重組人胰島素在不同輸液及不同材質(zhì)輸液容器中的含量變化

舒德忠，彭其勝，鄭小敏，鄭維國

(1.重慶市涪陵區(qū)中心醫(yī)院藥劑科，涪陵408000；2.重慶市涪陵區(qū)藥品檢驗(yàn)所抗生素室，涪陵408000)

[本文編輯] 蘭 芬

胰島素是治療糖尿病的有效藥物之一，臨床上經(jīng)常將胰島素注射液加入0.9%氯化鈉注射液(NS)或5%葡萄糖注射液(GS)中靜脈滴注，或作為極化液組分。常用的胰島素注射液為豬胰島素、牛胰島素，以及重組人胰島素。文獻(xiàn)[1]認(rèn)為重組人胰島素不可用于靜脈注射，而文獻(xiàn)[2]中重組人胰島素的用法卻有皮下注射、靜脈滴注和靜脈注射三種方式。目前，塑料材質(zhì)如塑料瓶和塑料袋包裝的輸液應(yīng)用日益廣泛。有文獻(xiàn)報(bào)道，塑料制品對(duì)胰島素有吸附作用，可能會(huì)影響其臨床療效，特別是聚氯乙烯(PVC)對(duì)胰島素的吸附作用較大[3，4]，但臨床醫(yī)護(hù)人員將胰島素注射液與常用溶媒混合時(shí)并未考慮吸附作用對(duì)藥效的影響。本研究考察了不同輸液和不同輸液容器對(duì)重組人胰島素的吸附作用，以期為臨床合理配制胰島素注射液提供參考。

1 材 料

1.1 儀器 LC－20AT 高效液相色譜儀，包括 SPD－M20A PDA二極管陣列檢測器、7725i型手動(dòng)進(jìn)樣閥、CBM－20Alite系統(tǒng)控制器和Shimpack VP－ODS色譜柱(日本島津公司)；pH計(jì)(上海儀器廠)。

1.2 試劑和藥品 市售重組人胰島素注射液[規(guī)格：3ml:300U，商品名 優(yōu)泌林，批號(hào)A562898A、A672675A，禮來(蘇州)制藥有限公司]；重組人胰島素對(duì)照品(20mg／瓶，中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)140633－200703)。PVC塑料瓶包裝的5%GS(寧波長富藥業(yè)有限公司，批號(hào)09101903)；聚丙烯(PP)塑料瓶包裝的5%GS(浙江濟(jì)民制藥有限公司，批號(hào)10092334)；玻璃瓶包裝的5%GS(批號(hào)091116)、玻璃瓶包裝的10%GS(批號(hào)091116)和玻璃瓶包裝的NS(批號(hào)091110)均由重慶天圣制藥股份有限公司提供；乙腈為色譜純(北京亞太龍興化工有限公司)；鹽酸(重慶無機(jī)化學(xué)試劑廠)；其他試劑均為分析純。

2 方法和結(jié)果

2.1 重組人胰島素含量的測定

2.1.1 色譜條件 VP－ODS C18色譜柱(150mm×4.6mm，4.6μm)；流動(dòng)相：0.2mol／L硫酸鹽緩沖液－乙腈(74:26)；流速：1.0ml／min；檢測波長：214nm；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣量：20μl。溶液的配制及實(shí)驗(yàn)操作在20～25℃室溫下進(jìn)行。

2.1.2 系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn) 取重組人胰島素對(duì)照品適量，先加0.01mol／L鹽酸溶液1ml溶解，然后加流動(dòng)相至刻度，搖勻。取5%GS和NS作為陰性對(duì)照品，另取含有25U重組人胰島素注射液的5%GS、10%GS和NS作為供試品(含重組人胰島素0.5U／ml)。按《中華人民共和國藥典》2010年版[5]規(guī)定的方法進(jìn)樣測定，得到色譜圖見圖1。由圖1可見，重組人胰島素與輸液帶來的雜質(zhì)峰，以及重組人胰島素注射液帶來的間甲酚雜質(zhì)峰分離度好。

2.1.3 線性關(guān)系的考察 精密稱取胰島素對(duì)照品適量置10ml量瓶中，先加0.01mol／L鹽酸溶液1ml溶解，然后加流動(dòng)相至刻度，搖勻，再用流動(dòng)相稀釋成系列濃度為0.009 4、0.018 8、0.037 6、0.056 4、0.075 2mg／ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。取各濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液各20μl進(jìn)樣，按2.1.1項(xiàng)下色譜條件測定峰面積。以重組人胰島素濃度(c)為橫坐標(biāo)，峰面積(A)為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為A＝(1.744 9×107c－3.15×104(r＝0.999 8，n＝5)。

2.1.4 精密度實(shí)驗(yàn) 取2.1.3項(xiàng)下配制的濃度為0.009 4、0.037 6、0.075 2mg／ml的重組人胰島素對(duì)照品溶液進(jìn)樣，每個(gè)樣品連續(xù)進(jìn)樣5次，每次進(jìn)樣20μl。結(jié)果低、中、高濃度的 RSD分別為3.52%、2.48%和4.15%(n＝5)，表明日內(nèi)精密度良好。

2.1.5 回收率實(shí)驗(yàn) 將25U重組人胰島素注射液加入50ml的容量瓶中，用5%GS稀釋到刻度，搖勻，作為母液(此濃度作為100%)。分別取8、6、4和2ml母液置于10ml容量瓶中，加5%GS到刻度，搖勻，配得相對(duì)百分含量為80%、60%、40%和20%的樣品溶液，用HPLC法測定各濃度樣品溶液的峰面積。以樣品溶液的峰面積與母液的峰面積相比，得到實(shí)際相對(duì)百分含量，回收率(%)＝(實(shí)際相對(duì)百分含量／理論相對(duì)百分含量)×100%。結(jié)果相對(duì)百分含量為80%、60%、40%和20%的樣品溶液回收率分別為：(99.78±1.16)%、(100.58±1.59)%、(100.90±2.13)%和(99.10±1.27)%(n＝5)。

2.2 吸附性及穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 將輸液分成以下兩組：一組為包裝材質(zhì)為玻璃瓶、PP和PVC的5%GS；另一組為玻璃瓶裝的5%GS、10%GS及NS。將25U重組人胰島素注射液分別加入50ml以上輸液中，充分搖勻。量取一定量的混合溶液，用0.45μm微孔濾膜濾過，取20μl續(xù)濾液進(jìn)樣，測定濃度，該濃度即為配置0h的濃度。將混合液留置1、2、4、12h，取樣，同法測定，以0h的濃度為100%(吸附率為0)，計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)的相對(duì)百分含量，考察不同輸液容器對(duì)重組人胰島素的吸附性以及重組人胰島素在不同輸液中的穩(wěn)定性。

2.4 測定結(jié)果 重組人胰島素注射液加入以上兩組輸液中，各時(shí)間點(diǎn)的相對(duì)百分含量見表1。PVC瓶裝的葡萄糖輸液在配置后2h胰島素的相對(duì)百分含量較低，但各濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；玻璃瓶裝不同輸液中重組人胰島素相對(duì)百分含量變化較小，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

圖1 重組人胰島素的HPLC譜圖

表1 重組人胰島素在不同輸液中的相對(duì)百分含量(%)

3 討 論

重慶市涪陵區(qū)中心醫(yī)院的合理用藥監(jiān)測系統(tǒng)(PASS)在審查住院醫(yī)囑時(shí)，對(duì)5%GS或NS與重組人胰島素注射液配伍均提出了黑色警示，對(duì)這兩種輸液與胰島素注射液(豬或牛胰島素)配伍卻未提出任何警示。臨床常有5%GS或NS與重組人胰島素配伍的醫(yī)囑執(zhí)行，未見相關(guān)藥品不良反應(yīng)上報(bào)。PASS對(duì)審查結(jié)果解釋為：生物合成人胰島素注射液與輸液溶媒混合時(shí)，數(shù)量不詳?shù)囊葝u素會(huì)被輸液溶媒吸收，但這是由藥物還是輸液容器所導(dǎo)致尚無明確說明。禮來(蘇州)制藥有限公司提供的重組人胰島素注射液說明書中注明該制劑可以皮下或靜脈注射方式給藥，沒有提及輸液和輸液容器對(duì)胰島素含量的影響。輸液和輸液容器對(duì)重組人胰島素是否有吸附，文獻(xiàn)對(duì)此也有爭議。文獻(xiàn)[1]特別提示重組人胰島素不能靜脈注射，而胰島素注射液可以。徐小薇等[3]檢測了重組人胰島素在3種材質(zhì)包裝的NS和5%GS輸液中存放48h，剩余藥物相對(duì)0h的相對(duì)百分含量。存放1h時(shí)，胰島素在PVC袋裝的NS和5%GS中相對(duì)百分含量分別為94.08%和93.04%；在非PVC袋(即不含增塑劑的非PVC復(fù)合膜)裝的NS和5%GS中相對(duì)百分含量分別為98.46%和97.67%；玻璃瓶裝的NS和5%GS中相對(duì)百分含量分別為99.96%和99.52%。48h時(shí)，PVC袋裝的NS和5%GS中胰島素相對(duì)百分含量分別為68.83%和65.72%。

臨床使用的重組人胰島素與人體自身合成的胰島素結(jié)構(gòu)完全相同，與豬、牛胰島素相比只有一個(gè)氨基酸不同。鑒于文獻(xiàn)對(duì)輸液和輸液容器的吸附性尚無定論，本研究考察了不同容器(PVC、PP、玻璃瓶)和不同輸液(5%GS和 NS)對(duì)胰島素的吸附性。結(jié)果顯示，重組人胰島素注射液加入到不同材質(zhì)包裝的輸液中，盡管相對(duì)百分含量略有減少，但并不明顯(P＞0.05)；且不同濃度的GS對(duì)重組人胰島素的含量影響沒有顯著差異。本研究的結(jié)果與文獻(xiàn)[2]結(jié)果不完全一致，作者認(rèn)為這與胰島素在輸液容器中存在吸附與洗脫作用有關(guān)[6]。由于本研究測定取樣前都振搖了輸液瓶，可能導(dǎo)致被吸附的部分重組人胰島素重新洗脫出來，從而使其相對(duì)百分含量變化幅度比文獻(xiàn)報(bào)道值小。

結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)，本研究認(rèn)為，重組人胰島素注射液加入到5%GS、10%GS和NS輸液中，在臨床使用的時(shí)間內(nèi)是穩(wěn)定的。溶媒本身以及玻璃瓶和PP塑料瓶對(duì)重組人胰島素幾乎沒有吸附作用，PVC塑料瓶對(duì)重組人胰島素有少量吸附，但其吸附量對(duì)臨床療效影響不大。文獻(xiàn)[2]認(rèn)為重組人胰島素可以靜脈滴注，沒有對(duì)輸液的包裝材質(zhì)提出特殊要求。值得提醒的是，本研究的樣品是直接從輸液瓶中采取，未經(jīng)過輸液管等臨床使用途徑。流經(jīng)輸液管的液體量小，停留時(shí)間長，與輸液管接觸面積大，輸液管對(duì)重組人胰島素是否有明顯的吸附性應(yīng)進(jìn)一步研究證實(shí)[4]。

[1]四川美康醫(yī)藥軟件研究開發(fā)有限公司.藥物臨床信息參考(2007)[M].成都：四川出版集團(tuán)，四川科學(xué)技術(shù)出版社，2007：1196.Sichuan Medicom Medical Software Research and Development Co.，Ltd.Reference of clinical drug information(2007)[M].Chengdu：Sichuan Publishing Group，Sichuan Science and Technology Press，2007：1196.Chinese.

[2]衛(wèi)生部合理用藥專家委員會(huì).中國醫(yī)師藥師臨床用藥指南[M].重慶：重慶出版集團(tuán)，重慶出版社，2009：899－900.Experts Committee on Rational Use of Drugs，Ministry of Health.Guideline of clinical medication for doctors and pharmacists in China[M].Chongqing：Chongqing Publishing Group，Chongqing Press，2009：899－900.Chinese.

[3]徐小薇，杜小莉，李大魁，等.3種不同材質(zhì)輸液容器對(duì)15種藥物的吸著性實(shí)驗(yàn)[J].中國藥學(xué)雜志，2004，39(3)：205－208.Xu XiaoWei，Du XiaoLi，Li DaKui，etal.Study on sorption of fifteen injectable drugs in three different kinds of intravenous solution containers[J].Chin Pharm J，2004，39(3)：205－208.Chinese with abstract in English.

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[5]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典.2010年版 二部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：845－846.State Pharmacopoeia Committee.Pharmacopoeia of the People’s Republic of China.2010ed.Volume 2[S].Beijing：China Medical Science Press，2010：845－846.Chinese.

[6]施春華，倪元紅.聚氯乙烯輸液裝置對(duì)胰島素吸附及洗脫作用的觀察[J].交通醫(yī)學(xué)，2010，24(4)：461－462.Shi ChunHua，Ni YuanHong.Study on adsorption and elution of insulin by polyvinyl chloride(PVC)infusion sets[J].Med J Commun，2010，24(4)：461－462.Chinese.