犬貓腸道疾病的實(shí)驗(yàn)室診斷方法

孫亞?wèn)|，劉 欣

（沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)高等職業(yè)技術(shù)學(xué)院，遼寧沈陽(yáng)100122）

犬貓的慢性腸道疾病是一類常見(jiàn)的臨床疾病，其主要臨床癥狀為嘔吐、腹瀉和消瘦等，且有些動(dòng)物患病后只表現(xiàn)出消瘦而無(wú)明顯的嘔吐、腹瀉等癥狀，會(huì)被忽略。因其臨床表現(xiàn)特異性較小，引起發(fā)病的原因又較多，所以臨床診斷難度較大。本文闡述了5種用來(lái)診斷犬貓慢性腸道疾病的實(shí)驗(yàn)室方法，希望能為其診斷提供幫助。

1 血清胰蛋白酶樣免疫反應(yīng)

犬血清胰蛋白酶免疫反應(yīng)（canine tryPSIn－like immunoreactivity，cTLI）能敏感且特異地檢測(cè)犬胰腺內(nèi)分泌功能不全（exocrine pancreatic insufficiency，EPI）［1］。引起犬的EPI最常見(jiàn)的原因是胰泡細(xì)胞萎縮，其次是胰腺發(fā)育不全或慢性胰腺炎導(dǎo)致胰腺腺泡損壞。胰蛋白酶原從胰腺釋放入血，通過(guò)TLI定量測(cè)定胰蛋白酶原就能間接確定胰腺組織功能。EPI的患犬血清胰蛋白酶原濃度非常低。

貓血清胰蛋白酶樣免疫反應(yīng)（feline TLI，fTLI）也可以檢測(cè)貓EPI［2］，但與狗相比貓不易患EPI，原因是貓罕見(jiàn)慢性胰腺炎和腺泡細(xì)胞萎縮。胰腺組織破壞可以導(dǎo)致EPI和糖尿病，因此，當(dāng)胰島素治療無(wú)效，消瘦嚴(yán)重癥狀出現(xiàn)后應(yīng)考慮糖尿病患貓是否患有EPI。在懷疑腸道疾病之前應(yīng)當(dāng)把EPI排除，因?yàn)镋PI使小腸結(jié)構(gòu)變化，導(dǎo)致維生素B12吸收不良，影響血清維生素B12濃度在診斷腸道疾病中的作用。

血清胰脂肪酶活性（pancreatic lipase activity，PLI）檢測(cè)用來(lái)特異性診斷犬貓胰腺炎。對(duì)某些表現(xiàn)嘔吐的慢性腸道疾病需要與胰腸炎鑒別。不建議檢測(cè)PLI診斷EPI，因?yàn)榻】岛虴PI動(dòng)物血清PLI的濃度有重合部分［3］。

2 血清葉酸和維生素B12濃度檢查

分析血清葉酸和維生素B12濃度，對(duì)診斷犬貓小腸疾病很重要。結(jié)果正常不能排除小腸疾病，結(jié)果異常不僅可以確定小腸疾病而且能找出疾病的原因［4］。

膳食葉酸的正常吸收主要發(fā)生在近端小腸。血清葉酸降低，可提示近端小腸損傷。因?yàn)榻诵∧c是膳食葉酸的主要吸收?qǐng)鏊斐蛇@段小腸損傷的原因有許多，如飲食敏感、先天性炎癥性腸道疾病和淋巴瘤。貓血清葉酸濃度降低說(shuō)明小腸形態(tài)發(fā)生異常，尤其是炎癥性腸道疾病。與犬不同，患有EPI的貓血清葉酸濃度下降。相比而言，維生素B12的正常吸收則特定地發(fā)生在遠(yuǎn)端小腸，它涉及到一個(gè)比其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收更為復(fù)雜的機(jī)制。

維生素B12的吸收需要一種稱作內(nèi)因子（intrinsic factor，IF）的蛋白，IF在大多數(shù)哺乳動(dòng)物的胃內(nèi)合成。在犬胰腺也能合成IF［5］，在貓胰腺則是合成IF的惟一器官［6］。胰蛋白酶降解胃內(nèi)非特異性與維生素B12結(jié)合的R蛋白從而阻止其與IF結(jié)合。EPI發(fā)生時(shí)，胰腺中IF和胰蛋白酶生成都受干擾，導(dǎo)致狗和貓維生素B12缺乏癥，尤其貓更為嚴(yán)重，因此在解釋維生素B12濃度結(jié)果時(shí)必須排除EPI。

血清維生素B12濃度降低表明小腸末端損傷，如果同時(shí)血清葉酸濃度也下降就表明十二指腸相當(dāng)嚴(yán)重的潛在的彌漫性病變。貓血清鈷胺素濃度下降通常表明了嚴(yán)重的腸道疾病，尤其是炎癥性腸道疾病或淋巴瘤［7］。當(dāng)沒(méi)有明顯的消化道癥狀如嘔吐和腹瀉出現(xiàn)時(shí)，貓的小腸疾病很容易被忽視。懷疑中老齡貓甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)，并且體重減輕時(shí)檢測(cè)鈷胺素和葉酸很有用。犬出現(xiàn)血清鈷胺素下降或（和）血清葉酸濃度升高能夠表明近端小腸細(xì)菌過(guò)度生長(zhǎng)（small intestinal bacterial overgrowth，SIBO），又稱“抗生素反應(yīng)性腹瀉”［8－9］。SIBO在有體重減輕的慢性間歇性腹瀉的幼齡動(dòng)物常見(jiàn)，組織結(jié)構(gòu)改變僅出現(xiàn)在少部分病例中。然而，生化研究證實(shí)常規(guī)組織病理學(xué)檢查不能發(fā)現(xiàn)明顯的黏膜損傷，在關(guān)于細(xì)菌在十二指腸中是否正常分布方面仍有些爭(zhēng)論，大量的研究證明腸道內(nèi)的細(xì)菌及其分泌物能提高腸黏膜的通透性［10］。

如果排除EPI，犬血清鈷胺素濃度下降或葉酸含量上升間接表明SIBO的存在。事實(shí)上，SIBO是引起犬鈷胺素缺乏的一個(gè)極其常見(jiàn)的原因，以梭菌屬和擬桿菌屬為主的厭氧菌細(xì)菌大量寄生近端腸道中，它們可以使鈷胺素變得黏合導(dǎo)致鈷胺素在小腸末端不能被吸收。小腸內(nèi)一些細(xì)菌合成的葉酸被機(jī)體吸收導(dǎo)致SIBO犬血清葉酸濃度升高。相反，葉酸在小腸末端和結(jié)腸中很少被吸收，這些部位的細(xì)菌對(duì)血清葉酸濃度的上升幾乎不起作用。然而單一的葉酸濃度升高就可能暗示著SIBO，犬血清葉酸濃度上升同時(shí)鈷胺素濃度下降表明是SIBO。SIBO是犬EPI引起的第二大并發(fā)癥，能夠?qū)е卵迦~酸濃度升高，另外通過(guò)IF和胰酶的缺乏還能導(dǎo)致鈷胺素濃度的降低。SIBO不是貓的典型臨床綜合癥狀，但是腸道細(xì)菌能夠?qū)е卵邂挵匪貪舛认陆?。排除EPI，血清鈷胺素濃度下降則極有可能是貓小腸腸疾病的指征。

回腸上皮細(xì)胞的IF受體功能異常，引起犬遺傳性鈷胺素吸收障礙。這種疾病在巨型雪納瑞狗、邊境牧羊犬、澳大利亞牧羊犬和獵兔犬能見(jiàn)到［11－12］。1歲以內(nèi)的這種幼犬，發(fā)育不良，慢性再生障礙性貧血，血清鈷胺素濃度劇烈下降。

血清葉酸和維生素B12檢查的臨床意義在于：對(duì)于大多數(shù)犬，如果血清葉酸濃度下降首先考慮食物敏感性原因，如果血清維生素B12濃度下降葉酸濃度升高時(shí)首先考慮SIBO。如果葉酸和鈷胺素濃度同時(shí)降低，要考慮到潛在嚴(yán)重彌漫性小腸疾病。在貓，尤其注意鈷胺素濃度下降，它暗示嚴(yán)重的腸道疾病。維生素B12維持胃腸結(jié)構(gòu)完整性和正常功能。對(duì)于某些嚴(yán)重缺乏維生素B12的病例，比如有遺傳性吸收障礙的犬和EPI的貓，只有通過(guò)消化道外途徑添加維生素B12，治療才能有效。

3 腸道黏膜通透性檢測(cè)

在犬的小腸疾病診斷中，腸黏膜通透性檢查敏感且無(wú)損傷，比腸組織活檢更有用。原因是即使活組織檢查正常也不能排除腸道已經(jīng)損傷（如細(xì)菌過(guò)度生長(zhǎng)）。另外，采用活組織檢查診斷多種原因引起的炎癥性腸道疾病時(shí)，如果不能發(fā)現(xiàn)特異性腸組織病理學(xué)改變，就不能確定病因。相反，犬腸道黏膜通透性測(cè)定不僅可以發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的細(xì)微的組織損傷，并且可以直接確定損傷的原因。但這種方法對(duì)貓卻效果不好，因?yàn)榕c犬相比，貓的腸黏膜通透性更好。

使用51Gr－EDTA檢測(cè)犬腸道黏膜通透性的方法比較有效［13－14］，但是放射性標(biāo)志物限制了實(shí)際應(yīng)用，新方法是口服包括乳果糖和鼠李糖的糖溶液，然后對(duì)尿液和血液樣本進(jìn)行分析［15－18］。

Nery J等［15］通過(guò)上述方法確定一個(gè)3歲金毛獵犬由慢性腹瀉和嘔吐造成腸道損傷的原因是由于食物過(guò)敏。改變食物前腸道黏膜通透性升高暗示著腸道損傷，改變食物后通透性下降說(shuō)明腸道損傷恢復(fù)。

通透性檢測(cè)診斷細(xì)菌過(guò)度生長(zhǎng)造成黏膜損傷的嚴(yán)重程度尤其有用［16］。在SIBO病例中即使沒(méi)有明顯的組織結(jié)構(gòu)異常，隨著腸道細(xì)菌過(guò)度生長(zhǎng)，腸黏膜通透性能升高50%～60%，口服抗生素后腸黏膜通透性下降。腸黏膜損傷修復(fù)，通透性恢復(fù)正常后即可停止使用抗生素。對(duì)于腸黏膜通透性很高的患犬，雖然經(jīng)過(guò)一個(gè)月的治療后明顯好轉(zhuǎn)，但是復(fù)發(fā)的幾率仍然較高，因此建議繼續(xù)使用抗生素治療。犬持續(xù)的高滲透性及治療效果不理想提示存在先天性炎癥性腸道疾病。

4 腸道蛋白質(zhì)丟失的評(píng)估

許多腸道疾病能導(dǎo)致胃腸道中蛋白質(zhì)過(guò)多，尤其是炎癥性腸道疾病、腸道淋巴瘤和腸道淋巴管擴(kuò)張，這可能與營(yíng)養(yǎng)或者黏膜損傷相關(guān)的吸收不良有關(guān)。白蛋白丟失超過(guò)肝合成能力導(dǎo)致低白蛋白血癥，由此產(chǎn)生腹水、胸腔積液和水腫。評(píng)估腸道蛋白丟失有助于在低蛋白血癥出現(xiàn)前發(fā)現(xiàn)腸道病理改變，排除腎病和肝病造成的蛋白缺失。

可以通過(guò)分析糞便中α1－蛋白激酶抑制劑（α1－PI）來(lái)評(píng)估腸內(nèi)蛋白缺失。α1－PI是一種血清蛋白，它與白蛋白分子質(zhì)量大小相當(dāng)，以一定的比率滲入到腸道中［19］。與大部分蛋白質(zhì)不同的是，α1－PI不能被腸道中的蛋白酶水解，最終隨糞便排出。

5 腸活組織檢查和組織病理學(xué)檢查

腸活組織檢查和組織病理學(xué)檢查是診斷腸道疾病的決定性步驟，但炎癥性腸道疾病、淋巴瘤和淋巴管擴(kuò)張，腸組織活檢的結(jié)果往往是陰性的。當(dāng)內(nèi)窺鏡不可用時(shí)，檢查局部而非彌漫性的腸道疾病時(shí)，就需要通過(guò)剖腹術(shù)進(jìn)行全層活組織檢查。

腸組織活檢和組織病理學(xué)檢查通過(guò)組織學(xué)表現(xiàn)而不是病因進(jìn)行腸道疾病的分類，這種方法有一定局限性。炎癥性腸道疾病只不過(guò)是一種組織描述，它可能有多種原因。寄生蟲(chóng)與病原菌、腸道細(xì)菌過(guò)度生長(zhǎng)與規(guī)定食物的敏感性間的明確關(guān)系已經(jīng)被證明，但是在許多例子中它的起因還沒(méi)有確定。

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