王一凡,柳 茵,劉維軍,李 琳
(青海大學(xué)1.醫(yī)學(xué)院,2.附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科,青海 西寧 810001)
雪蓮是菊科鳳毛菊屬雪蓮亞屬的草本植物,有除寒壯陽、調(diào)經(jīng)止血的功效。近年國(guó)內(nèi)有資料[1-2]表明雪蓮有抗脂質(zhì)過氧化和抗炎作用,而血脂異常和動(dòng)脈炎性反應(yīng)是動(dòng)脈粥樣硬化形成的始動(dòng)因素。本研究探討雪蓮對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血脂和C反應(yīng)蛋白的影響。
1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)Wistar大鼠45只,♂,由甘肅中醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供,體質(zhì)量220~250 g。
1.2主要試劑和儀器雪蓮注射液(新疆制藥廠,批號(hào):091012),膽固醇、膽酸鈉(安徽天啟化工科技有限公司),丙基硫氧嘧啶(深圳市中聯(lián)制藥有限公司,批號(hào):100129),維生素D3注射液(上海通用藥業(yè)股份有限公司,批號(hào):091215),CRP ELISA檢測(cè)試劑盒(上海亞培科技有限公司),AU-2700全自動(dòng)生化分析儀(日本奧林巴斯公司),低溫離心機(jī)(德國(guó)Eppendorf公司)。
1.3動(dòng)物分組和動(dòng)脈粥樣硬化模型的建立實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分成3組:對(duì)照組(N組)、動(dòng)脈粥樣硬化模型組(A組)、雪蓮組(X組),每組15只。對(duì)照組正常喂基礎(chǔ)飼料。模型組及雪蓮組具體造模方法參照趙娟等[3]。對(duì)照組及模型組以等量生理鹽水灌胃,雪蓮組給予雪蓮注射液0.8 ml·kg-1灌胃,連續(xù)30 d。
1.4標(biāo)本處理大鼠灌藥30 d后,用烏拉坦麻醉,腹主動(dòng)脈取血,4℃ 3 000 r·min-1離心 10 min,取血清,-20℃保存,待測(cè)。取大鼠胸主動(dòng)脈1 cm,10%中性甲醛溶液固定。
1.5血脂及C反應(yīng)蛋白的測(cè)定采用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDLC)、高密度脂蛋白(HDL-C)濃度。采用ELISA測(cè)定C反應(yīng)蛋白(CRP)濃度。
1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì),數(shù)據(jù)以±s表示,采用單因素方差分析。
2.1對(duì)血脂和CRP的影響對(duì)照組、雪蓮組血清TC、TG、LDL-C水平低于模型組(P<0.05)。對(duì)照組、雪蓮組HDL-C水平高于模型組(P<0.05),表明雪蓮具有調(diào)節(jié)血脂作用。雪蓮組與模型組相比,血清CRP下降(P<0.05),表明雪蓮具有抗炎作用。見Tab 1。
2.2主動(dòng)脈形態(tài)學(xué)變化各組大鼠胸主動(dòng)脈經(jīng)HE染色,顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn),對(duì)照組內(nèi)膜完整光滑無損傷,中膜平滑肌細(xì)胞排列整齊,少見單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞黏附和浸潤(rùn)。模型組主動(dòng)脈管壁內(nèi)皮細(xì)胞明顯水腫、脫落,中膜平滑肌細(xì)胞排列紊亂,內(nèi)膜-中膜厚度與對(duì)照組比較明顯增加,可見大量單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞聚集。雪蓮組主動(dòng)脈管壁內(nèi)皮細(xì)胞輕度水腫、脫落,內(nèi)膜-中膜厚度與對(duì)照組比較輕度增加,可見少量單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞聚集,但較模型組動(dòng)脈內(nèi)膜病理改變程度明顯減輕。說明雪蓮對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的形成有一定的抑制作用。
Tab 1 Comparsion of blood fat degree and CRP in experimental groups(±s,n=15)
Tab 1 Comparsion of blood fat degree and CRP in experimental groups(±s,n=15)
*P<0.05 vs group N;*△P<0.05 vs group A;N:Control group;A:Atherosclerosis model group;X:Xuelian group
Group TC/mmol·L-1 TG/mmol·L -1 LDL-C/mmol·L -1 HDL-C/mmol·L-1 CRP/mg·L -1 N 1.70 ±0.20 0.42 ±0.10 0.26 ±0.17 0.77 ±0.18 0.88 ±0.44 A 9.00 ±1.90* 1.71 ±0.48* 5.46 ±1.45* 0.28 ±0.22* 2.97 ±0.61*X 4.01 ±1.00*△ 0.87 ±0.17*△ 2.43 ±1.16*△ 0.53 ±0.23*△ 1.78 ±0.55*△
模型組大鼠主動(dòng)脈病理學(xué)結(jié)果示內(nèi)皮細(xì)胞明顯水腫,中膜平滑肌細(xì)胞排列紊亂,可見大量炎性細(xì)胞聚集,內(nèi)膜-中膜厚度明顯增加,表明動(dòng)脈粥樣硬化模型復(fù)制成功。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示雪蓮組大鼠血清TC、TG、LDL-C和CRP水平明顯低于模型組,說明雪蓮具有調(diào)節(jié)血脂和抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。雪蓮化學(xué)成分中黃酮類化合物是抗氧化和抗炎作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ)[2,4],其抗動(dòng)脈粥樣硬化的有效成分可能與黃酮類化合物有關(guān)。
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