大鼠血管性癡呆動物模型的研究進展

曾貴剛，李 峻，彭海東，謝施海，張 申

（第二軍醫(yī)大學附屬上海長征醫(yī)院中醫(yī)理療科，上海 200003）

血管性癡呆（vascular dementia，VD）是由缺血、出血或急慢性腦缺氧等腦血管因素，導致腦組織損害，引起的腦組織血液循環(huán)障礙、腦功能減退的一種認知功能缺損綜合征。患者多為慢性、進行性、持續(xù)性智能障礙綜合征，臨床表現(xiàn)為記憶及認知等功能障礙綜合征［1］。建立VD動物模型，對深入探討該病的發(fā)病機制、病理學特點以及臨床患者的早期診斷和治療等均有重要意義。大鼠與人類均由頸動脈系及椎底動脈系吻合成動脈環(huán)，通過其分支共同完成腦供血，有相似的腦血管解剖特點。且大鼠較其他動物價格便宜、生存率高、繁殖快、易飼養(yǎng)、便于檢測，有較強的生命力和抗感染能力，目前是制備 VD模型最適宜的動物［2］。本文現(xiàn)將大鼠VD動物模型的研究進展綜述如下：

1 模型制作方法

1.1 血管阻斷法

兩血管阻斷法（2-VO）：2-VO法是指將大鼠的雙側(cè)頸總動脈（common carotid artery，CCA）永久結(jié)扎，造成一種慢性腦低灌注狀態(tài)，從而使腦組織，尤其是易損區(qū)域，如海馬、皮層等產(chǎn)生缺血缺氧性損害。2-VO法制作相對簡單，但術(shù)中大鼠死亡率較高，難以長期存活，不利于長期觀察。近年來，學者對2-VO法采用了多種改進方法：

① 分次結(jié)扎頸總動脈法。研究發(fā)現(xiàn)［3］，改進的2-VO法（間隔1星期，分2次結(jié)扎頸總動脈），可大大降低動物的死亡率，且與傳統(tǒng)法造模組的大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元有相似程度的明顯變性、壞死和凋亡［4］，在 Morris水迷宮測試中定位航行實驗，空間搜索實驗結(jié)果也證實了分次結(jié)扎頸總動脈法對動物行為學的影響與傳統(tǒng)造模方法無顯著差異［5］。但僅結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈，由于大腦動脈環(huán)的代償作用，側(cè)支循環(huán)的建立，有可能難以達到理想的腦缺血，從而影響模型的可靠性，因此還出現(xiàn)了2-VO復合法制作VD模型，較好地避免了這些問題。

②2-VO法+高血脂癥：將大鼠高脂飼料喂養(yǎng)1月，確證其血脂己升高后，再用2-VO法。缺血時閉阻雙側(cè)頸總動脈 3次，每次 10 m in，每次間隔 10 min，之后縫合傷口即制成高脂血癥 VD模型［6-7］。此法模擬了VD發(fā)病中高脂血癥危險因素，與人類實際情況有很高的相似度。

③ 腎血管性高血壓模型［8］。用動脈夾夾閉大鼠雙側(cè)腎動脈，復制出易卒中型腎血管性高血壓大鼠模型，于43 d后夾持阻斷——再通雙側(cè)頸總動脈。此法的不同在于考慮到VD易發(fā)生的危險因素，能較好地模擬人類VD發(fā)病的病理過程。實驗證明此模型易發(fā)生與人類高血壓病類似的腦動脈損害，在此基礎上，56％的大鼠自發(fā)產(chǎn)生各種類型的腦卒中。

④ 反復缺血—再灌注合并腹腔注射硝普鈉［9］。其目的為降低大鼠血壓，以加重腦的缺血性損傷。大鼠模型在夾閉雙側(cè) CCA之前，腹腔注射硝普鈉（2.5 mg/kg，用無菌蒸餾水溶解），隨即用無創(chuàng)動脈夾夾閉雙側(cè)CCA，10 min后，再通10 min，再夾閉10 min，再通后縫合傷口，放回籠中飼養(yǎng)。本法重復性、穩(wěn)定性較好；手術(shù)操作簡單；對動物創(chuàng)傷小，易于恢復，存活率高；與臨床上VD發(fā)病過程相似。但本法對硝普鈉注射量以及環(huán)境恒定溫度要求較高，否則會對血壓造成影響，進而影響造模效果［10］。

三血管阻斷法（3-VO）：該方法阻斷動物基底動脈和雙側(cè)頸總動脈血供，制成一種慢性腦供血不足（chronic cerebral circulation insuffciency，CCCI）模型。研究發(fā)現(xiàn)老齡大鼠CCCI模型所引起的行為學及神經(jīng)病理學損害更接近阿爾茨海默病，而與多發(fā)血管梗塞性癡呆有所不同，此方法國內(nèi)學者較少采用［11］。此外，還有學者采用三血管阻斷再開放法，與單純3-VO法比較，該方法優(yōu)點在于缺血較為迅速，缺血效果好，再灌注血流恢復迅速，比較適用于急性全腦缺血性疾病損傷的研究。缺點是需開顱暴露基底動脈，手術(shù)創(chuàng)傷大，在手術(shù)中對周圍組織、神經(jīng)牽拉較重，尤其是在暴露及夾閉基底動脈時，易損延髓［12］。

四血管阻斷法（4-VO）：1979年，Pusinelli最先采用此法，故又稱Pusinelli4-VO法。其方法為先阻斷大鼠雙側(cè)椎動脈，再可逆性夾閉雙側(cè)頸總動脈，導致全腦缺血，進而導致 VD。此法可導致大鼠前腦嚴重缺血，海馬等與大鼠智能相關(guān)部位受損嚴重，而腦干部分由于有脊前動脈的供血尚能維持正常的生理狀態(tài)。4-VO為目前國際公認的VD造模方法，它高度模擬VD的發(fā)病特點，缺血后生理指標穩(wěn)定，病理改變較為充分、明確，無明顯肢體運動障礙，但該方法手術(shù)復雜，具有一定操作難度，由于創(chuàng)傷較重，大鼠生存率低［13］，在非直視條件阻斷雙側(cè)椎動脈導致模型制作結(jié)果難以肯定。

1.2 血管栓塞法

本方法主要采用從大鼠一側(cè)頸內(nèi)動脈注入纖維蛋白、血凝塊、中心球、塑料微小栓子及血栓誘導劑致缺血性中風模型，在VD模型制作方面，主要有自體血栓注入法及舌下靜脈鐵粉注入法。

血栓法：血栓法是制作VD動物模型較為常用的方法之一。其方法［14］為將外源性栓子注入動物體內(nèi)，造成多發(fā)性腦梗塞。此種方法最先由 Kudo等人于1982年首次提出，即將小于100μm的同種血栓栓子從大鼠頸總動脈注入，造成同側(cè)皮質(zhì)、海馬和深部灰質(zhì)的梗塞。其后，Kaneko等在 Kudo方法的基礎上加以改進，從頸外動脈逆行插管至頸內(nèi)動脈，然后推栓子進入顱內(nèi)，造成缺血模型，克服了結(jié)扎頸總動脈的缺點。1994年，我國學者陳俊拋等，采用自體干燥血塊，研碎后經(jīng)200微米篩孔過篩，然后將小于200μm的栓子鹽水混懸液從頸外動脈注入，注入量為0.5 m L。術(shù)后經(jīng)行為學檢測及病理學觀察證實模型制作是成功的。但此種方法操作較困難，梗塞灶大小不易控制及動物死亡率較高。梅建勛等［15］將此法加以改進：在操作時將栓子溶液量減少至0.3 m L，且延長注入時間（不少于30 s），再注入栓子的同時開放頸總動脈，利用頸總動脈的血流將栓子送入顱內(nèi)。這樣使造模后形成的多發(fā)梗塞灶更接近于臨床VD患者病理改變，同時減少栓子溶液量可以降低模型的死亡率。

鐵粉注入法：林堅等人［16］將四氧化三鐵粉（鐵離子直徑6μm，用量56.4 mg/kg）溶于1.5 m L生理鹽水中，于1 min內(nèi)沿大鼠舌下靜脈注入，并將大鼠麻醉后固定在腦立體定位儀上，常規(guī)消毒，暴露顱骨，在額部位于前囟前2 mm向左旁開2 mm處安置電極，并在其正后方固定一直徑5 mm，2000高斯磁場的小磁鐵制作VD動物模型。經(jīng)統(tǒng)計學及形態(tài)學檢查結(jié)果表明，本法所形成的VD模型可作為實驗性腦缺血的動物模型。趙小貞等［17］用類似方法，所不同之處為從鼠尾靜脈注射鐵粉。本法操作簡單，可重復性強，術(shù)中不必開顱，適用于慢性實驗，但僅模擬了單一部位的缺血梗死，而且鐵粉停留肺、肝中，影響生活質(zhì)量及日后藥物干預的觀察，與大腦多發(fā)性梗塞以及與癡呆的關(guān)系還需進一步研究。

1.3 大腦中動脈梗死法

大腦中動脈阻塞模型是局部腦缺血動物模型，與臨床上患者半球局灶性梗塞高度近似。尹軍祥，趙玲等［18-19］采用大鼠麻醉后開顱暴露大腦中動脈（m iddle cerebral artery，MCA），將蘸有FeCl3溶液的濾紙敷在MCA上，待MCA變黑，取下濾紙，縫合傷口。蔡晶等［20］采用用電凝器熱凝固 MCA主干，崔堯元，關(guān)云謙等［21］從頸總動脈 CCA切口插線經(jīng)頸內(nèi)動脈到達MCA，實現(xiàn)MCA阻塞導致腦缺血，制作大腦中動脈梗死模型。大腦中動脈梗死法缺血效果可靠，MCA供血區(qū)有典型的神經(jīng)細胞缺血、壞死梗塞灶，模型動物有明顯的學習記憶障礙，缺血灶明確、可重復性強，但本法操作技巧性要求高，大鼠創(chuàng)傷大，死亡率高。

1.4 光化學法

楊淵等［22］研究老年大鼠局灶性腦梗死運用此法。大鼠經(jīng)腹腔麻醉后，消毒并縱向切開頭皮，暴露右側(cè)顱骨，剝離顱骨表面骨膜并覆以中間帶圓孔的避光紙，冷光源照射顱骨。動物體內(nèi)的光敏染料引起內(nèi)皮細胞過氧化，釋放自由基，致內(nèi)皮損傷，誘發(fā)血小板凝聚，血管內(nèi)血栓形成。韓冬等［23］采取去除顱骨上層骨板及中央髓層，保留下層骨板的方法。此模型梗死部位恒定，手術(shù)過程簡單，動物存活率高，短時間內(nèi)可以制作較大量的模型。但該法由于微血管損害和血腦屏障開放早，與人類常見的缺血性腦卒中存在差異，且光敏物質(zhì)對實驗可能存在干擾。

1.5 VD自發(fā)模型

1963年，Okamoto和Aoki培育了自發(fā)性高血壓大鼠（spontaneously hypertensive rat，SHR），其中有一重要亞系Stroke-Prone SHR（自發(fā)性高血壓腦卒中傾向大鼠）。這個亞系中，80％超過100日齡雄性大鼠和60％超過150日齡雌性大鼠發(fā)生腦出血。SHR大鼠在出生后前幾個月時間內(nèi)能夠自行發(fā)展成為穩(wěn)定的高血壓，同時伴隨出現(xiàn)高血壓相關(guān)的包括腦組織在內(nèi)的多種靶器官損傷［24］，可從腦出血后存活的大鼠中篩選VD模型大鼠，以供科研［25］。SHR大鼠作為研究原發(fā)性高血壓的重要動物模型，涉及不同層次的多個腦區(qū)，例如腦血管、血腦屏障、海馬CA1區(qū)、紋狀體、齒狀回等，均出現(xiàn)多種病理改變，且隨高血壓程度的不斷加深而加重。最終表現(xiàn)為認知功能損傷等行為學改變。腦血管因素與長期高血壓常常合并產(chǎn)生VD，共同導致認知功能缺損，以往研究多以正常大鼠為基礎制作VD模型，反應了持續(xù)低灌流對大腦的損害，但不能模擬在長期高血壓基礎上大腦持續(xù)低灌流所產(chǎn)生的VD，SHR大鼠可以很好地模擬長期高血壓與持續(xù)低灌流兩種因素共同導致的VD，與長期高血壓后中風導致的VD病例有很高的相似度［26］。但 SHR大鼠來源有限，價格較昂貴，不宜大規(guī)模的研究開展；且其與臨床非高血壓VD患者在多危險因素共同作用下的發(fā)病情況有所不同，不能完全模仿其腦損傷及功能障礙情況［27］。

1.6 去大腦皮層法

司楚銀等［28］首次報道去大腦皮層法。大鼠麻醉后暴露軟腦膜，在解剖顯微鏡下用棉簽擦拭至軟腦膜下見不到血管為止，術(shù)后動物出現(xiàn)明顯的學習記憶功能損害。在組織病理染色中，皮質(zhì)、海馬等處細胞構(gòu)筑明顯遭到破壞，細胞數(shù)量明顯減少且變形萎縮，充分模擬了VD的病理改變。缺點在于打開硬腦膜時損及腦脊液，同時可能損及硬腦膜竇，導致動物死亡。

2 模型觀察指標

2.1 行為學指標

學習及記憶是大腦的高級神經(jīng)電生理活動，VD模型可表現(xiàn)為學習和記憶功能減退，學習記憶能力的常作為其重要的觀察評價指標。學習側(cè)重于對行為變化的獲得，而記憶側(cè)重于對行為變化的保持、回憶和儲存。通過水迷宮法、跳臺法、避暗法、電迷宮法、爬桿法、穿梭箱等行為學檢測來測定VD模型的學習記憶能力，其中Morris水迷宮是檢測大鼠空間學習記憶能力常用的裝置［29］，通過定位航行試驗和空間探索試驗分別測試VD模型的學習和記憶能力。研究［30］表明在定位航行試驗中造模后VD模型大鼠平均逃避潛伏期較對照組顯著延長，在空間探索試驗中VD模型尋找原平臺象限的游泳軌跡呈隨機紊亂分布，而正常大鼠游泳軌跡基本上集中在平臺象限，VD模型大鼠首次跨越原平臺時間（逃避潛伏期）明顯延長，跨越原平臺頻率明顯少于對照組大鼠。

2.2 組織形態(tài)學觀察

海馬是腦內(nèi)參與記憶貯存功能的重要部分，在學習記憶中起重要作用。在VD模型的研究中多以皮質(zhì)及海馬區(qū)的神經(jīng)細胞的變化作為觀察指標。模型組見錐體細胞排列紊亂，胞體腫脹，胞膜溶解，有空泡產(chǎn)生，出現(xiàn)核固縮，核裂解，膠質(zhì)細胞增生形成多處結(jié)節(jié)［31］。海馬 CA3區(qū)微管相關(guān)蛋白-2 （MAP-2）神經(jīng)元樹缺血再灌1 d后突斷裂不完整，粗細不一致，再灌7 d和14 d突起表達更加紊亂，可觀察到螺旋樣變；再灌30 d突起表達依然斷裂不完整；再灌 90 d突起較平滑完整，形態(tài)學基本恢復［32］。大鼠血管性癡呆后第1天，側(cè)腦室下區(qū)、室管膜等相關(guān)神經(jīng)生發(fā)區(qū)有少量5-溴脫氧尿核苷（BrdU）陽性神經(jīng)元，陽性神經(jīng)元細胞核呈棕黃色，細胞漿不著色，第2天，第7天陽性細胞數(shù)逐漸增多［33］。Nanri等［34］研究發(fā)現(xiàn)，大鼠在2-VO后1～3 d出現(xiàn)腦白質(zhì)疏松，海馬區(qū)及皮層神經(jīng)元皺縮，7 d后紋狀體區(qū)出現(xiàn)梗塞病灶。

2.3 血液生化指標

研究發(fā)現(xiàn)模型組大鼠皮質(zhì)和海馬組織中乙酰膽堿（Ach）含量持續(xù)降低［35-36］。2-VO后3～7 d微管相關(guān)蛋白-2（MAP-2）免疫活性下降，而膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）免疫活性增加；在 2-VO后 30 dGFAP的免疫活性達到高峰［37］。模型組大腦皮質(zhì)和海馬腫瘤壞死因子-α（TNF-α）及白細胞介素-1β （IL-1β）含量顯著高于假手術(shù)組，模型組大腦皮質(zhì)和海馬一氧化氮NO含量及一氧化氮合酶NOS活力顯著高于假手術(shù)組，模型組大腦皮質(zhì)和海馬超氧化物歧化酶（SOD）活性顯著低于假手術(shù)組，丙二醛（MDA）含量顯著高于假手術(shù)組［38］，研究結(jié)果顯示，模型組大鼠腦缺血再灌注后腦組織內(nèi)內(nèi)皮素ET水平明顯高于假手術(shù)組，降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）水平明顯降低［39］。大鼠大腦邊緣葉八肽膽囊收縮素（CCK-8）含量的正常組顯著高于 VD模型組［40］。在AD的發(fā)病過程中，血管收縮因子血栓素 A2 （TXA2）與血管擴張因子前列腺素（PGI2）的相互制衡對于維持正常血液循環(huán)也起到了重要作用，能通過對血管平滑肌的影響調(diào)節(jié)血管的內(nèi)環(huán)境恒定，腦缺血時它們的代謝產(chǎn)物 TXB2含量增高，同時6-Keto-PGF1α含量降低［41］。VD模型組大鼠有明顯血液流變學障礙，其全血黏度，血漿黏度，紅細胞壓積及血沉均明顯升高［38］，大鼠海馬、皮層和其它一些與學習記憶功能相關(guān)的腦區(qū)在2-VO后2～5 h，局部腦血流量降低25％～87％，葡萄糖利用率下降66％～77％。

2.4 影像學指標

隨著神經(jīng)影像學技術(shù)的發(fā)展，臨床根據(jù)腦血流、腦葡萄糖代謝、氧代謝、神經(jīng)遞質(zhì)及其受體的活性，來評價VD患者活體腦組織的局部神經(jīng)功能逐漸開展［42-43］。腦血流灌注成像技術(shù)能夠提供客觀的腦血流量指標，反映慢性腦缺血患者的腦灌注狀態(tài)，目前用于評價腦血流量的方法有功能性磁共振（fMRI）等影像學技術(shù)。MRI等影像學技術(shù)可同時從血管結(jié)構(gòu)、腦組織功能、代謝上敏感地顯示大腦低灌注損傷的范圍和程度［44］。影像學檢測在動物模型上近來也逐漸有學者開始采用，曾貴剛等［45］采用fMRI檢測大鼠局灶性腦缺血（MCAO）模型的梗死部位、血管阻塞、神經(jīng)纖維束等情況，發(fā)現(xiàn)大鼠術(shù)側(cè)顳頂葉及外側(cè)出現(xiàn)明顯水腫帶，腦血管完全堵塞，神經(jīng)纖維束稀少，部分纖維束中斷、缺失；等級相關(guān)性分析顯示，神經(jīng)功能缺失評分與腦梗死比例具有相關(guān)性，可準確判斷活體狀態(tài)下大鼠腦卒中模型的損傷部位和程度，篩選出一致性較好的大鼠腦卒中模型。但采用血氧水平依賴性功能性磁共振成像（BOLD-fMRI）檢測VD模型時，動物處于全麻狀態(tài)下進行的被動運動，大腦皮層激活點無固定規(guī)律，與人體試驗存在很大差異，提示不適用于檢測大鼠全麻狀態(tài)下被動運動的激活部位［46］。

綜上所述，VD是一個極其復雜的病理生理過程，模擬人類缺血性腦血管病發(fā)病過程，建立重復性好、生理指標控制嚴格、利于病理指標觀察的標準化活體VD動物模型，在VD的研究中有著重要意義。近年對VD動物模型的研究取得了長足的進步，但仍存在著許多問題亟待解決?，F(xiàn)有VD模型有的僅能造成缺血再灌注，學習記憶的功能減退是短暫可逆的［47］，僅能模擬單一動脈阻塞形成的局部急性腦梗塞；有的僅能模擬慢性低灌流對VD形成的影響；還有的需開顱手術(shù)，創(chuàng)傷大、動物死亡率高、不易操作。目前VD模型存在的問題在于：通過各種造模方法制作的動物模型，其病理生理的改變不能充分模擬和反映臨床VD的特征，或在造模過程中人為增加了一些非VD的病理生理特征（如鐵粉栓塞法增加了肺、肝等內(nèi)臟鐵粉殘留；去大腦皮層法改變了腦脊液狀態(tài)）。為了使研究成果盡可能真實地反映VD的病理生理過程，研究者在進行VD的相關(guān)研究中，應根據(jù)其研究目的和當前眾多VD造模方法的各自特點，選取合適的造模方法。此外，由于尋找新的VD模型造模方法較為困難，充分研究和挖掘現(xiàn)有各VD造模方法的異同和特點，指導VD研究采用最恰當?shù)脑炷７椒?，也是VD模型造模方法研究的一個新方向。隨著科學技術(shù)的發(fā)展，以及新材料、新方法的應用，VD動物模型的制作將會取得更深層次的突破，必將對VD的臨床及實驗研究起到更大的推動作用。

［1］Bomebroke M，Breteler NM.Epidemiology of non-AD dementias［J］.Clin Neuresic Research，2004，3（6）：349-361.

［2］趙勇，崔淑芳，湯球.血管性癡呆動物模型研究進展［J］，上海實驗動物科學，2005，25（1）：54-56.

［3］王興華，李露斯.兩種大鼠2VO模型制作方法的比較［J］.第三軍醫(yī)人學學報，2004，24（12）：1496.

［4］黃文革，郭芬芬，劉慰華，等.血管性癡呆動物模型制作方法的改良［J］，中國比較醫(yī)學雜志，2011，21（5）：49-52.

［5］黃新武，李華，秦大蓮，等.不同時點分別結(jié)扎左右頸總動脈建立大鼠血管性癡呆模型［J］.中國老年學雜志，2010，30 （7）：2006-2007.

［6］唐啟盛，黃肩福，郭建文.高脂血癥火鼠缺血再灌流誘發(fā)行為學障礙模型的實驗研究［J］.北京中醫(yī)藥大學學報，1997，20 （5）：34.

［7］雷燕，黃啟福，王永炎.復圣散對高脂大鼠腦缺血再灌后的腦保護作用［J］.中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志，1999，5（12）：22.

［8］莫飛智，李建強.電針與氫化麥角堿對血管性癡呆大鼠腦內(nèi)乙酰膽堿酯酶的作用［J］中國老年學雜志，2001，21（2）：119 -121.

［9］王蕊，楊秦飛.大鼠擬血管性癡呆模型的改進［J］.中國病理生理雜志，2000，16（10）：914-916.

［10］蔡品，杜建.血管性癡呆動物模型的制作方法及其評價［J］.中華中醫(yī)藥學刊，2002，20（5）：617.

［11］高東，周中和.血管性癡呆模型制作的問題［J］.國外醫(yī)學老年學分冊，2002，23（2）：59.

［12］Kameyama M.A new model of bilateral hemispheric ischcm ia in the rat three vellel occlusion model［J］.Stroke，l985，16：489.

［13］賈健民，賈健平.大鼠腦反復缺血致不可逆性學習記憶障礙的研究［J］.心理學報，1995，27（1）：69-71.

［14］Takagi K，Takeo S.The model of stroke induced by Microsphere embolism in rats［J］.Nippon Yakuragaku Zasshi，2003.121 （6）：440.

［15］梅建勛，張云嶺，張伯禮，等.多發(fā)梗塞性癡呆大鼠模型的改進與應用［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2000，20（2）：113-115.

［16］林堅，王子棟.血管性癡呆動物模型［J］.中國應用生理學雜志，1998，14（1）：89-92.

［17］趙小貞，陳春鵬，徐劍文，等.兩種血管性癡呆動物模型的研究［J］，中國行為醫(yī)學科學雜志，2003，12（5）：484-486.

［18］趙玲，徐秋萍，唐民科.聰圣膠囊對鼠腦缺血損傷的保護及對腦血流與能量代謝的改善作用［J］.中國中兩醫(yī)結(jié)合雜志，2001，21（5）：375.

［19］尹軍祥，田金洲，黃啟福，等.MCAO擬血管性癡呆大鼠模型的建立［J］.中國病理生理雜志，2003，19（8）：1144-1147.

［20］蔡晶，杜建.血管性癡呆動物模型的制作方法及其評價［J］.中醫(yī)藥學刊，2002，20（5）：617-620.

［21］崔堯元，史玉泉.大鼠局灶性腦梗塞后神經(jīng)行為和記憶障礙的實驗研究［J］.中國行為醫(yī)學科學，1995，4（3）：23.

［22］楊淵，郭瑞友，張?zhí)K明，等.光化學誘導老年大鼠局灶性腦梗塞模型的研究［J］.中國老年學雜志，2001，21（3）：35.

［23］韓冬，廖福龍，李文，等.冷光源光化學誘導局灶性腦梗塞及血管損傷半暗帶大鼠模型［J］.中國微循環(huán)，2001，5（1）：71.

［24］Mignini F，Vitaioli L，Sabbatini M，et al.The cerebral cortex of Spontaneously hypertensive rats：a quantitative m icroanatomical study［J］.Clin Exp Hypertens，2004，26（4）：287-303.

［25］Saito H，Togashi H，Yoshioka M，et al.Anima lmodels of vascular dementia with emphasis on stroke-prone spontaneously hypertensive rats［J］.Clin Exp Pharmacol Physiol，1995.22 （1）：257.

［26］喬松，馮加純，楊晶，等.自發(fā)性高血壓和持續(xù)低灌流模型大鼠記憶能力與腦組織病理學對比研究［J］.解放軍醫(yī)學雜志，2008，（33），6：725-729.

［27］王超，張志國，賈曉旭.自發(fā)性高血壓大鼠腦損傷研究概況，中國藥理學通報，2009，25（10）：1272-1274.

［28］司楚銀，朱培純，吳海燕，等.去大腦皮層血管癡呆模型的建立及評［J］.中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志，2001，7（2）：45.

［29］MORRISR.Development of a watermaze procedure for studying spatial learning in the rat［J］.Neurosci Methods，1984，11（1）： 47-60.

［30］李林，夏保蘆，茹立強，血管性癡呆模型大鼠學習記憶障礙的實驗研究，江漢大學學報報（自然科學版），2008，36（4）：54 -56.

［31］余尚貞，趙長鷹，杜娟，復聰香液對血管性癡呆模型大鼠海馬神經(jīng)元的影響，廣州中醫(yī)藥大學學報，2004，21（5）：382 -384.

［32］馬志健，牛海艷，易西南等，血管性癡呆模型大鼠海馬CA3區(qū)微管相關(guān)蛋白-2的表達及其意義，現(xiàn)代生物醫(yī)學進展，2009，12（9）：2231-2233.

［33］劉旭峰，吳顥昕，雙根清腦顆粒對血管性癡呆模型大鼠BrdU陽性細胞增殖的影響，遼寧中醫(yī)藥大學學報，2010，1，12 （1）：40-42.

［34］Nanri M，Watanabe H.Availability of 2VO rats as a model for chronic Cerebrovaseular disease［J］.Nippon Yakurigaku zasshi，1999，113（2）：85-95.

［35］黃新武，李國春，李華等，聰靈膠囊對血管性癡呆模型大鼠腦組織乙酰膽堿酯酶的影響，時珍國醫(yī)國藥，2008，19 （10）：234.

［36］藺心敬，李呂力，王鐵建等，血管性癡呆大鼠模型的制備與評價，中國比較醫(yī)學雜志，2006，16（12）：733-735.

［37］Nanri M，Watanabe H.Availability of 2VO rats as a model for chronic Cerebrovaseular disease［J］.Nippon Yakurigaku zasshi，1999，113（2）：85-95.

［38］李國春，黃新武，張紅等，不同時點分別結(jié)扎左右頸總動脈建立的大鼠血管性癡呆模型血流變學及生化學研究，現(xiàn)代預防醫(yī)學，2011，38（4）：718-720.

［39］楊文明，王時光，鮑遠程等，智腦膠囊對血管性癡呆模型大鼠行為學及腦組織NO、ET、CGRP含量的影響，中國實驗方劑學雜志，2008，14（1）：29-32.

［40］牛文民，劉智斌，楊曉航，針藥合用刺激嗅覺系統(tǒng)對血管性癡呆模型大鼠學習記憶及大腦邊緣葉CCK-8含量的影響，山東中醫(yī)藥大學學報，2009，33（5）；425-427.

［41］張吉仲，彭成，謝曉芳，益智五海膠囊對大鼠血管性癡呆模型中 ET、CGRP、TXB2、6-Keto-PGF1α的影響，華西藥學雜志，2010，25（2）：242-24.

［42］呂翠.慢性腦供血不足（CCCI）的腦血流灌注成像研究進展［J］.醫(yī)學影像學雜志，2011，21（7）：1083-1085

［43］Zaro-Weber O，M oeller-Hartmann W，Heiss WD，et al.MRI perfusion map s in acute stroke validated with Water positron emission tomography［J］.Stork，2010，41：443-449.

［44］婁昕，蔡幼銓，馬林，等.動脈自旋標記法磁共振成像在頸動脈狹窄性腦缺血疾病中的初步應用［J］.中國醫(yī)學影像學雜志，2007，15：88-91.

［45］曾貴剛，李峻，張申，等.fMRI結(jié)合神經(jīng)癥狀評分評價運動療法對大鼠局灶性腦缺血模型的療效.實驗動物與比較醫(yī)學雜志，2011，31（4）：236-241.

［46］曾貴剛，張申，陳國強，等.以功能磁共振成像為主評價大鼠局灶性腦缺血模型的研究.實驗動物與比較醫(yī)學雜志，2011，31（3）：153-159.

［47］Shuaib A，Ijaz MS，Miyashita H，et al.GABA and glutamate level in the substantianigra reticular following repetitive cerebral ischem ia in gerbils［J］.Exp Neurol，l997，147（2）：311.