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      VEGF及其受體的生物學特性

      2012-07-16 12:26:52鄒文萍唐國強李光明
      四川生理科學雜志 2012年3期
      關鍵詞:低氧亞型氧氣

      鄒文萍 唐國強 李光明△

      (1.四川省南充市中心醫(yī)院腫瘤防治中心,四川 南充637000;2.重慶市黔江中心醫(yī)院消化科,重慶409000)

      VEGF作為生理及病理血管生成最重要的誘導因子,有五種亞型對應三種受體有著不同的親和力,不同的功能。其中VEGFA/VEGFR-2通路誘導血管生成起到最主要的作用,同時影響血管的滲透性。血管內皮細胞的增殖、存活、出芽、遷移同樣受到該通路的誘導。VEGF在正常氧氣濃度下的組織、甚至是分泌VEGF蛋白的內皮細胞中都不能檢測到,但可以在低氧狀況下的組織或者細胞中表達大量增加。腫瘤組織微環(huán)境常常存在低氧區(qū)域,低氧誘導因子HIF-1上調VEGF的表達,進而血管生成為腫瘤組織提供更多的營養(yǎng)以滿足其生長與轉移,拮抗VEGFA/VEGFR-2通路成為控制腫瘤血管生成的重要策略。

      1 VEGF的發(fā)現(xiàn)及亞型

      1.1 VEGF以及亞型

      1983年Senger將腫瘤植入豚鼠的腹膜腔中,觀察腹水增加的情況,提取純化腹水和腫瘤組織發(fā)現(xiàn)了一種分子量為34-42千道爾頓的蛋白質,這就是VEGF(Vascular endothelial growth factor)[1]。VEGF是內皮細胞促分裂原(Mitogen),有八個外顯子,定位于6p21.3,結構類似于血小板源生長因子(Platelet-derived growth factor),有8個半胱氨酸殘基組成的同源二聚體結構[2],分成5個成員 VEGF-A、VEGF-B、VEGFC、VEGFD、以及胎盤生長因子(Placental growth factor,Pl-GF)。VEGF還有兩種類似物,由羊痘瘡病毒產生的VEGF-E,以及從蛇毒中分離的VEGF-F。這些多肽由各自的基因編碼。通過可變剪切(Alternative Splicing)得到5種VEGF mRNA編碼 VEGF的亞型,分別由121,145,165,189,206個氨基酸組成(VEGF121–206)[3-4],VEGF-A 有4種亞型 VEGF121、VEGF165、VEGF189、VEGF206,VEGF-A 在血管發(fā)生(Vasculogenesis)、血管生成(Angiogenesis)、原始內皮細胞分化(Differentiation)過程中起到關鍵性作用,故通常叫做VEGF[3]。

      1.2 區(qū)別VEGFA亞型的生物學性質

      區(qū)別VEGFA亞型的重要生物學性能就是他們與細胞表面肝磷脂(Heparin)以及硫酸鹽類肝素(Heparan-sulfate)的結合能力。VEGF121缺乏VEGF基因外顯子6和7編碼的氨基酸,不會結合在肝磷脂或者細胞外基質上[5]。VEGF165與VEGF121區(qū)別在于增加了由VEGF基因外顯子7編碼的44個縮氨酸,并且給予 VEGF165肝磷脂結合的能力[5-6]。VEGF145的特征在于外顯子6編碼的21個縮氨酸,表達于女性生殖系統(tǒng)腫瘤中[4]。VEGF189和VEGF206包含了外顯子6和7編碼的多肽,顯示出相對于VEGF145、VEGF165與肝磷脂以及硫酸鹽類肝素更好的結合能力。VEGF121、VEGF145、VEGF165這三種分泌VEGF的類型在生物體內誘導內皮細胞的增殖[3]。VEGF121和VEGF165是分泌VEGF蛋白的主要類型。當VEGF與肝磷脂結合就會連接在細胞表面或細胞外基質上,然后釋放像堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)一樣的血管原,促進血管生成。另一方面增加了血管的通透性,引起血漿蛋白、纖維蛋白原滲出,細胞外基質發(fā)生改變。

      1.3 VEGF-A

      VEGFA結合在VEGFR-2上,是血管生成的主要的信號通路,誘導內皮細胞的增殖、存活、遷移。并增加內皮細胞的滲透性[7]。同時控制血管的出芽、血管網(wǎng)絡的構建。受到VEGFA/VEGFR-2刺激后,內皮細胞周圍局部基底膜分解,位于出芽頂端的內皮細胞(Endothelial tip cells),有豐富的絲狀偽足(Filopodial),偽足延伸形成出芽,并構成遷移,而莖細胞跟隨尖端細胞形成血管內腔,猶如樹枝的長出。內皮細胞遷移依賴VEGFA的梯度(Gradient),而內皮細胞增殖依賴VEGFA的濃度(Concentration)[8]。

      1.4 VEGF-B與 PlGF

      VEGF-B與PlGF均結合在VEGFR-1上,刺激病理狀況下的血管生成,而對生理狀況下的血管生成作用很小,人類PlGF有四種亞型,主要表達在胎盤、心臟、肺中。人類VEGF-B有兩種亞型,高表達在心臟、骨骼肌、褐色脂肪中,在局部缺血、炎癥反應、創(chuàng)傷修復病理狀況下,該信號通路刺激血管生成與動脈形成。PlGF在病理狀況下促進血管生成,而在生理狀況下則不明顯的原因在于:生理狀況下,胎盤中PlGF與受體VEGFR-1結合不夠緊密且呈低水平表達,不能取代VEGF的作用。在病理狀況下顯著上升;在腫瘤以及低氧條件下,PlGF與VEGF形成異二聚體(VEGF/PlGF heterodimers)增加血管原對VEGF的反應性[9]。

      1.5 VEGF-C與 VEGF-D

      VEGF-C和 VEGF-D只結合在 VEGFR-3上,誘導淋巴內皮細胞的表達以及淋巴管內皮細胞的出芽生長。VEGF-C通過促進腫瘤淋巴管生成,以及播散到局部淋巴結,增加腫瘤遠處轉移的風險[10]。

      2 VEGF的三個受體

      VEGF有三種跨膜受體 VEGFR-1(Flt-1)、VEGFR-2(在人體中稱為 KDR,小鼠中稱為Flk-1)、VEGFR-3(Flk-4)。所有受體在細胞外擁有7個類似免疫球蛋白的區(qū)域(Immunoglobulinlike domains)以及在細胞內一個絡氨酸激酶區(qū)域,故認為是屬于絡氨酸激酶受體家族亞科(Subfamily)[11],VEGFR-1主要表達在造血干細胞、單核細胞、巨噬細胞上,VEGFR-2主要表達在血管內皮細胞,腫瘤細胞也表達這兩種受體。VEGFR-3主要表達在淋巴內皮細胞。VEGF亞型對于三種受體有不同的親和力,VEGF-A 主要刺激 VEGFR-1和 VEGFR-2,VEGF-B和PlGF只結合在 VEFGR-1上,VEGF-C和 VEGF-D只結合在VEGFR-3上。VEGF-A165能夠結合在肝磷脂上參與VEGFA介導的刺激VEGF受體的過程[11-12]。

      3 低氧誘導VEGF表達

      3.1 HIF-1上調 VEGF的表達

      VEGF的表達受多種因素調節(jié):低氧、生長因子、p53、雌激素、TSH、腫瘤、一氧化氮(NO)等。低氧被認為是刺激血管重塑、改變細胞通透性、血管再生的最重要的因素。低氧轉錄因子(Hypoxia-specific transcription factor,HIF-1)被認為是上調VEGF的主要調節(jié)因子[14],該因子是一個具有 PAS(Basic-h(huán)elix-loop-h(huán)elix(bHLH)-PAS)環(huán)狀結構的異二聚體,包括三個亞單位:HIF-1α、HIF-2α、HIF-1β。HIF-α在氮端(N-)以及碳端(C-)分別有一個感受缺氧信號的轉錄活性區(qū)域,氧氣對HIF-1活性的調節(jié)主要依靠 HIF-α;而 HIF-1β只有在碳端(C-)有一個轉錄活性區(qū)域,對氧氣變化不敏感。C末端有氧依賴降解區(qū)(Oxygen-dependent degradation domain,ODDD),由脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸(Pro/Ser/Thr)組成。HIF的受上游脯氨酰-4-羥化酶(Prolyl-4-h(huán)ydroxylases,PHDs)以及抑制因子 FIH(Factor inhibiting HIF)的調節(jié)。正常氧氣濃度下,脯氨酰-4-羥化酶(PHDs)羥化HIF-α位于C端的氧依賴降解區(qū)(ODDD)的四個保守脯氨酸殘基,(HIF-1α的脯氨酸殘基 402/564(Pro402/Pro564),HIF-2α的脯氨酸殘基405/531(Pro405/Pro531))脯氨酸殘基羥基化后與腫瘤抑制蛋白(pVHL Von Hippel Lindau protein)結合,募集泛素蛋白,組成泛素連接蛋白酶復合體發(fā)生泛素化作用,HIF-α蛋白則降解;另外位于C端的轉錄活性區(qū)域被FIH結合,使該區(qū)域的天門冬氨酰羥基化,從而抑制HIF-α的轉錄活性。PHDs酶的功能需要氧氣達到一定濃度,然而在低氧條件下,脯氨酸殘基不能羥基化,HIF-α蛋白就穩(wěn)定了,并在細胞內快速聚集并轉移到核內,與HIF-β結合成異二聚體,結合 缺 氧 反 應 元 件 (Hypoxia response elements,HRE)5′-RCGTG-3′上調下游基因 VEGF的轉錄[15]。VEGF基因上存在一個缺氧反應元件,低氧時該區(qū)域受到HIF-1異二聚體蛋白的作用,VEGF轉錄以及其受體表達增加,并抑制VEGF mRNA降解酶的活性,此時VEGF mRNA的半衰期增長,穩(wěn)定性提高[16]。

      圖1 VEGF及其受體關系[13]

      3.2 體外低氧模型的建立

      體外培養(yǎng)的細胞主要可以建立兩種低氧模型,物理與化學低氧模型。物理低氧模型指的是用特殊的三通道培養(yǎng)箱,通過調節(jié)氧氣、二氧化碳、氮氣的濃度來達到模擬體內腫瘤細胞低氧的生理狀況;化學低氧指的是,正常氧氣濃度下,金屬離子Co2+、Ni2+通過置換血紅蛋白內的氧感受器Fe2+,導致氧氣不能結合在Fe2+上,故細胞在正常氧氣濃度下,不能結合氧氣,造成細胞低氧。由此可以在體外培養(yǎng)的細胞中誘導腫瘤低氧模型建立[17]。

      4 VEGF與腫瘤

      4.1 腫瘤的低氧微環(huán)境

      腫瘤組織微環(huán)境經(jīng)常存在低氧區(qū),原因在于腫瘤脈管網(wǎng)絡有幾個區(qū)別于正常脈管系統(tǒng)的獨特病理特征:高密度、扭曲、動靜脈缺乏清楚的分離、有漏隙、更高滲透性、管壁缺乏外膜細胞,由不完整的基底膜覆蓋,腫瘤血管壁由形狀像馬賽克一樣的細胞(Mosaic cell)組成;而正常血管壁由內皮細胞與外膜細胞(Mural cell)組成,有完整的基底膜覆蓋,血管內物質不容易滲出[16]。腫瘤組織這種不同于正常血管的特征使本身高代謝,高生長速率的惡性腫瘤血流灌注差,組織液的高壓力,酸毒癥,最終造成缺氧,同時腫瘤細胞的增生速度遠大于新生血管內皮細胞的生成速度,加重缺氧[18]。缺氧導致快速增長的腫瘤組織中央核心壞死,同時腫瘤組織為了生存侵入周圍組織,最終轉移形成[18-19]。低氧通過誘導VEGF的高表達,促進腫瘤血管生成,更增加了腫瘤轉移的風險,Lee等[20]將含有VEGF基因片段的載體轉染小鼠的T241纖維瘤細胞,植入斑馬魚的胚胎(Zebrafish embryos)中,在常氧與低氧環(huán)境中培養(yǎng),結果低氧組見到腫瘤的廣泛播散、局部與遠處轉移。常氧組并沒見到這些現(xiàn)象。

      4.2 腫瘤的血管生長

      許多腫瘤處于原發(fā)病灶數(shù)年無血管狀態(tài),即腫瘤的無血管期,腫瘤組織很少超過2~3mm3,此時腫瘤處于休眠狀態(tài)。依靠鄰近組織血管獲取營養(yǎng)和氧氣,細胞處于穩(wěn)定更新,適應宿主環(huán)境,一旦腫瘤組織內某亞群細胞表型受細胞因子激發(fā),血管形成,腫瘤組織獲得足夠的營養(yǎng)物質,即進入快速增長的有血管期,同時血管也促進腫瘤侵入和轉移[21]。

      血管發(fā)生(Vasculogenesis)和血管生成(Angiogenesis)必須要有VEGF的存在。在胚胎形成期,血管形成分兩個階段,血管發(fā)生:原始祖細胞分化成內皮細胞;血管生成:新生的毛細血管從已經(jīng)存在的血管中以出芽的形式生長出來。在正常的成年哺乳動物只有一種血管生成方式即血管生成,內皮細胞周圍局部基底膜分解,內皮細胞侵入基質。這種侵入同時伴隨著內皮細胞的增殖,形成遷移列(Migrating column)內皮細胞改變形狀,彼此形成環(huán)狀,新生的血管腔就形成了[22]。腫瘤組織的血管形成VEGF同樣必不可少,VEGFA/VEGFR-2信號通路起到最重要的作用,影響瘤組織內皮細胞的增殖、存活、出芽、遷移。影響腫瘤血管的滲透性[7]。在缺乏VEGF蛋白刺激的內皮細胞,還能依靠自分泌VEGF蛋白來保證其完整性與存活。VEGF-C/VEGF-D介導腫瘤組織淋巴管的生成,并促進腫瘤組織的轉移。

      5 展望

      腫瘤目前的治療方式主要有手術、化療、放療、生物治療。Folkman[23]1971提出抗血管生成將成為一個腫瘤治療的新策略,從此腫瘤血管就成為腫瘤治療的新靶點,稱為分子靶向治療。腫瘤組織由于血管紊亂,不同于正常血管造成瘤組織缺氧,誘導HIF-1進而上調VEGF的表達,增加血管的生成,腫瘤血管的生成不僅僅是給腫瘤組織提供營養(yǎng)物質,同時為腫瘤的播散、轉移提供條件,拮抗VEGF的表達就成為控制腫瘤血管生成的一個途徑。貝伐單抗(Bevacizumab)是一種人源化的鼠抗VEGF單抗,通過結合VEGF-A阻止其與受體VEGFR-2的結合,達到拮抗血管生成的目的。2004年2月26日獲得FDA(Food and Drug Administration)的批準,是美國第一個獲得批準上市的拮抗腫瘤血管生成的藥物,在治療轉移性結腸癌中聯(lián)合化療藥物提高中位生存時間。而后拮抗血管生成的受體絡氨酸激酶抑制藥物舒尼替尼(Sunitinib)、索拉菲尼(Sorafenib)出現(xiàn),可以用于腎癌,胃腸道等腫瘤的治療,目前雖然腫瘤的臨床以及科研治療中并沒有收到特別好的效果,但腫瘤治療仍然有很多值得關注。

      1 Senger DR,Galli SJ,Dvorak AM,et al.Tumor cells secrete a vascular permeability factor that promotes accumulation of ascites fluid[J].Science,1983,219(4587):983-985.

      2 Vincenti V,Cassano C,Rocchi M,et al.Assignment of the vascular endothelial growth factor gene to human chromosome 6p21.3.[J].Circulation,1996,93(8):1493-1495.

      3 Houck KA,F(xiàn)errara N,Winer J,et al.The Vascular endothelial growth factor family-identification of a fourth molecular species and characterization of alternative splicing of RNA[J].Mol Endocrinol,1991,5(12):1806-1814.

      4 Poltorak Z,Cohen T,Sivan R,et al.VEGF145,a secreted VEGF form that binds to extracellular matrix[J].J Biol Chem,1997,272(11):7151-7158.

      5 Park JE,Keller GA,F(xiàn)errara N.Vascular endothelial growth factor(VEGF)isoforms-differential deposition into the subepithelial extracellular matrix and bioactivity of extracellular matrix-bound VEGF[J].Mol Biol Cell,1993,4(12):1317-1326.

      6 Cohen T,Gitay-Goren H,Sharon R,et al.VEGF121,a vascular endothelial growth factor(VEGF)isoform lacking heparin binding ability,requires cell surface heparan sulfates for efficient binding to the VEGF receptors of human melanoma cells[J].J Biol Chem,1995,270(19):11322-11326.

      7 Shibuya M,Claesson WL.Signal transduction by VEGF receptors in regulation of angiogenesis and lymphangiogenesis[J].Exp Cell Res,2006,312(5):549-560.

      8 Gerhardt H,Golding M,F(xiàn)ruttiger M.VEGF guides angiogenic sprouting utilizing endothelial tip cell filopodia[J].J Cell Biol,2003,161(6):1163-1177.

      9 Lohela M,Bry M,Tammela T,et al.VEGFs and receptors involved in angiogenesis versus lymphangiogenesis[J].Curr Opin Cell Biol,2009,21(2):154-165.

      10 Das S,Ladell DS,Podgrabinska S,et al.Vascular endothelial growth factor-C induces lymphangitic carcinomatosis,an extremely aggressive form of lung metastases[J].Cancer Res,2010,70(5):1814-1824.

      11 Takahashi H,Shibuya M.The vascular endothelial growth factor(VEGF)/VEGF receptor system and its role under physiological and pathological conditions[J].Clin Sci(Lond),2005,109(3):227-241.

      12 Ferrara N,Gerber HP,LeCouter J.The biology of VEGF and its receptors[J].Nat Med,2003,9(6):669-676.

      13 Takahashi S.Vascular endothelial growth factor(VEGF),VEGF receptors and their inhibitors for antiangiogenic tumor therapy[J].Biol Pharm Bull,2011,34(12):1785-1788.

      14 Belaidi E,Pauline C,Beguin,et al.Delayed myocardial preconditioning induced by cobalt chloride in the rat:HIF-1αand iNOS involvement[J].Fundam Clin Pharmacol,2011,26(4):454-462.

      15 Bedogni B,Powell MB.Hypoxia melanocytes and melanoma-Survival and tumor development in the permissive microenvironment of the skin[J].Pigment Cell Melanoma Res,2009,22(2):166-174.

      16 Cao Y.Tumor angiogenesis and molecular targets for therapy Front[J].Front Biosci,2009,14(1):3962-3973.

      17 Borenstein X,F(xiàn)iszman GL,Blidner A,et al.Functional changes in murine mammary cancer cells elicited by CoCl2-induced hypoxia[J].Nitric Oxide,2010,23(3):234-241.

      18 Du R,Lu KV,Petritsch C,et al.HIF-1αinduces the recruitment of bone marrow-derived vascular modulatory cells to regulate tumor angiogenesis and invasion[J].Cancer Cell,2008,13(3):206-220.

      19 Erler JT,Bennewith KL,Cox TR,et al.Hypoxia-induced lysyl oxidase is a critical mediator of bonemarrow cell recruitment to form the premetastatic niche[J].Cancer Cell,2009,15(1):35-44.

      20 Lee SL,Rouhi P,Dahl Jensen L,et al.Hypoxia-induced pathological angiogenesis mediates tumor cell dissemination,invasion,and metastasis in a zebrafish tumor model[J].Proc Natl Acad Sci USA,2009,106(46):19485-19490.

      21 Dudek A,Gupta K,Ramakrishnan S,et al.Tumor angiogenesis[J].J Oncol,2010,10(10):1155-1156.

      22 Hanahan D,F(xiàn)olkman J.Patterns and emerging mechanisms of the angiogenic switch during tumorigenesis[J].Cell,1996,86(3):353-364.

      23 Folkman J.Tumor angiogenesis:therapeutic implications[J].N Engl J Med,1971,285(21):1182-1186.

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