女貞子水煎劑對(duì)性未成熟雌性小鼠主要臟器系數(shù)的影響*

孫曙光，李玉潔，張明昊

河南中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心 鄭州 450008

女貞子是傳統(tǒng)的扶正固本藥物，為木犀科植物女貞的成熟果實(shí)干燥而成[1-2]。研究[3-4]發(fā)現(xiàn)，女貞子有調(diào)節(jié)免疫功能、抗菌、抗炎、抗腫瘤、保肝、降血糖、降血脂及抗衰老等多種藥理作用，臨床上可用于肝腎陰虛、眩暈耳鳴、咽干鼻燥、腰膝酸痛及月經(jīng)量多等多種疾病的治療。目前，以女貞子為主要處方組成的方劑具有補(bǔ)益肝腎、滋陰止血等功效，能夠緩解久病虛損、氣陰不足，促進(jìn)手術(shù)、放、化療后機(jī)體正常功能的恢復(fù)，在臨床上被廣泛采用[5-6]。女貞子是植物雌激素含量較高的幾種中藥之一。作者采用經(jīng)典的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)方法，分析給予不同劑量女貞子水煎劑的性未成熟雌性小鼠體內(nèi)主要臟器系數(shù)的變化，為中藥產(chǎn)品及保健食品的開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 21 d齡昆明種雌性小鼠60只，體質(zhì)量9～12 g，購(gòu)自河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。實(shí)驗(yàn)期間飼喂于河南中醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，一級(jí)環(huán)境條件下飼養(yǎng)，溫度(25±1)℃，控光(12 h明暗相間)，自由飲水、進(jìn)食。

1.2 藥物與試劑 女貞子購(gòu)自鄭州市張仲景大藥房(產(chǎn)自河南)，實(shí)驗(yàn)前用自來(lái)水浸泡30 min后煎煮3次，混勻并濃縮至0.88 kg/L。陽(yáng)性藥物己烯雌酚購(gòu)自上海通用藥業(yè)股份有限公司(批號(hào)009003)，實(shí)驗(yàn)前用吐溫與蒸餾水配成乳濁液。

1.3 實(shí)驗(yàn)分組 小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)2 d，隨機(jī)分為5組，每組12只，分別為陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組和女貞子低、中、高劑量組。陽(yáng)性對(duì)照組給予己烯雌酚乳濁液(35 mg/kg)，陰性對(duì)照組給予等體積的蒸餾水，女貞子低、中、高劑量組分別給予 4.4、6.6和8.8 g/kg(按人給藥量的20倍、30倍、40倍計(jì)算)，以蒸餾水稀釋。均灌胃給藥，1次/d，連續(xù)給藥8 d。

1.4 臟器取材與稱(chēng)量 小鼠給藥8 d后稱(chēng)質(zhì)量，頸椎脫臼處死，立即剖取子宮、胸腺、心臟、脾臟、腎臟及腎上腺，除去上述器官周?chē)闹窘Y(jié)締組織，吸盡臟器表面血液，用電子天平稱(chēng)量。計(jì)算各臟器質(zhì)量占體質(zhì)量的百分比，即臟器系數(shù)[7]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0進(jìn)行分析，應(yīng)用單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn)分析各組間主要臟器系數(shù)的差異，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 一般狀態(tài)觀察結(jié)果 陰性對(duì)照組小鼠狀態(tài)良好，反應(yīng)靈敏，皮毛有光澤;陽(yáng)性對(duì)照組小鼠反應(yīng)略顯遲鈍;女貞子低劑量組小鼠反應(yīng)略顯遲鈍，但狀態(tài)比陽(yáng)性組稍好;女貞子中、高劑量組動(dòng)物狀態(tài)良好，無(wú)死亡現(xiàn)象。

2.2 5組小鼠主要臟器系數(shù)比較 見(jiàn)表1。

表1 5組小鼠主要臟器系數(shù)的比較 %

3 討論

植物雌激素可以與哺乳類(lèi)動(dòng)物及人體雌激素受體相結(jié)合并將其激活，在體內(nèi)發(fā)揮雙向調(diào)節(jié)作用[8]。長(zhǎng)期以來(lái)，許多中草藥及其復(fù)方被廣泛應(yīng)用于婦科病的治療和保健，其中所含的植物雌激素的藥效作用不容忽視[9-11]。為了盡量減少內(nèi)源性雌激素分泌對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的影響，作者選用了性未成熟雌性小鼠作為樣本，并以己烯雌酚作為陽(yáng)性對(duì)照藥，以使檢測(cè)到的臟器系數(shù)更為準(zhǔn)確。該實(shí)驗(yàn)選用蒸餾水作為陰性對(duì)照品，主要是考慮實(shí)驗(yàn)藥物女貞子煎劑為水煎劑，而實(shí)驗(yàn)過(guò)程中將吐溫加入到陽(yáng)性對(duì)照藥中主要是為了增加其水溶性，便于實(shí)驗(yàn)給藥。以往的研究[12]顯示，吐溫毒性小，親水性強(qiáng)，低劑量時(shí)對(duì)小鼠體質(zhì)量及臟器系數(shù)無(wú)明顯影響。人口服吐溫4.5 ～6.0 g/d，連續(xù)28 d，甚至4 a之久亦無(wú)病態(tài)反應(yīng)[13]。實(shí)驗(yàn)中陽(yáng)性對(duì)照組和女貞子低劑量組小鼠出現(xiàn)了反應(yīng)遲鈍的現(xiàn)象，導(dǎo)致這種現(xiàn)象的原因尚不清楚，有待深入研究。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示女貞子中、高劑量組子宮系數(shù)與陰性對(duì)照組相比明顯增高，且隨給藥劑量的增大而增強(qiáng)，但女貞子低、中、高劑量組小鼠子宮系數(shù)都明顯低于陽(yáng)性對(duì)照組，提示女貞子的植物雌激素樣調(diào)節(jié)作用在一定范圍內(nèi)隨劑量的增大而增強(qiáng)。

胸腺是機(jī)體的重要淋巴器官，能夠分泌胸腺激素及激素類(lèi)物質(zhì)，其功能與免疫密切相關(guān);脾臟是機(jī)體最大的免疫器官，占全身淋巴組織總量的25%，含有大量的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，是機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的中心[14]。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，陽(yáng)性對(duì)照組小鼠胸腺、脾臟系數(shù)與陰性對(duì)照組相比分別有降低和升高的趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示陽(yáng)性藥物對(duì)小鼠免疫系統(tǒng)有一定的影響，但對(duì)胸腺和脾臟的作用不一樣，原因尚不清楚，有待研究。女貞子低、中劑量組小鼠胸腺系數(shù)與陽(yáng)性對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;女貞子高劑量組小鼠胸腺系數(shù)與陰、陽(yáng)性對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;女貞子低劑量組小鼠胸腺系數(shù)較陰性對(duì)照組增高，提示女貞子能夠在一定劑量范圍內(nèi)影響小鼠機(jī)體的免疫功能，其作用可能隨給藥量變化而變化。

為了進(jìn)一步考察女貞子在發(fā)揮藥理作用的同時(shí)是否還表現(xiàn)出一定的毒副作用，作者還記錄了各劑量組小鼠的腎臟、腎上腺、心臟、肝臟等臟器系數(shù)，結(jié)果顯示女貞子高劑量組小鼠心臟系數(shù)與陰性對(duì)照組相比明顯降低，提示女貞子隨給藥量的增大對(duì)性未成熟小鼠的心臟會(huì)產(chǎn)生一定的影響，這種影響可能與女貞子的毒副作用有關(guān)，具體作用還有待進(jìn)一步的研究證實(shí)。

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