氣相色譜法測(cè)定丁酸丙酸氫化可的松的殘留溶劑*

劉 霞

(南開大學(xué)附屬口腔醫(yī)院，天津 300041)

丁酸丙酸氫化可的松是糖皮質(zhì)激素類藥物，外用有抗炎、抗過敏、止癢及減少滲出的作用，可經(jīng)皮膚吸收，在皮膚破損處吸收很快，現(xiàn)己收入藥典。本品在化學(xué)合成過程中由于使用了乙酸乙酯和氯仿，在質(zhì)量控制中必須考查該原料藥有機(jī)溶劑殘留量問題。筆者參照《中國(guó)藥典》2005 版(一部)［1］和有關(guān)文獻(xiàn)［2-4］，采用氣相色譜法對(duì)這兩種有機(jī)溶劑進(jìn)行測(cè)定和驗(yàn)證，方法簡(jiǎn)便，精密度較高，可有效對(duì)丁酸丙酸氫化可的松中殘留的有機(jī)溶劑進(jìn)行控制，為藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定和生產(chǎn)工藝改進(jìn)提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器安捷倫7890 氣相色譜儀，METTLER AE240 分析天平。

1.2 試藥 乙酸乙酯和氯仿均為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?，二甲基亞砜為?guó)產(chǎn)色譜純?cè)噭?。丁酸丙酸氫化可的松樣?湖北恒安藥業(yè)有限公司，批號(hào)091201、091202、091203)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 色譜柱:DB -624石英毛細(xì)管柱(6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷，30 mm ×0.32 mm，1.8 μm);柱溫:40 ℃保持3 min，以2 ℃/min 的速度升至75 ℃，再以80 ℃/min 的速度升至230 ℃，保持10 min;氣化室:200 ℃;檢測(cè)器:FID，250 ℃;載氣:氮?dú)?分流比:10∶ 1;流速:0.6 ml/min;進(jìn)樣量:1 μl。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對(duì)照溶液的制備 精密量取乙酸乙酯1 111 μl(相當(dāng)于1 000 mg)和氯仿8.2 μl(相當(dāng)于12 mg)，置200 ml 量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照貯備溶液。精密量取5 ml，置50 ml 量瓶中，用二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 取本品約0.5 g，精密稱定，置5 ml 量瓶中，加二甲基亞砜溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.3 專屬性試驗(yàn) 分別精密量取對(duì)照溶液和供試品溶液，按上述色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，出樣順序?yàn)橐宜嵋阴?、氯仿。兩個(gè)成分之間分離度均＞3.0，且理論塔板數(shù)均大于10 000，對(duì)稱性好，見圖1。

圖1 對(duì)照品(A)供試品(B)氣相色譜圖

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 精密量取對(duì)照貯備溶液0.5、2、3、5、7 和10 ml 分別置于50 ml 量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，制成一系列濃度的對(duì)照溶液;分別精密量取上述對(duì)照溶液1 μl，注入氣相色譜儀，依“2.1”項(xiàng)下方法測(cè)定，以對(duì)照溶液濃度為橫坐標(biāo)(X)，對(duì)照峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，進(jìn)行線性回歸。結(jié)果顯示乙酸乙酯在50 ～1 000 μg/ml、氯仿在0.6 ～12 μg/ml的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，線性方程分別為Y =7.81 ×10-1X+20.79 (r=0.999 3);Y=6.76 ×10-1X+0.16(r=0.999 6)。

2.5 重現(xiàn)性試驗(yàn) 精密量取對(duì)照溶液5 ml 置50 ml量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，配制6 份溶液，各精密量取1 μl，連續(xù)進(jìn)樣，考查重復(fù)性。乙酸乙酯和氯仿峰面積的RSD 分別為1.4%和1.8%。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取對(duì)照溶液每間隔4 h 進(jìn)樣，考查溶液的穩(wěn)定性。經(jīng)檢驗(yàn)，對(duì)照溶液在24 h 內(nèi)，各物質(zhì)的峰面積基本不變，表明24 h 內(nèi)穩(wěn)定，乙酸乙酯和氯仿峰面積的RSD 分別為1.8%和0.6%。

2.7 最小檢出限 精密量取對(duì)照貯備溶液0.5 ml 置于50 ml 量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，再進(jìn)行逐步稀釋。分別精密量取1 μl 注入氣相色譜儀，乙酸乙酯的最低檢出限為2.5 μg/ml，氯仿的最低檢出限為0.6 μg/ml。

2.8 回收率試驗(yàn) 精密量取對(duì)照貯備溶液0.4、0.5和0.6 ml 各3 份，分別置于已加入0.5 g 樣品的5 ml量瓶中，加二甲基亞砜使溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成含對(duì)照相當(dāng)于檢查限度80%、100%及120%的樣品溶液。另取本品約0.5 g，精密稱定，置5 ml 量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，作為回收率測(cè)定的空白溶液。同時(shí)配制相應(yīng)濃度的對(duì)照溶液。依“2.1”項(xiàng)下方法測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算回收率，結(jié)果見表1，乙酸乙酯和氯仿的平均回收率分別為101.6%和102.2%;RSD 分別為1.1%和1.5%。

2.9 樣品中乙酸乙酯、氯仿殘留量的檢查精密量取對(duì)照溶液及供試品溶液各1 μl，注入氣相色譜儀，照殘留溶劑測(cè)定法［1］，依法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，含乙酸乙酯和氯仿分別不得超過0.5%和0.006%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，3 批樣品均未檢出待測(cè)殘留溶劑。

表1 乙酸乙酯和氯仿回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=9)

3 討論

本次方法學(xué)實(shí)驗(yàn)采用直接進(jìn)樣的方式。二甲基亞砜對(duì)樣品溶解良好，因此確定其作為溶劑。由于恒溫實(shí)驗(yàn)分離效果不佳，因此采用程序升溫進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。根據(jù)上述項(xiàng)目的驗(yàn)證，表明本方法具有良好的專屬性、精密度、準(zhǔn)確性，驗(yàn)證范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。采用外標(biāo)法直接進(jìn)樣，方便快捷，能很好地控制樣品中殘留溶劑的檢測(cè)。因此，本法適用于丁酸丙酸氫化可的松殘留溶劑的測(cè)定。

1 中國(guó)藥典.一部.2005:附錄35

2 趙海橋，付建，劉存領(lǐng)，等.頂空氣相色譜法測(cè)定硫酸氫氯吡格雷中有機(jī)溶劑殘留量.齊魯藥事，2011，30(8):455

3 逯素珍，戴淑琴，宋敏.氣相色譜法測(cè)定葛根素衍生物有機(jī)溶劑殘留量.天津藥學(xué)，2011，23(4):20

4 張秋菊，裴付軍，郭毅.GC 法測(cè)定鹽酸索他洛爾中有機(jī)溶劑殘留量.齊魯藥事，2011，30(7):392