美國(guó)車(chē)?yán)遄油庵搀w初代培養(yǎng)的污染控制方法研究

王金鳳

摘要：以酒精、氯化汞、次氯酸鈉作為試驗(yàn)材料，對(duì)美國(guó)車(chē)?yán)遄舆M(jìn)行去污處理。通過(guò)3種試劑的不同組合，研究處理時(shí)間及組合的差別對(duì)美國(guó)車(chē)?yán)遄游廴韭屎兔妊柯实挠绊憽＝Y(jié)果表明，選擇幼嫩外植體，先以75%酒精處理15 s，然后用HgCl2處理5 min可得到最佳的污染控制效果，且不影響發(fā)芽率。

關(guān)鍵詞：組織培養(yǎng)；酒精；氯化汞；次氯酸鈉

中圖分類(lèi)號(hào)：X53 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：ADOI編碼：10.3969/j.issn.1006－6500.2012.02.045

Research on Pollution Control Method of American Cherry Explant Culture

WANG Jin-feng

(Sijiao Tree Farms, Zhongtiaoshan State-owned Forest Management Bureau,Houma,Shanxi 043000,China)

Ａｂｓｔｒａｃｔ:Used alcohol, mercuric chloride, sodium hypochlorite as experimental materials on cherries for decontamination.Studied the effect of pollution rate of treatment time and combination of difference on American cherry ,through three different combinations of reagents .The results showed that selecting young explants first soaked in 75% alcohol for 15 s, then HgCl2 for 5 min could get the best pollution control effect, and will not influence the rate of germination.

Key words: tissue culture ;alcohol;HgCl2;NaClO

組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細(xì)胞、原生質(zhì)體等，通過(guò)無(wú)菌操作，在人工控制條件下進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。眾所周知，組織培養(yǎng)時(shí)污染物的控制對(duì)試驗(yàn)的成敗有著十分重要的影響，對(duì)于植物的外植體而言，這一點(diǎn)顯得更加重要，由于外植體長(zhǎng)期生長(zhǎng)在外界環(huán)境中，自身攜帶有大量的外生菌及內(nèi)生菌，很難消毒，因此，筆者嘗試研究在不同處理時(shí)間下對(duì)車(chē)?yán)遄油庵搀w和萌芽率的影響，探索較為有效的消毒方式，以期為組培初代培養(yǎng)的消毒提供一定的借鑒。

1材料和方法

1.1材料

選擇生長(zhǎng)在山西省中條山一年生人工培養(yǎng)的美國(guó)車(chē)?yán)遄幼鳛樵囼?yàn)材料，分別選取幼嫩外植體和較老外植體進(jìn)行試驗(yàn)，互為對(duì)照。

用于消毒的試驗(yàn)試劑分別選擇濃度為0.1%的HgCl2和濃度為0.2%的NaClO，并分別配合75%的酒精使用。

1.2方法

酒精及兩種試劑對(duì)試驗(yàn)材料的處理時(shí)間如表1所示。

2結(jié)果與分析

2.1不同處理對(duì)車(chē)?yán)遄油庵搀w污染率和萌芽率的影響

由表2看出，處理時(shí)間越久，外植體污染率越低，萌芽率也較低；相同處理?xiàng)l件下，較老外植體的污染率較高，但卻與幼嫩外植體有著相似的萌芽率；車(chē)?yán)遄拥拿妊柯逝c酒精的處理時(shí)間呈現(xiàn)正相關(guān)，而污染率則與HgCl2的處理時(shí)間呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)。

2.2酒精和NaClO不同處理時(shí)間組合對(duì)車(chē)?yán)遄油庵搀w污染率和萌芽率的影響

通過(guò)表3我們可以看出，在這種處理?xiàng)l件下，依然是處理時(shí)間越久，外植體污染率越低，同時(shí)萌芽率也越低；較老外植體的污染率高于幼嫩外植體；萌芽率與酒精處理時(shí)間呈正相關(guān)，污染率與NaCl0處理時(shí)間呈負(fù)相關(guān)。這與表2所表現(xiàn)出的規(guī)律是相似的。

3討論

綜合幾種組合對(duì)車(chē)?yán)遄油庵搀w污染率及萌芽率的影響，我們發(fā)現(xiàn)，相同處理時(shí)間組合條件下，酒精與HgCl2的組合均優(yōu)于酒精與NaClO的組合，這種優(yōu)勢(shì)表現(xiàn)為較低的污染率及較高的萌芽率，這是組培試驗(yàn)中較為理想的結(jié)果。確定了酒精與氯化汞的組合后，我們可以看出，幼嫩外植體存在著較大優(yōu)勢(shì)，這種優(yōu)勢(shì)也體現(xiàn)為較低的污染率和較高的萌芽率，這就再一次簡(jiǎn)化了選擇的過(guò)程，最后篩選出的組合只剩下4種，即A 15 s 75%酒精+3 min HgCl2，B 15 s 75%酒精+5 min HgCl2，C 30 s 75%酒精+3 min HgCl2， D 30 s 75%酒精+5 min HgCl2。而在這4種組合中，B的污染率略高于D,但萌芽率遠(yuǎn)高于D，因而認(rèn)為B組合為最佳組合，所以最終確定在車(chē)?yán)遄咏M培試驗(yàn)時(shí)，外植體初代培養(yǎng)首先應(yīng)選擇幼嫩外植體，然后用75%酒精處理15 s，接著用HgCl2處理5 min。

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