豬衣原體病的診斷

段正贏，郭 銳，楊克禮，劉澤文，周丹娜，袁芳艷，梁望旺，田永祥＊

（1.湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，湖北 武漢 430064；2.動(dòng)物胚胎工程及分子育種湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430064）

豬衣原體?。⊿wine chlamydiosis）主要是由豬衣原體（Chlamydia suis）感染豬引起的一種慢性接觸性傳染病，臨床表現(xiàn)妊娠母豬流產(chǎn)、早產(chǎn)和產(chǎn)弱仔；新生仔豬肺炎、腸炎、胸膜炎、心包炎、腦膜腦炎、多關(guān)節(jié)炎和結(jié)膜炎；種公豬睪丸炎等癥狀。常因菌株毒力，豬性別、年齡、生理狀況和環(huán)境的變化而出現(xiàn)不同的征候群。豬群一旦感染本病，要清除十分困難，康復(fù)豬群可長期帶菌，成為幼齡豬群的主要傳染源，豬場內(nèi)活動(dòng)的野鼠和禽鳥可能是本病的自然散毒者。該病部分病例與豬偽狂犬病、豬乙型腦炎、豬瘟等病有相似癥狀，給診斷和防治增加了難度。豬衣原體引起的流產(chǎn)和仔豬衣原體性肺炎－腸炎對集約化養(yǎng)豬業(yè)危害相當(dāng)嚴(yán)重[1]。衣原體病也是一種人畜共患傳染病，該病原體可以感染190多種鳥、幾十種哺乳動(dòng)物及人，具有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義[2]。

2011年，湖北省A、B兩個(gè)豬場發(fā)生了以懷孕母豬流產(chǎn)、適繁母豬返情為特點(diǎn)的疾病，兩個(gè)豬場母豬群的數(shù)量分別為210頭 和80頭，均按本場的免疫程序?qū)δ肛i群接種過乙腦疫苗、豬瘟疫苗及豬偽狂犬病疫苗，未注射豬藍(lán)耳病疫苗、豬圓環(huán)病毒疫苗及衣原體疫苗。具體的發(fā)病情況見表1。經(jīng)臨床癥狀結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，診斷為衣原體病。

表1 豬場發(fā)病情況Table1 The incidence of pig fields

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試樣品 A場采集了21頭母豬的血樣及5頭流產(chǎn)胎兒，B場采集了5頭發(fā)病豬的血樣。

1.1.2 主要試劑 衣原體間接血凝試驗(yàn)（IHA）[3]和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）為本單位自制；JEV ELISA抗體檢測試劑盒購自武漢科前公司；CSF ELISA抗體檢測試劑盒、PRVgB／gE鑒別ELISA抗體檢測試劑盒購自美國IDEXX公司；DNA、RNA提取試劑盒、Taq DNA聚合酶，均購自TAKARA公司；RNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒，購自Fermantas公司；引物均由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。

1.2 方法

衣原體、日本腦炎病毒（JEV）、豬瘟病毒（CSFV）、豬細(xì)小病毒（PRV）及豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）抗體及病原檢測根據(jù)目的不同分別應(yīng)用IHA、ELISA、PCR及RT－PCR方法（表2），試驗(yàn)方法均按試劑盒說明書及分子克隆實(shí)驗(yàn)指南（第三版）[4]操作。

表2 抗體及病原檢測方法Table2 Detection methods of antibody and pathogen

2 結(jié)果

2.1 抗體檢測結(jié)果

由表3可知，CSFV 抗體、PRV－gB抗體、PRV－gE抗體、衣原體IHA抗體、衣原體ELISA抗體、JEV抗體陽性率分別為 88.5%（23／26）、80.8%（21／26）、0（0／26）、84.6%（22／26）、88.5%（23／26）、80.8%（21／26）。結(jié)果表明，豬群未免疫接種衣原體疫苗，檢測到抗體陽性樣品存在，說明豬群感染過衣原體。

2.2 病原檢測結(jié)果

由表4可知，CSFV、衣原體、PRRSV病原檢測陽性率分別為0（0／26）、69.2%（18／26）、0（0／26）。結(jié)果表明，衣原體PCR檢測有18份陽性，說明豬群存在衣原體病原。

表3 豬場抗體檢測結(jié)果Table3 Antibody test results in pig fields

表4 豬場病原檢測結(jié)果Table4 Pathogen test results in pig fields

3 討論

實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果顯示，衣原體IHA抗體和ELISA抗體陽性份數(shù)為22份和23份，經(jīng)PCR檢測衣原體陽性份數(shù)為18份，A場的JEV抗體陽性率為33.3%，其他疾病經(jīng)抗體和病原檢測未見異常，結(jié)合臨床癥狀，診斷為豬衣原體感染。

針對兩個(gè)豬場的實(shí)際感染情況，經(jīng)采取綜合防控措施，疫情得到了有效控制。

加強(qiáng)消毒，隔離病豬，切斷傳播媒介。對發(fā)病豬做好隔離工作，避免病原傳染給健康豬只。做好豬場衛(wèi)生清潔工作，全場實(shí)行帶豬消毒。欄舍徹底清洗，用20g／L氫氧化鈉浸泡消毒。加強(qiáng)產(chǎn)房、場區(qū)環(huán)境消毒，以有效控制發(fā)生衣原體接觸傳染的機(jī)會(huì)。將流產(chǎn)胎兒及分娩排泄物集中無害化處理，保證產(chǎn)房衛(wèi)生，以防新生仔豬感染本病。做好滅鼠工作，同時(shí)要防止其他動(dòng)物如貓、野狗、野鳥等攜帶衣原體病原侵入和感染豬群，達(dá)到切斷各種傳播媒介的目的。

建立衣原體疫苗免疫計(jì)劃，實(shí)施緊急免疫接種。全場緊急接種衣原體滅活苗。以后的衣原體滅活苗免疫接種計(jì)劃里，應(yīng)對種公豬每年免疫接種2次，繁殖母豬群在每次配種前1個(gè)月或配種后1個(gè)月免疫接種一次。

加強(qiáng)藥物防治，細(xì)心護(hù)理病豬。選用四環(huán)素、強(qiáng)力霉素、土霉素等藥物對病豬進(jìn)行治療，連用5d～7 d，要加強(qiáng)對病豬的護(hù)理。同時(shí)選用四環(huán)素、強(qiáng)力霉素、土霉素、紅霉素、金霉素等藥物混入飼料中，對豬群進(jìn)行群體性防治。為防止出現(xiàn)抗藥性，要合理交替使用敏感藥物。對無治療價(jià)值的病豬應(yīng)及時(shí)淘汰。

豬衣原體病引起的流產(chǎn)，臨床上某些癥狀與豬偽狂犬病、豬藍(lán)耳病、豬乙型腦炎等相似，因此給臨床診斷增加了難度，只有結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方能確診。與以上幾種病毒病相比較，目前養(yǎng)豬生產(chǎn)上對衣原體病沒有足夠的認(rèn)識(shí)和重視，疾病有可能得不到及時(shí)診斷和防治。

湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所從20世紀(jì)80年代開始關(guān)注和研究豬衣原體病，楊宜生等[5]在國內(nèi)首先報(bào)道豬衣原體病，并研制豬衣原體疫苗。近些年來，從各省衣原體病的調(diào)查情況表明，豬衣原體病在我國的規(guī)?；i場流行比較普遍，不同年齡、不同品種的豬群均可感染本病，尤其懷孕母豬和新生仔豬更為敏感。由于衣原體很難清除，感染場應(yīng)將豬衣原體病納入常年免疫計(jì)劃，實(shí)施抗體監(jiān)測，這是預(yù)防本病的主要措施。但豬衣原體疫苗目前尚未廣泛應(yīng)用，一方面可能因?yàn)樵摬∥匆鹭i場足夠重視，認(rèn)為危害不是很大；另一方面，從疫苗的研究現(xiàn)狀來看，衣原體需在雞胚卵黃囊或細(xì)胞上培養(yǎng)，疫苗存在生產(chǎn)周期相對較長、大批量生產(chǎn)困難等等因素。由于衣原體所引起的傳染病是一種人畜共患病，因此豬場員工在免疫、消毒等具體操作時(shí)要做好個(gè)人防護(hù)工作，尤其是衣原體感染場應(yīng)更加重視。

[1]邱昌慶，高雙娣，周繼章，等.豬衣原體病的調(diào)查[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2003，24（2）：88－91.

[2]謝 彬，馬 玲，黃紅梅，等.種豬衣原體與偽狂犬混合感染的診斷與防治[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2011（4）：96－97.

[3]楊宜生，姜天童，孟慶友，等.間接血凝試驗(yàn)檢測衣原體抗體的研究[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，1984，15（3）：181－187.

[4]趙德明，張中秋，沈建中，等.豬病學(xué)[M].9版.北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2008：332－333.

[5]楊宜生，姜天童，孟慶友，等.豬衣原體病的病原分離和鑒定[J].中國獸醫(yī)雜志，1984（9）：4－6.