復(fù)方達(dá)克羅寧薄荷腦潤(rùn)膚止癢水的制備及其質(zhì)量控制Δ

李婷，李成，張開禮，馮廉潔，羅意文，陳連劍（深圳市福田區(qū)人民醫(yī)院，深圳市 518033）

復(fù)方達(dá)克羅寧薄荷腦潤(rùn)膚止癢水是我院制劑室自行研制的一種外用溶液劑，以達(dá)克羅寧和薄荷腦為主藥，乙醇和甘油為輔藥，用于治療秋冬季節(jié)皮膚干燥、瘙癢，以滿足我院皮膚科門診日益增多的秋冬季節(jié)皮膚干燥、瘙癢患者，尤其是中老年患者的需要。本制劑具有以下優(yōu)點(diǎn)：外用溶液可方便患者浴后大面積涂抹，局部用藥可避免口服給藥的副作用，利于患者整個(gè)季節(jié)的長(zhǎng)期給藥；制劑中選用的主藥與輔料外用時(shí)幾乎沒(méi)有毒副作用，避免了傳統(tǒng)藥物激素類的嚴(yán)重不良反應(yīng)，使用后不僅瘙癢感消失，且自覺皮膚清涼、滋潤(rùn)、舒適，避免了軟膏劑或乳膏劑使用后的油膩不適感覺，大大提高了患者的順從性，從而保證了治療的成功率；將保濕潤(rùn)膚與止癢作用相結(jié)合，對(duì)秋冬季節(jié)皮膚干燥、瘙癢起到標(biāo)本兼治的作用；主藥和輔料在藥理上和藥劑上均無(wú)禁忌，處方中的20%乙醇具有皮膚散熱、清涼作用和一定的促滲作用。為有效控制該制劑質(zhì)量，筆者參考相關(guān)文獻(xiàn)[1～5]，并根據(jù)達(dá)克羅寧和薄荷腦的理化性質(zhì)，建立了以高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定制劑中達(dá)克羅寧的含量、旋光法測(cè)定薄荷腦的含量的方法，以及其他指標(biāo)控制的方法。結(jié)果表明，該制劑制備工藝簡(jiǎn)單、質(zhì)量可控。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

LC-20AD HPLC儀，包括SPD-20A紫外檢測(cè)器、CTO-10AS VP柱溫箱、Phenomenex lune色譜柱、SIL-20AL自動(dòng)進(jìn)樣器、UV-2201紫外分光光度計(jì)（日本島津公司）；WZZ-1型自動(dòng)指示旋光儀（上海物理光學(xué)儀器廠）；AG285電子天平（瑞士梅特勒公司）。

1.2 試藥

達(dá)克羅寧（鹽酸鹽，杭州良金生物科技有限公司，批號(hào)：2091203，含量：99.9%）；達(dá)克羅寧標(biāo)準(zhǔn)品（鹽酸鹽，批號(hào)：100423-200901，含量：100%）、薄荷腦標(biāo)準(zhǔn)品（批號(hào)：100728-200506，供含量測(cè)定用）均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；薄荷腦（上海新華香料廠，批號(hào)：20091203，含量：99.9%）；復(fù)方達(dá)克羅寧薄荷腦潤(rùn)膚止癢水（自制，批號(hào)：20090726-1、20090726-2、20090726-3，規(guī)格：每瓶100 mL，含量：達(dá)克羅寧0.5%、薄荷腦0.2%）；乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 處方與制備

2.1 處方

達(dá)克羅寧0.5 g，薄荷腦0.2 g，乙醇20 mL，甘油30 g，水加至100 mL。

2.2 制備

取薄荷腦溶于乙醇中，攪拌溶解，加入適量水、甘油攪勻，加入達(dá)克羅寧攪拌溶解，再加水至100 mL，攪勻，即得。

3 質(zhì)量控制

3.1 性狀

本品為無(wú)色的澄明液體，有薄荷腦及乙醇的特殊香氣，味初灼熱后清涼。

3.2 鑒別

達(dá)克羅寧：在“3.4.1”項(xiàng)下記錄的色譜中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品溶液主峰的保留時(shí)間一致。

薄荷腦：取本品少許，加硫酸2滴與香草醛結(jié)晶數(shù)粒，漸顯紅紫色，加水?dāng)?shù)滴，即顯紫堇色。

3.3 檢查

應(yīng)符合2010年版《中國(guó)藥典》二部“洗劑”項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定[6]。

3.4 含量測(cè)定

3.4.1 達(dá)克羅寧。

（1）溶液制備。精密稱取達(dá)克羅寧標(biāo)準(zhǔn)品20.13 mg，置于100 mL容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，得濃度為0.2013 mg·mL－1的標(biāo)準(zhǔn)品溶液；精密量取樣品1 mL，置于100 mL容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；按處方比例稱取除達(dá)克羅寧外的其他成分，按該制劑制備工藝制成空白制劑，其余按供試品溶液制備方法進(jìn)行，即得空白樣品溶液。

（2）檢測(cè)波長(zhǎng)的確定。精密量取標(biāo)準(zhǔn)品溶液3 mL，置于10 mL容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，以流動(dòng)相為空白，在190～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，結(jié)果達(dá)克羅寧在279 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，薄荷腦及輔料在此波長(zhǎng)處無(wú)干擾，故選擇279 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

（3）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。色譜柱：Phenomenex luna（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-水-三乙胺-冰醋酸＝55∶43.5∶1.0∶0.5；流速：0.5 mL·min－1；檢測(cè)波長(zhǎng)：279 nm；進(jìn)樣量：10 μL；柱溫：30 ℃。

取標(biāo)準(zhǔn)品溶液、供試品溶液和空白樣品溶液進(jìn)樣分析，結(jié)果以鹽酸達(dá)克羅寧計(jì)理論板數(shù)不低于3000，主峰與相鄰色譜峰的分離度不小于1.5，詳見圖1。

圖1 高效液相色譜圖A.空白樣品；B.標(biāo)準(zhǔn)品；C.供試品；1.達(dá)克羅寧Fig 1 HPLC chromatogramsA.blank sample；B.standard substance；C.sample；1.dyclonine

（4）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。精密量取達(dá)克羅寧標(biāo)準(zhǔn)品溶液1、2、3、4、5、6 mL，分別置于10 mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。分別取10 μL進(jìn)樣，各濃度進(jìn)樣3次，以濃度（c）對(duì)峰面積（A）進(jìn)行線性回歸。得回歸方程：A＝65692.96c－40105.4（r＝0.9995，n＝6）。結(jié)果表明，達(dá)克羅寧檢測(cè)濃度線性范圍為20.13～120.78 μg·mL－1。

（5）精密度試驗(yàn)。取同一濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，每次10 μL，記錄峰面積，計(jì)算得其含量的RSD＝1.4%（n＝5），表明方法精密度良好。

（6）穩(wěn)定性試驗(yàn)。取供試品溶液，在12 h內(nèi)每2 h測(cè)定1次，結(jié)果，峰面積值的RSD為1.8%，表明該溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

（7）加樣回收率試驗(yàn)。精密量取已知含量的同一批樣品溶液5 mL各6份，置于10 mL容量瓶中，分別加入60%、100%、140%的達(dá)克羅寧標(biāo)準(zhǔn)品，加流動(dòng)相稀釋至刻度，依法測(cè)定，按上述回歸方程計(jì)算含量及低、中、高濃度的平均回收率，結(jié)果見表1。

（8）樣品中達(dá)克羅寧含量測(cè)定。精密量取樣品1 mL，置于100 mL容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，取稀釋液10 μL進(jìn)樣，記錄色譜；另精密稱取達(dá)克羅寧標(biāo)準(zhǔn)品適量，用流動(dòng)相溶解并稀釋成約50μg·mL－1，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算出樣品中達(dá)克羅寧的含量，結(jié)果分別為標(biāo)示量的99.5%、99.6%、100.2%（n＝3）。

表1 達(dá)克羅寧回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）Tab 1 Results of recovery tests of dyclonin（en＝6）

3.4.2 薄荷腦。

（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。精密稱取薄荷腦標(biāo)準(zhǔn)品適量，加水制成濃度為1.13 mg·mL－1的溶液，然后精密吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL，分別置于10 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。按照2010年版《中國(guó)藥典》旋光法[4]，用2 dm旋光管，于（20±0.5）℃測(cè)定其在589.3 nm波長(zhǎng)下的旋光度，以旋光度（α）與濃度（c）建立回歸方程。得回歸方程：α＝86.46c+0.012（r＝0.9998）。結(jié)果表明，薄荷腦檢測(cè)濃度線性范圍為1.13～5.65 mg·mL－1。

（2）穩(wěn)定性試驗(yàn)。取薄荷腦標(biāo)準(zhǔn)品溶液放置0、1、2、4、8、12 h后測(cè)定其旋光度，結(jié)果基本不變，RSD＝0.12%，表明該溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

（3）精密度試驗(yàn)。取批號(hào)為20090726-1的樣品重復(fù)測(cè)定其含量，結(jié)果測(cè)得含量的RSD為0.6%。

（4）回收率試驗(yàn)。分別精密稱取薄荷腦適量，按處方比例模擬制備成3種不同濃度（80%、100%、120%）的制劑各2份，依法測(cè)定，按上述回歸方程計(jì)算含量及低、中、高濃度的平均回收率，結(jié)果見表2。

表2 薄荷腦回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）Tab 2 Result of recovery tests of mentho（ln＝6）

（5）樣品中薄荷腦含量測(cè)定。直接取樣品溶液，用2 dm旋光管，于（20±0.5）℃依法測(cè)定旋光度，用回歸方程計(jì)算含量，結(jié)果3批樣品含量分別為標(biāo)示量的100.1%、99.8%、99.6%（n＝3）。

4 討論

達(dá)克羅寧作為表面麻醉劑，在處方中具有止痛、止癢及殺菌作用；薄荷腦在處方中主要是清涼止癢作用；30%甘油在處方中主要是保濕作用；20%乙醇在處方中主要是清涼、促滲作用。

HPLC法測(cè)定達(dá)克羅寧的色譜條件中，若設(shè)定流速為0.5 mL·min－1，保留時(shí)間可達(dá)到 7.363 min，如設(shè)定為 1.0 mL·min－1，則保留時(shí)間小于5 min；進(jìn)樣量如為20 μL，則樣品峰太高，進(jìn)樣量為10 μL，峰高適宜；本次試驗(yàn)以達(dá)克羅寧峰計(jì)理論板數(shù)為9305，拖尾因子為1.2（采用峰面積法），滿足分析要求。本試驗(yàn)結(jié)果表明，采用HPLC法測(cè)定制劑中達(dá)克羅寧的含量，方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確；采用旋光法測(cè)定薄荷腦含量，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，儀器簡(jiǎn)單，適用于該制劑的快速分析。因此，本文建立的方法可作為該制劑的質(zhì)控方法。

[1]郭 珉，李珠華，趙遠(yuǎn)征，等.HPLC法測(cè)定芩寧軟膏中黃芩苷及鹽酸達(dá)克羅寧的含量[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2006，25（5）：469.

[2]楊躍龍.RP-HPLC法測(cè)定復(fù)方達(dá)克羅寧軟膏中主藥的含量[J].中國(guó)藥房，2008，19（4）：294.

[3]章國(guó)鈞.上海市醫(yī)院制劑手冊(cè)[M].第3版.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1995：87-88.

[4]國(guó)家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)藥典（一部）[S].2010年版.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：395-396、附錄41.

[5]夏新中，李萬(wàn)江，盧 靜，等.氣相色譜法測(cè)定皮炎平軟膏中薄荷腦的含量[J].長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，9（5）：65.

[6]國(guó)家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)藥典（二部）[S].2010年版.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄18.