結(jié)果見表1和圖1。

表1 9批市售丹參藥材中丹參酮ⅡA和丹酚酸 B 含量 （，n=3，%）

表1 9批市售丹參藥材中丹參酮ⅡA和丹酚酸 B 含量 （，n=3，%）

注：C為栽培，W為野生；*為含量不合格。

序號(hào)123456789來源四川（C）四川（C）山東（W）山東（W）安徽（W）安徽（W）芷江（C）山東（C）山東（W）批號(hào)110921111015111030111030111028111028111006111029111026丹參酮ⅡA 0.0783±0.0350*0.0560±0.0350*0.1173±0.0075*0.2813±0.00150.1733±0.0031*0.3093±0.01330.0653±0.0038*0.0447±0.0031*0.3050±0.0026丹酚酸B 3.6633±0.04043.5333±0.04164.0967±0.06664.2067±0.03213.6433±0.04043.9600±0.02653.7467±0.02894.0400±0.05004.4100±0.1552

2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用DPS7.5版本軟件對(duì)以上9批市售丹參藥材中丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量進(jìn)行LSD法多重比較分析，結(jié)果見表2～3。

從表2丹參酮ⅡA含量兩兩比對(duì)分析可知，6號(hào)和9號(hào)樣品、2號(hào)和7號(hào)樣品之間無顯著性差異；1號(hào)和7號(hào)樣品、2號(hào)和8號(hào)樣品之間有顯著性差異，其他均有極顯著性差異。表3丹酚酸B含量兩兩比對(duì)分析可知，3號(hào)和4號(hào)樣品、3號(hào)和8號(hào)樣品、6號(hào)和8號(hào)樣品、1號(hào)和7號(hào)樣品、5號(hào)和7號(hào)樣品、1號(hào)和5號(hào)樣品、2號(hào)和5號(hào)樣品之間無顯著性差異；3號(hào)和6號(hào)樣品、1號(hào)和2號(hào)樣品之間有顯著性差異；其他均有極顯著性差異。

3 分析與討論

丹參在國內(nèi)外的需求量較大，是臨床上最常用的藥物之一，其整個(gè)生產(chǎn)過程包括選種栽培、采收、加工以及包裝、運(yùn)輸、貯藏等，每個(gè)環(huán)節(jié)均有可能影響藥材品質(zhì)，以致市場(chǎng)上丹參藥材品質(zhì)良莠不齊。

本文研究表明，9批丹參藥材中丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量分別在0.0447%～0.3093%和3.5333%～4.4100%之間。其中丹酚酸B含量均高于3.0%，而

丹參酮ⅡA僅在2批山東野生、1批安徽野生藥材含量達(dá)到0.2%以上，其他2批野生和1批栽培品種均未達(dá)到藥典標(biāo)準(zhǔn)，9批藥材合格率僅為33.3%。

表2 丹參酮ⅡA含量LSD法多重比較

表3 丹酚酸B含量LSD法多重比較

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，張革等[4]考察18批丹參飲片質(zhì)量，結(jié)果表明18批丹參飲片中7批丹參酮ⅡA含量、2批丹酚酸B含量不符合規(guī)定。曾振興等[5]測(cè)定31批市售丹參飲片丹參酮ⅡA含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)僅1批飲片丹參酮ⅡA含量符合藥典標(biāo)準(zhǔn)，其余30批樣品含量均遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于藥典規(guī)定的含量限度。潘軍[6]考察濱州市31批市售丹參飲片中丹參酮ⅡA含量，結(jié)果表明不合格率為35%。這些都說明商品丹參飲片質(zhì)量參差不齊，應(yīng)引起相關(guān)單位高度重視。

另外，丹參藥材中有效成分的富集與其品種、原植物的生長環(huán)境、土壤、氣候特征等都有一定的關(guān)系，栽培品種的丹參藥材中丹參酮ⅡA含量均不符合《中華人民共和國藥典》標(biāo)準(zhǔn)，是否由于栽培過程中某個(gè)環(huán)節(jié)影響了丹參酮ⅡA的富集仍有待于進(jìn)一步探討，并建議加強(qiáng)對(duì)丹參的人工栽培的規(guī)范化研究。

[1]中華人民共和國藥典委員會(huì)，中華人民共和國藥典[S].北京：中國中醫(yī)藥科技出版社，2010：70-72.

[2]宋經(jīng)元.丹參[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2001：61.

[3]張 革，張麗梅，李 俊，等.18批丹參飲片的質(zhì)量考察[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)，2011，27（2）：187-188.

[4]曾振興，楊 菲，馮偉紅.HPLC測(cè)定市售丹參飲片中丹參酮ⅡA[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（16）：86-88.

[5]潘 軍.市售丹參飲片中丹參酮ⅡA含量的考察[J].中國現(xiàn)代中藥，2010，12（10）：29-30.

The Content determination of tanshinoneⅡA and salvianolic acid B in 9 kinds of commercial Radix Salviae miltiorrhizae

TONG Qiao-zhen， HUANG Zheng-de， ZHANG Cong-zi， GUO Ting， LI Feng-juan，SUN Meng-shan
(TCM University of Hunan， Changsha， Hunan 410208， China)

Radix Salviae miltiorrhizae；HPLC；tanshinone Ⅱ A；salvianolic acid B;content determination

R284.2

A

10.3969/j.issn.1674－070X.2012.11.007.027.04

〔Absrract〕Objective To compare the contents of tanshinoneⅡA and salvianolic acid B in the 9 kinds of commercial Radix Salviae miltiorrhizae.Methods The contents of tanshinoneⅡA and salvianolic acid B in the 9 kinds of commercial Radix Salviae miltiorrhizae are determined by HPLC according to the requirements of Chinese Pharmacopoeia （2010）.Results The tanshinoneⅡA content of Anhui wild Danshen was highest(0.3093%)and Shandong cultivate Danshen was lowest(0.0447%),while the Salvianolic acid B content of Shandong wild Danshen was highest(4.41%)and Sichuan cultivate Danshen was lowest(3.5333%)in these samples.Conclusion At present,the quality of Radix Salviae miltiorrhizae in the market are different.It is suggested to strengthen the standardized management of the plant of Radix Salviae miltiorrhizae.

2012－05－19

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（30973750）；湖南省教育廳資助項(xiàng)目（09A071）。

童巧珍（1971-），女，湖南平江人，博士后，副教授，主要從事產(chǎn)學(xué)研管理和中藥質(zhì)量與資源研究。

* 黃政德，男，教授，博士研究生導(dǎo)師，E-mail：Hzd112@163.com。

（本文編輯 楊 瑛）