彝族藥材巖陀顯微及薄層色譜鑒別

馬春云，沈嘉華

(云南省楚雄州食品藥品檢驗(yàn)所，云南 楚雄 675000)

巖陀為虎耳草科植物羽葉巖陀 Rodgersia pinnata Franch.的干燥根莖，味苦、澀，性平，具有解熱、祛風(fēng)、收斂之功效，用于治療感冒頭痛、風(fēng)濕骨痛、腸炎、細(xì)菌性痢疾、外傷出血[1]。巖陀藥材在彝族地區(qū)應(yīng)用廣泛，使用歷史很長(zhǎng)。1977年版《中國(guó)藥典(一部)》收載有該品種，但標(biāo)準(zhǔn)中只有性狀描述。為完善巖陀的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，筆者對(duì)巖陀進(jìn)行了顯微和薄層色譜鑒別研究，試驗(yàn)表明，兩種方法對(duì)控制該藥材的質(zhì)量都具有專屬性和可控性。

1 儀器與試藥

Sartorius BP211型電子天平;KQ250DB型數(shù)控超聲波清洗儀;Autosampler型自動(dòng)點(diǎn)樣儀;Plate HeaterⅢ型薄層色譜加熱顯色儀;TS－122H型生物組織自動(dòng)脫水機(jī);尼康E400型顯微攝像儀。巖白菜素對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)為1532－200001);巖陀藥材樣品3批，分別采自楚雄(20060703)、祿豐(20060502)、大姚(20060601)，由中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所鑒定。

2 方法與結(jié)果

2.1 顯微鑒別

橫切面顯微鑒別:將巖陀藥材切段，長(zhǎng)度約0.5 cm，用游離氨基酸(FAA)溶液固定浸泡，取出用70% 乙醇浸洗3～4次，洗去固定液的藥材經(jīng)不同濃度梯度的乙醇逐級(jí)脫水后，進(jìn)行逐級(jí)透明處理，隨即將其放入石蠟中浸蠟，浸好蠟后用相同比例的混合石蠟包埋，迅速冷卻，切片，切好的片子移至載玻片上烤片，然后脫蠟，染色，及時(shí)封固。將封固的玻片置顯微鏡下觀察，結(jié)果見圖1。木栓層15～25列細(xì)胞;皮層中偶有根跡維管束;維管束外韌形，大小不一，斷續(xù)環(huán)列，有的韌皮部外側(cè)有纖維束，木質(zhì)部?jī)?nèi)側(cè)的導(dǎo)管中常含黃棕色物質(zhì)，束內(nèi)形成層明顯;射線寬窄不一;髓部寬大，髓周有維管束散在，其韌皮部位于內(nèi)側(cè)，木質(zhì)部位于外側(cè)。薄壁細(xì)胞中含有淀粉粒及草酸鈣針晶束。

圖1 巖陀根莖橫切面圖

粉末顯微:取巖陀藥材粉末(過80目篩)少許于載玻片上，加水合氯醛2～3滴，封片后置顯微鏡下觀察，結(jié)果見圖2。木栓細(xì)胞多角形，黃棕色，壁增厚;導(dǎo)管為梯紋導(dǎo)管和螺紋導(dǎo)管，直徑24～38 μm;非腺毛由1～4個(gè)細(xì)胞組成，壁薄，外壁光滑;淀粉粒眾多，多單粒，呈類橢圓形，卵圓形，三角形或不規(guī)則形，臍點(diǎn)呈裂縫狀或人字形，多數(shù)不甚明顯，有的隱約可見層紋，直徑2～16 μm;草酸鈣針晶單個(gè)散在，長(zhǎng)30～86 μm。

圖2 巖陀粉末圖

2.2 薄層色譜鑒別

據(jù)報(bào)道，巖陀 Rodgersia pinnata Franch.含巖白菜素[2]。根據(jù)巖白菜素的提取方法，以巖白菜素作對(duì)照品進(jìn)行薄層色譜鑒別試驗(yàn)。

取巖白菜素對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。取不同產(chǎn)地的巖陀粉末各0.3 g，加乙酸乙酯 15 mL，超聲處理15 min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使其溶解，即得供試品溶液。

圖3 薄層色譜圖

照薄層色譜法[2010年版《中國(guó)藥典(一部)》附錄ⅥB]試驗(yàn)，吸取上述2種溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇(5∶4∶2)為展開劑，展開，取出晾干，噴以新制的2%三氯化鐵溶液與2%鐵氰化鉀溶液的等容混合液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，見圖3。

3 討論

橫切面特征(圖1)和粉末特征(圖2)根據(jù)實(shí)物觀察描述，顯微特征有較強(qiáng)專屬性，且重現(xiàn)性好。

從薄層色譜圖中可以看出，樣品與巖白菜素對(duì)照品相同位置的斑點(diǎn)清晰、顯色一致，不同產(chǎn)地的巖陀顯示的斑點(diǎn)穩(wěn)定，無明顯差異，用此方法控制藥材質(zhì)量，具有可控性。

[1]云南省彝族醫(yī)藥研究所.中國(guó)彝族藥學(xué)[M].昆明:云南民族出版社，2004:593.

[2]云南省藥物研究所.云南天然藥物圖鑒[M].昆明:云南科學(xué)技術(shù)出版社，2004:258.