PAR-1拮抗劑E5555的全合成*

苗華明，張林山，吳 疆，樓袁媛，邵 華，王建武，趙桂龍

(1.山東大學(xué) 化學(xué)與化工學(xué)院，山東 濟(jì)南 250100； 2.青島科技大學(xué) 化學(xué)與分子工程學(xué)院，山東 青島 266042；3.天津藥物研究院 a.藥物設(shè)計(jì)與發(fā)現(xiàn)天津市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室； b.知識(shí)產(chǎn)權(quán)辦公室，天津 300193)

血小板能夠被一系列的激活劑激活，例如凝血酶，ADP，血栓素A2，膠原，5-羥色胺和腎上腺素等。但是在這些激活劑中，凝血酶是最強(qiáng)的血小板聚集激活劑。凝血酶激活血小板聚集是通過凝血酶蛋白水解細(xì)胞表面的特定受體來實(shí)現(xiàn)的，這些受體被稱為蛋白酶激活受體(PAR)或凝血酶受體。PAR有多個(gè)亞型，其中PAR-1是這些亞型中最主要的受體。PAR-1拮抗劑能阻斷凝血酶激活血小板，從而抑制血小板聚集和血栓形成，是一類有前景的治療動(dòng)脈血栓性疾病的藥物[1，2]。

1-(3-叔丁基-5-嗎啉-4-甲氧基苯基)-2-(5,6-二乙氧基-7-氟-1-亞胺二氫異吲哚)乙酮?dú)滗逅猁}(E5555)是日本衛(wèi)材株式會(huì)社發(fā)現(xiàn)的一個(gè)強(qiáng)PAR-1拮抗劑[3]，現(xiàn)在處于Ⅱ期臨床階段，具有良好的開發(fā)前景。我們?cè)谘芯啃滦偷腜AR-1拮抗劑時(shí)，以E5555作為陽性對(duì)照品，對(duì)其進(jìn)行了全合成[3，4]。

Scheme1

以3-氟鄰苯二酚(1)和鄰叔丁基苯酚(9)為原料，經(jīng)14步反應(yīng)合成了E5555(Scheme 1)，總產(chǎn)率27.2%，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H NMR確證。對(duì)E5555的中間體2,3-二乙氧基-1-氟苯(2)，5,6-二乙氧基-7-氟二氫異吲哚-1-亞胺(8)和1-(3-叔丁基-4-羥基苯基)乙酮(10)的合成工藝進(jìn)行了研究，改進(jìn)了合成方法步驟，簡(jiǎn)化了操作步驟，提高了收率。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1．1 儀器與試劑

X-4型數(shù)字顯微熔點(diǎn)儀；Bruker AV-400型核磁共振譜儀(DMSO-d6為溶劑，TMS為內(nèi)標(biāo))。

所用試劑均為分析純；DMF，THF，正己烷，甲苯等用前均按標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行干燥處理。

1.2 合成

(1)2的合成

在反應(yīng)瓶中依次加入K2CO316.11 g(116.7 mmol)，KI 6.47 g(39.0 mmol)，3-氟鄰苯二酚(1)5.00 g(39.0 mmol)和DMF 30 mL，冰水浴冷卻，攪拌下滴加溴乙烷21.27 g(195.2 mmol)，滴畢，于室溫反應(yīng)過夜。小心倒入冰水(200 mL)中，用二氯甲烷(3×100 mL)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(200 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋蒸除去二氯甲烷后經(jīng)硅膠柱層析[洗脫劑：A=V(乙酸乙酯)∶V(石油醚)=1∶100]分離得無色液體26.82 g，產(chǎn)率95.0%；1H NMRδ: 6.99(ddd,J=1.6 Hz, 7.2 Hz, 16.0 Hz, 1H), 6.76～6.85(m, 2H), 4.03(sext,J=7.2 Hz, 4H), 1.33(t,J=7.0 Hz, 3H), 1.24(t,J=7.0 Hz, 3H)。

(2) 3,4-二乙氧基-2-氟-1-溴苯(3)的合成

在反應(yīng)瓶中加入26.82 g(37.0 mmol)，N-溴代琥珀酰亞胺(NBS)9.90 g(55.6 mmol)和乙腈80 mL，攪拌下于室溫反應(yīng)過夜。倒入冰水(200 mL)中，用二氯甲烷(3×100 mL)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(200 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋蒸除溶后經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑：A=1∶100)分離得無色液體38.25 g，產(chǎn)率84.6%；1H NMRδ: 7.30(dd,J=7.8 Hz, 9.0 Hz, 1H), 6.86(dd,J=2.0 Hz, 9.2 Hz, 1H), 4.02～4.08(m, 4H), 1.33(t,J=7.0 Hz, 3H), 1.24(t,J=7.0 Hz, 3H)。

(3) 3,4-二乙氧基-2-氟苯腈(4)的合成

在反應(yīng)瓶中依次加入38.24 g(31.3 mmol)，CuCN 4.20 g(46.9 mmol)和DMF 50 mL，氮?dú)獗Ｗo(hù)，攪拌下回流反應(yīng)3 h(TLC跟蹤)。冷卻至室溫，緩慢倒入冰水(200 mL)中，用二氯甲烷(3×100 mL)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(200 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋蒸除溶后經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑：A=1∶6)分離得無色液體46.12 g，產(chǎn)率93.6%；1H NMRδ: 7.57(dd,J=7.2 Hz, 8.8 Hz, 1H), 7.05(dd,J=1.2 Hz, 8.8 Hz, 1H), 4.17(q,J=6.9 Hz, 2H), 4.07(q,J=6.9 Hz, 2H), 1.35(t,J=7.0 Hz, 3H), 1.25(t,J=7.0 Hz, 3H)。

(4) 6-甲?；?3,4-二乙氧基-2-氟苯腈(5)的合成

在反應(yīng)瓶中加入2,2,6,6-四甲基哌啶(TMP)6.83 g(48.4 mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下用橡膠塞封口。磁力攪拌下用注射器注入THF 17 mL和正己烷12.5 mL，液氮-無水乙醇降溫至-78 ℃后用注射器滴加正丁基鋰27.4 mL(43.8 mmol, 1.6 mol·L-1的正己烷溶液)，反應(yīng)20 min;再逐滴注入4 6.12 g(29.3 mmol)的THF(9.5 mL)溶液，滴畢，反應(yīng)1 h。逐滴注入干燥DMF 4.28 g(58.6 mmol)和干燥THF 4 mL，反應(yīng)30 min后加入正己烷30 mL，反應(yīng)1 h后加入冰醋酸9.2 g和THF 2.6 mL，繼續(xù)反應(yīng)1 h。打開瓶塞，加水40 mL和正己烷10 mL，攪拌30 min后緩慢倒入冰水(200 mL)中，用二氯甲烷(3×100 mL)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(100 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋蒸除溶后經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑：A=1∶7)分離得白色粉末55.94 g，產(chǎn)率85.7%，m.p.120 ℃～121 ℃；1H NMRδ: 9.97(d,J=2.0 Hz, 1H), 7.67(d,J=1.2 Hz, 1H), 4.20～4.31(m, 4H), 1.40(t,J=7.0 Hz, 3H), 1.28(t,J=7.0 Hz, 3H)。

(5) 6-羥甲基-3,4-二乙氧基-2-氟苯腈(6)的合成

在反應(yīng)瓶中加入NaBH40.32 g(8.4 mmol)和THF 15 mL，冰水浴冷卻，攪拌下滴加冰醋酸1.52 g(25.3 mmol)的THF(10 mL)溶液，滴畢，于室溫反應(yīng)3 h。滴加51.00 g(4.2 mmol)的THF(15 mL)溶液，滴畢，于室溫反應(yīng)2 h(TLC跟蹤)。緩慢倒入冰水(100 mL)中，用二氯甲烷(3×50 mL)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(100 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓旋蒸除溶后經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑：A=1∶2)分離得白色粉末60.81 g，產(chǎn)率81.0%，m.p.121 ℃～123 ℃；1H NMRδ: 7.08(s, 1H), 5.61(t,J=5.6 Hz, 1H), 4.56(d,J=5.6 Hz, 2H), 4.18(q,J=7.0 Hz, 2H), 4.06(q,J=7.0 Hz, 2H), 1.36(t,J=7.0 Hz, 3H), 1.24(t,J=7.2 Hz, 3H)。

(6) 6-溴甲基-3,4-乙氧基-2-氟苯腈(7)的合成

在反應(yīng)瓶中加入60.81 g(3.4 mmol)和甲苯10 mL，冰水浴冷卻，攪拌下滴加三溴化磷0.92 g(3.4 mmol)的甲苯(5 mL)溶液，滴畢，于室溫反應(yīng)3 h(TLC跟蹤)。緩慢倒入冰水(100 mL)中，用二氯甲烷(3×50 mL)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(100 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓旋蒸除溶后經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑：A=1∶10)分離得白色粉末70.80 g，產(chǎn)率78.0%，m.p.64 ℃～66 ℃；1H NMRδ: 7.32(d,J=1.2 Hz 1H), 4.72(s, 2H), 4.18(q,J=7.0 Hz, 2H), 4.10(q,J=7.0 Hz, 2H), 1.36(t,J=7.0 Hz, 3H), 1.26(t,J=3.6 Hz, 3H)。

(7)8的合成

在反應(yīng)瓶中加入70.80 g(2.6 mmol)的THF(10 mL)溶液和飽和NH3/甲醇溶液30 mL，攪拌下于室溫反應(yīng)過夜(TLC跟蹤)。加入二氯甲烷100 mL后用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋蒸除溶后加入石油醚20 mL，攪拌1 h。抽濾，濾餅干燥得黃色粉末80.50 g，產(chǎn)率79.4%，m.p.121 ℃(分解)；1H NMRδ: 7.05(s, 1H), 6.19(d,J=6.0 Hz, 2H), 4.39(s, 2H), 4.12(q,J=3.5 Hz, 2H), 4.02(q,J=7.0 Hz, 2H), 1.35(t,J=6.8 Hz, 3H), 1.25(t,J=7.0 Hz, 3H)。

(8)10的合成

在反應(yīng)瓶中加入無水AlCl317.76 g(133.0 mmol)和甲苯450 mL，冰水浴冷卻，攪拌下滴加2-叔丁基苯酚(9)20.00 g(133.3 mmol)的甲苯(25 mL)溶液；滴加乙酰氯10.44 g(133.0 mmol)的甲苯(25 mL)溶液，滴畢，于室溫反應(yīng)2.5 h(TLC跟蹤)。緩慢倒入冰水(500 mL)中，分液，水層用乙酸乙酯(20 mL)萃取，合并有機(jī)層，用飽和食鹽水(200 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓旋蒸除溶后經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑：A=1∶6)分離得白色固體1020.31 g，產(chǎn)率79.3%，m.p.163 ℃～164 ℃；1H NMRδ: 10.29(s, 1H), 7.76(d,J=2.0 Hz, 1H), 7.68(dd,J=2.2 Hz, 8.2 Hz, 1H), 6.85(d,J=8.4 Hz, 1H), 2.45(s, 3H), 1.35(s, 9H)。

(9) 1-(5-叔丁基-4-羥基-3-溴苯基)乙酮(11)的合成

在反應(yīng)瓶中加入1020.10 g(104.7 mmol)和乙腈176 mL，冰水浴冷卻，攪拌下緩慢滴加NBS 20.56 g(115.5 mmol)的乙腈(146 mL)溶液，滴畢，于室溫反應(yīng)2 h(TLC跟蹤)。減壓旋蒸除溶后經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑：A=1∶6)分離得白色固體1124.53 g，產(chǎn)率86.5%，m.p.107 ℃～108 ℃；1H NMRδ: 9.66(s, 1H), 7.99(d,J=2.0 Hz, 1H), 7.76(d,J=2.0 Hz, 1H), 2.50(s, 3H), 1.36(s, 9H)。

(10) 1-(5-叔丁基-4-甲氧基-3-溴苯基)乙酮(12)的合成

在反應(yīng)瓶中依次加入1124.50 g(90.4 mmol)，碳酸鉀18.63 g(135.0 mmol)和DMF 30 mL，冰水浴冷卻，攪拌下緩慢滴加碘甲烷25.56 g(180.8 mmol)，滴畢，于室溫反應(yīng)3 h(TCL跟蹤)。緩慢倒入冰水(200 mL)中，用濃鹽酸調(diào)pH至4～5，用乙酸乙酯(3×200 mL)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(200 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓旋蒸除溶后經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑：A=1∶45)分離得黃色油狀物1224.11 g，產(chǎn)率93.6%；1H NMRδ: 8.06(d,J=2.0 Hz, 1H), 7.84(d,J=2.0 Hz, 1H), 3.91(s, 3H), 2.55(s, 3H), 1.36(s, 9H)。

(11) 3-叔丁基-5-(1,1-二甲氧基乙基)-2-甲氧基溴苯(13)的合成

在反應(yīng)瓶中依次加入1224.10 g(84.6 mmol)，HC(OMe)347.20 g(253.8 mmol)，(±)-樟腦磺酸[(±)-CSA]0.98 g(4.2 mmol)和甲醇22 mL，攪拌下于室溫下反應(yīng)2 h。加入碳酸鉀2.33 g(16.9 mmol)，攪拌40 min后緩慢倒入冰水(200 mL)中，用二氯甲烷(3×200 mL)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(200 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓除溶得黃色油狀物13(未經(jīng)純化直接用于下一步反應(yīng))24.3 g，產(chǎn)率86.8%；1H NMRδ: 7.46(d,J=2.0 Hz, 1H), 7.31(d,J=2.0 Hz, 1H), 3.84(s, 3H), 3.05(s, 6H), 1.42(s, 3H), 1.33(s, 9H)。

(12) 4-[3-叔丁基-5-(1,1-二甲氧基乙基)-2-甲氧基苯基]嗎啉(14)的合成

在反應(yīng)瓶中依次加入1314.30 g(43.2 mmol)，醋酸鈀0.67 g(3.0 mmol)，BINAP 2.01 g(3.2 mmol)，嗎啉7.52 g(86.4 mmol)，叔丁醇鈉10.05 g(94.6 mmol)及DME 100 mL，氮?dú)獗Ｗo(hù)，攪拌下回流反應(yīng)過夜。冷卻后用硅藻土抽濾，濾餅用DME洗滌，濾液旋蒸濃縮后經(jīng)中性三氧化二鋁柱層析(洗脫劑：A=1∶40)分離得黃色黏稠液體1412.45 g，產(chǎn)率85.2%；1H NMRδ: 7.00(d,J=2.0 Hz, 1H), 6.89(d,J=2.0 Hz, 1H), 3.87(s, 3H), 3.76(t,J=4.6 Hz, 4H), 3.05(s, 6H), 2.93(t,J=4.4 Hz, 4H), 1.41(s, 3H), 1.31(s, 9H)。

(13) 1-(3-叔丁基-5-嗎啉-4-甲氧基苯基)-2-溴乙酮(15)的合成

(14) E5555的合成

在反應(yīng)瓶中加入80.48 g(2.0 mmol)，150.74 g(2.0 mmol)和THF 20 mL，氮?dú)獗Ｗo(hù)，攪拌下于室溫反應(yīng)過夜。加入THF 10 mL和石油醚30 mL，攪拌30 min，抽濾，濾餅干燥得淺紅色粉末E5555 1.02 g，產(chǎn)率84.0%，m.p.198 ℃～199 ℃；1H NMRδ: 9.29(s, 1H), 9.05(s, 1H), 7.60(d,J=1.6 Hz, 1H), 7.50(d,J=1.6 Hz, 1H), 7.34(s, 1H), 5.51(s, 2H), 4.80(s, 2H), 4.22(q,J=7.0 Hz, 2H), 4.12(q,J=7.0 Hz, 2H), 3.95(s, 3H), 3.81(t,J=4.2 Hz, 4H), 3.00(s, 4H), 1.40(t,J=7.0 Hz, 3H), 1.37(s, 9H), 1.30(t,J=7.2 Hz, 3H)。

2 結(jié)果與討論

(1) 2的合成

在K2CO3提供的堿性環(huán)境中，1在DMF中被溴乙烷乙基化得到2。該反應(yīng)是典型的SN2取代反應(yīng)，使用偶極溶劑DMF作為反應(yīng)溶劑，在KI催化下反應(yīng)，反應(yīng)在室溫下順利完成，產(chǎn)率(95.0%)極高。反應(yīng)避免了使用文獻(xiàn)[3]方法中硫酸二乙酯等毒性較大的乙基化試劑。

(2) 8的合成

溴化芐7在室溫下與NH3/MeOH反應(yīng)順利得到了期望亞胺中間體8，避免了文獻(xiàn)[4]方法使用的高壓反應(yīng)和繁瑣的操作，極大地簡(jiǎn)化了該反應(yīng)。

(3) 10的合成

9在AlCl3催化下乙?；?，通過多次實(shí)驗(yàn)，將反應(yīng)溫度調(diào)整為0 ℃，避免了使用-45 ℃的低溫[4]，節(jié)約了能源動(dòng)力并簡(jiǎn)化了操作。

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