中藥復方對衰老模型小鼠部分組織中GSH－Px活性的影響

寧 鵬

（青海大學農牧學院動物醫(yī)學系，青海 西寧 810016）

衰老是生物體在生命周期中隨年齡增長而發(fā)生的全身組織、器官功能減退和穩(wěn)態(tài)下降的過程。隨著衰老的發(fā)生，動物表現出生產性能下降，抵抗力下降，血液中一些酶的活性降低等情況[1]。

谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）是機體內廣泛存在的一種重要過氧化物分解酶，它在細胞內能夠清除過氧化物，使其分解成對機體無害的水，阻斷脂質過氧化鏈鎖反應，從而起到保護細胞膜結構和功能的作用。谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）含量降低，將會導致細胞內過氧化物堆積，細胞受損，動物機體出現一系列病理性反應，如抵抗力下降、免疫力下降、機體代謝障礙等[2－5]，從而加速動物機體的衰老。因此，谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）含量變化與機體的衰老有密切的關系 。

本試驗通過建立小鼠亞急性衰老模型，觀察中藥復方對亞急性衰老小鼠部分組織中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）活性的影響，從而研究中藥復方的抗氧化作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 中藥復方 將當歸40g，川芎40g，桃仁20 g，紅花20g，益母草60g，炮姜20g，甘草15g，過濾出的藥液在電爐上濃縮至500mL，再加紅糖100 g，黃酒50mL，牦牛胎盤粉20g。

1.1.2 實驗動物 昆明種小鼠60只，6周齡～8周齡，雌雄各半，由青海省實驗動物中心提供。

1.1.3 試劑 D－半乳糖，上海藍季科技發(fā)展有限公司產品，批號：080711；GSH－Px試劑盒（批號：091231），蛋白定量測試盒（批號：091231），均為南京建成生物工程研究所產品。

1.2 方法

1.2.1 實驗動物分組及處理 小鼠常規(guī)飼養(yǎng)3d，觀察無異常，備用。將小鼠隨機分為D－半乳糖藥物組、D－半乳糖對照組和對照組，每組20只；D－半乳糖藥物組和D－半乳糖對照組小鼠每天背部皮下注射D－半乳糖0.15mL，對照組注射生理鹽水0.2mL；D－半乳糖藥物組每日口腔灌服中藥復方0.2mL，D－半乳糖對照組和對照組灌服生理鹽水0.2mL，給藥前分別稱取各組小鼠體重，15d后再分別稱取各組小鼠體重，然后脫頸椎處死所有小鼠，取心肌、肝臟、脾臟、肺臟和腎臟備用。

1.2.2 組織勻漿的制備 取小鼠的心肌、肝臟、脾臟、肺臟和腎臟各0.3g，制成100g／L組織勻漿備用。

1.2.3 GSH－Px活性的測定 按照試劑盒說明分別測定小鼠心肌、肝臟、脾臟、肺臟和腎臟中GSHPx活力。

1.2.4 統計分析 試驗結果用平均數±標準差（ˉX±SD）表示，使用SPSS 11.5統計學軟件進行方差分析。

2 結果

2.1 中藥復方對衰老小鼠體重的影響

15d后D－半乳糖藥物組和對照組與D－半乳糖對照組相比差異顯著（P＜0.05），各組小鼠體重變化結果見表1。

2.2 中藥復方對衰老小鼠部分組織中GSH－Px活性的影響

和D－半乳糖對照組相比，中藥復方能夠顯著提高小鼠肝臟、腎臟中谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）的活性（P＜0.05），極顯著的提高肺臟、心肌和脾臟中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）的活性（P＜0.01）。中藥復方對衰老小鼠部分組織中GSH－Px活性的影響見表2。

表1 衰老小鼠給藥前后體重變化Table1 Weight changes before and after administrat in aging mice

3 討論

以D－半乳糖制備亞急性衰老模型的方法是目前經常選用的建模方法[6]，該模型使機體細胞內半乳糖濃度增高，在醛糖還原酶催化下還原成半乳糖醇，這種物質不能被細胞進一步代謝而堆積體內影響正常滲透壓，導致細胞代謝紊亂，破壞機體抗氧化防御系統使自由基積聚，導致衰老[7－8]。在衰老機制研究中[9－10]，超氧自由基學說已受到廣泛的關注，動物衰老的過程中體內超氧自由基含量不斷增多，自身的抗氧化系統活性降低是主要原因之一。

GSH－Px是機體內廣泛存在的一種重要的催化分解過氧化氫（H2O2）的酶，它的活性升高能夠降低脂類過氧化物的形成，分解過多的過氧化物，減輕組織細胞過氧化損傷，起到保護細胞膜結構和功能完整性的作用[11]。

表2 中藥復方對衰老小鼠GSH－Px活性的影響Table2 The effect of traditional Chinese medicine compound on the activity of GSH－Px

GSH－Px活性降低機體清除自由基代謝產物的能力的下降，標志著機體衰老的加快和老年疾病的增多。因此，小鼠機體內GSH－Px活性的高低，可作為衡量該制劑抗氧化功能的重要指標之一[12]。本試驗結果表明，中藥復方能提高小鼠組織中GSH－Px的活性，具有較強的抗氧化和抗衰老的作用。

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