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    高效液相色譜法測定頭孢拉定膠囊的溶出度

    2011-10-16 13:28:02江蘇省泰州市食品藥品檢驗所225300柏大為錢桂英
    首都食品與醫(yī)藥 2011年20期
    關鍵詞:液相色譜儀溶出度頭孢

    江蘇省泰州市食品藥品檢驗所(225300) 柏大為 錢桂英

    2005年版《中國藥典》(一部)規(guī)定的溶出度測定方法為紫外分光光度法(UV),該方法操作過程較繁瑣,且結果易受試劑影響。為此,筆者建立了測定頭孢拉定膠囊溶出度的高效液相色譜法(HPLC),并與UV法進行了比較。

    1 儀器與試藥

    附圖 頭孢拉定溶出度HPLC圖譜

    WATERS 2695-2996液相色譜儀(美國Waters公司);UV2550紫外分光光度計(日本島津公司);RC-3B藥物溶出儀(天津大學無線電廠);METTLER AG135電子天平(梅特勒公司)。頭孢拉定對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號為130427-200306,含量為91.8%);頭孢拉定膠囊(揚子江藥業(yè)集團有限公司,批號為10040612,規(guī)格為250mg/粒;上海衡山藥業(yè)有限公司,批號為091212,規(guī)格為250mg/粒;北京京豐制藥有限公司,批號為091215,規(guī)格為250mg/粒);乙腈(色譜純);其余試劑(分析純);水(純化水)。

    2 方法與結果

    2.1 色譜條件 色譜條件中,色譜柱:Shimadzu VP-ODS C18柱(250mm×4.6mm,5mm);流動相:水-4%醋酸溶液-3.86%醋酸鈉-甲醇(1564∶6∶30∶400);流速:1.0ml/min;檢測波長:254nm;進樣量:20μl。

    2.2 溶出條件[1][2]溶劑:以醋酸鹽緩沖液(pH5.5)(取0.04mol/L醋酸鈉溶液,用冰醋酸調節(jié)pH為5.5)900ml;轉速:100 r/min;取樣時間:45min。

    2.3 測定方法 精密稱取頭孢拉定對照品適量(約相當于頭孢拉定27mg),置100ml量瓶中,加醋酸鹽緩沖液(pH5.5)超聲溶解并稀釋至刻度,搖勻,濾過。取續(xù)濾液20μl,注入高效液相色譜儀,記錄色譜圖。另取樣品,按照2.2項下條件處理,取溶液,濾過,取續(xù)濾液作為供試品溶液。按“2.1”項的色譜條件,精密量取上述兩種溶液各20μl,注入液相色譜儀,記錄色譜圖,按外標法以峰面積計算出每片的溶出量。限度為標示量的80%,應符合規(guī)定。

    2.3.1 回收率試驗 按處方比分別精密稱取相當于樣品標量的50%、80%、100%的頭孢拉定對照品及相應量的空白輔料,加醋酸鹽緩沖液(pH5.5)適量,振搖使頭孢拉定溶解,并加醋酸鹽緩沖液(pH5.5)至規(guī)定濃度,搖勻,濾過。取濾液按“2.2”項的色譜條件測定,對本法的準確性進行考察。結果平均回收率為99.6%(RSD=0.8%)。

    2.3.2 方法學考察 線性關系考察:精密稱取頭孢拉定對照品0.02574g,置25ml量瓶中,加流動相至刻度,取0.25 ml、0.5 ml、1.0 ml、1.5 ml、2.0 ml、3.0 ml、4.0ml,分別置10ml量瓶中,加流動相稀釋到刻度,搖勻。精密量取20μl,注入液相色譜儀,記錄色譜圖,測定峰面積。以質量濃度對峰面積進行線性回歸,得回歸方程Y=4.12506×10-7X+0.00l79228,r=0.999 7(n=7)。結果表明,頭孢拉定質量濃度在0.02174~1.0236g/L范圍內與峰面積線性關系良好。

    2.3.3 溶出曲線的繪制[1][2]取本品,按溶出度測定法(《中國藥典》2005年版二部附XC第一法),以醋酸鹽緩沖液(pH5.5)溶出介質,轉速為10r/min,依法操作,在5min、10min、15min、30min、45min和60min時,分別以溶液5ml濾過,并及時在操作容器中補充上述溶劑5ml。另取頭孢拉定對照品適量,用上述溶出介質溶解稀釋制成每lml中含0.16mg的溶液,作為對照品溶液。按“2.2”項的色譜條件,精密量取上述兩種溶液各20μl,注入液相色譜儀,記錄色譜圖,按外標法以峰面積計算出每片的溶出量。結果見附表和附圖。

    附表 頭孢拉定膠囊溶出度測定結果(方法l為UV,方法Ⅱ為HPLC)

    3 討論

    從實驗結果可知,頭孢拉定膠囊溶出度檢查采用對照品對照比自身對照所得的檢驗結果,與含量測定項下所測得的結果一致,即含量測定采用高效液相色譜法更能有效地分離不同的組分,減少頭孢氨芐對測定的影響。說明采用對照品對照比自身對照所得的檢驗結果較能真實、客觀地反映藥品的質量。

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