雛雞喹乙醇中毒血液生化指標測定

劉沫飛，徐世文，吳發(fā)興，李 蕾，，吳 憲，曲志娜＊

（1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150036；2.中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東 青島 266000；3.齊齊哈爾市動物醫(yī)院，黑龍江 齊齊哈爾 161000）

喹乙醇（olaquindox）屬喹啉類藥物，因其具有抗菌促生長作用且價格低廉，曾經(jīng)在養(yǎng)殖業(yè)中作為飼料添加劑被廣泛應(yīng)用[1]。但雞對喹乙醇敏感，易發(fā)生中毒，并造成雞只死亡或禽產(chǎn)品喹乙醇殘留過量而危及公共衛(wèi)生健康[2]。目前，有關(guān)中毒癥狀及組織殘留方面的報道較多，胡小權(quán)等[3]報道喹乙醇急性中毒的臨床癥狀主要有，病禽突然精神不振，不愿活動，羽毛松亂，采食減少或廢絕，成半癱瘓或全癱狀態(tài)；流涎，排黃色水樣稀糞；雞喙、冠、顏面及雞趾呈紫黑色，呼吸困難，蛋雞產(chǎn)蛋量急劇下降。孫永學(xué)等[4]報道剖檢可見消化道尤其是十二指腸彌漫性出血，肝腫大，質(zhì)脆，心冠脂肪及心外膜有出血點，泄殖腔嚴重出血。王濤等[5]報道剖檢可見，輸尿管有尿酸鹽沉積。腺胃充血腫脹，乳頭呈褐色，黏膜呈黃色，部分脫落。肌胃角膜下有出血小點及局灶性潰瘍。急性中毒時對其血液生化指標的影響卻報道較少，曾振靈[6]用高效液相色譜法證實喹乙醇在中毒雞的肝腎組織中有殘留。本文通過檢測雛雞喹乙醇急性中毒時血清無機離子（Ca2＋、PO43－、Na＋、K＋）和肝功能等生化指標，探討喹乙醇急性中毒對其的影響，為研究喹乙醇中毒機理及其安全評價提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗用動物 健康且體重相近的5日齡伊莎公雞雛200只。

1.1.2 試劑 喹乙醇，含量＞98%，購自湖北廣濟制藥有限公司；鈣離子（Ca2＋）檢測試劑盒、磷離子（PO43－）檢測試劑盒、鈉離子（Na＋）檢測試劑盒、鉀離子（K＋）檢測試劑盒、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST／GOT）測定試劑盒和谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT／GPT）測定試劑盒，均購于南京建成科技有限公司；總蛋白（TP）試劑盒、白蛋白（ALB）試劑盒和堿性磷酸酶（ALP）試劑盒，購于長春匯力生物技術(shù)有限公司。

1.2 方法

1.2.1 動物分組與采樣 將健康且體重相近的5日齡伊莎公雞雛200只，隨機分為試驗組和對照組，對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組飼喂基礎(chǔ)飼糧＋喹乙醇150mg／kg。在染毒后的第5、10、15天進行心臟采血，常規(guī)分離血清，置于4℃冰箱，待用。

1.2.2 測定方法 使用鈣離子（Ca2＋）檢測試劑盒、磷離子（PO43－）檢測試劑盒、鈉離子（Na＋）檢測試劑盒、鉀離子（K＋）檢測試劑盒、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST／GOT）測定試劑盒和谷丙轉(zhuǎn)氨酶 （ALT／GPT）測定試劑盒，總蛋白（TP）試劑盒、白蛋白（ALB）試劑盒和堿性磷酸酶（ALP）試劑盒對血清進行檢測。測定方法均按照試劑盒說明書操作來測定它們的濃度。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理 所有數(shù)據(jù)用SPSS15.0進行統(tǒng)計分析。用單因素方差分析方法（ANOVA）對三個生長階段，不同組別雞血清中各離子含量進行組間差異的統(tǒng)計學(xué)分析，各組數(shù)據(jù)均以ˉx±SD表示。

2 結(jié)果

2.1 血清Ca2＋、PO43－、Na＋、K＋含量測定結(jié)果

由表1可以看出，Ca2＋在各時間點，試驗組含量都低于對照組，15d差異顯著（P＜0.05）。PO43－含量在第5d，試驗組高于對照組，差異不顯著（P＞0.05），10d和15d，試驗組含量低于對照組，15d差異顯著（P＜0.05）。Na＋在各時間點，試驗組含量都低于對照組，15d差異顯著（P＜0.05）。K＋在各時間點，試驗組含量都高于對照組，15d差異顯著（P＜0.05）。

2.2 血清ALB、TP、ALP、GOT、GPT含量測定結(jié)果

由表2可以看出，ALB在各時間點，試驗組含量都低于對照組，15d差異顯著（P＜0.05）。TP在各時間點，試驗組含量都低于對照組，10d和15 d，試驗組與對照組差異顯著（P＜0.05）。ALP在各時間點，試驗組含量都高于對照組，差異都不顯著（P＞0.05）。GOT、GPT在各時間點，試驗組含量都高于對照組，15d差異顯著（P＜0.05）。

表1 血清Ca2＋、PO43－、Na＋、K＋離子含量測定結(jié)果Table1 The determination result of Ca2＋ ，PO43－ ，Na＋ ，K＋in serum

表2 血清 ALB、TP、ALP、GOT、GPT含量測定Table2 The determination results of ALB，TP，ALP，GOT，GPT in serum

3 討論

據(jù)有關(guān)文獻報道[7]，喹乙醇中毒的發(fā)生有兩種情況，一種是一次性大量攝入而產(chǎn)生的急性中毒；另一種是按常規(guī)劑量飼喂，因飼喂時間過長而產(chǎn)生的蓄積性中毒。據(jù)董漓波報道[8]，雞內(nèi)服喹乙醇的半數(shù)致死量（LD50）為304mg／kg，故本文中應(yīng)用的一次內(nèi)服150mg／kg，已達到雞中毒水平。據(jù)孫永學(xué)報道[9]，喹乙醇的吸收半衰期為0.63h±0.26h，分布半衰期為1.12h±0.34h，消除半衰期為2.26h±3.02h，說明藥物的吸收分布比較快，但清除比較慢，從而延長了喹乙醇在機體內(nèi)的滯留時間。喹乙醇易產(chǎn)生蓄積性中毒，本試驗結(jié)果顯示，在染毒后5 d和10d，試驗組血清中Ca2＋、PO43－、Na＋、ALB、TP、ALP、GOT、GPT含量與對照組差異不顯著，在染毒后15d，試驗組與對照組差異顯著，從而證實喹乙醇的蓄積毒性。

正常情況下，體內(nèi)的各種微量元素之間保持著一定的比例關(guān)系和濃度范圍，各種微量元素之間有協(xié)同、頡頏作用，微量元素之間的協(xié)同與頡頏關(guān)系，直接影響著微量元素乃至整體營養(yǎng)素的代謝與利用。喹乙醇中毒作用主要是損傷腎上腺[10－11]，中毒畜禽因腎上腺受損，皮質(zhì)激素（醛固酮類激素）分泌紊亂，導(dǎo)致體內(nèi)電解質(zhì)代謝障礙[12]，從而引起組織器官出血、變性、壞死等。本試驗結(jié)果顯示，喹乙醇中毒時，血清Ca2＋、PO43－含量降低，可能是喹乙醇中毒損害腎臟，繼發(fā)于腎小管的損傷所致；血清中Na＋含量降低，K＋含量升高，可能是喹乙醇中毒導(dǎo)致腎上腺皮質(zhì)損傷使醛固酮分泌減少[12]，從而導(dǎo)致低血鈉和高血鉀。

谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是對肝臟疾病的診斷、病變程度的估計和疾病治療前后對比的一向較為重要的檢驗項目。它們存在于各個臟器，主要在肝臟。正常時血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的含量很少，當(dāng)肝臟患有疾病而處于病理狀態(tài)時，肝細胞受到破壞，肝細胞中的谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶則大量釋放至血清中，因而使血清中的谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量升高[13]。汪開毓等[14]試驗結(jié)果顯示，鯉魚喹乙醇中毒時GOT和GPT含量都升高，本試驗結(jié)果顯示雛雞喹乙醇中毒時，GOT和GPT含量都升高，與其試驗結(jié)果一致，推測可能是因為喹乙醇中毒對肝臟造成損傷，導(dǎo)致這兩種酶進入血液，引起血清中GOT和GPT含量升高。

堿性磷酸酶（ALP）的活性測定是臨床上最常見的測定項目之一。血液中的ALP主要來自于肝臟和骨骼，因此在這些器官發(fā)生病變時血清ALP活力會明顯增高。ALP活力測定可作為診斷某些疾病的輔助指標。郭小權(quán)等報道[15]，崇仁麻雞喹乙醇中毒時雞體內(nèi)的血清堿性磷酸酶活性有上升趨勢，本試驗采用伊莎公雞雛所得結(jié)果與郭小權(quán)等試驗結(jié)果相一致。喹乙醇中毒能引起肝臟損傷[16]，導(dǎo)致堿性磷酸酶進入血液，引起堿性磷酸酶含量升高。

李文平等[17]試驗結(jié)果顯示，喹乙醇中毒時雞的血清中總蛋白、白蛋白含量有降低趨勢，本試驗結(jié)果與其一致。肝臟疾病時肝臟合成蛋白質(zhì)的功能發(fā)生障礙，從而引起血清中蛋白含量的改變；而炎癥、肝細胞破壞和抗原性改變，刺激免疫系統(tǒng)而使血清中球蛋白含量改變，以及由此引起的血清中白蛋白／球蛋白比率的改變。喹乙醇中毒時肝腎功能損害，機體蛋白質(zhì)合成出現(xiàn)障礙和蛋白質(zhì)從腎臟排出發(fā)生紊亂，從而導(dǎo)致血清中蛋白質(zhì)含量降低。

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