2型糖尿病腎病患者血清白介素18、脂聯(lián)素檢測的臨床意義

唐 靈 陳春蓮 蘇桂蘭 甄瑞峰

(廣西桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院，廣西省桂林市樂群路95號，541001)

糖尿病腎病(Diabetic Nephropathy，DN)是2型糖尿病(Type2 Diabetic Mellitus，T2DM)嚴重的并發(fā)癥和患者主要的死亡原因之一，DN發(fā)病是多種機制共同作用的結果，大量研究表明，免疫和炎癥反應機制在DN的發(fā)生發(fā)展機制中起著重要的作用［1-2］。白介素18(Interleukin-18，IL-18)是活化的單核細胞/巨噬細胞分泌的一種前炎癥因子，與其他炎癥因子一起參與炎癥級聯(lián)反應［3］，且是心血管事件的一個預測因子［4-5］，有臨床研究表明其與糖尿病并發(fā)癥有關［6］，脂聯(lián)素作為新近發(fā)現(xiàn)的一種與慢性炎癥有關的脂肪因子，參與了糖尿病及其血管并發(fā)癥的發(fā)生［7-8］。本研究旨在探討DN不同發(fā)展階段血清IL-18和脂聯(lián)素水平變化，為DN的早期診斷及臨床防治提供一定的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 按1999年WHO糖尿病診斷標準選擇2009年10月-2010年5月在我院住院的T2DM患者97例。其中男48例，女49例;年齡(56.8±8.7)歲。根據(jù)尿白蛋白排泄率(UAER)分為3組:正常蛋白尿組(A組，UAER＜20μg/min)35例，微量蛋白尿組(B組，UAER 20～200μg/min)30例，大量白蛋白尿組(C組，UAER＞200μg/min)32例，全部病例均除外惡性腫瘤、急慢性感染、糖尿病急性并發(fā)癥、長期口服噻唑烷二酮類藥物及調(diào)脂藥、泌尿系感染、除糖尿病以外的繼發(fā)性腎臟疾病。并選擇我院同期健康體檢者35例作為對照組。其中男19例，女16例;年齡(55.7±11.4)歲。各組年齡、性別比較差異無統(tǒng)計學意義(均P＞0.05)。所有受試者均簽署知情同意書。

1.2 標本采集 所有受試者均過夜空腹8～12h，晨起抽靜脈血送生化室測定血糖、血脂、腎功、糖化血紅蛋白。另取靜脈血2～3mL靜置1h后，3000r/min離心5min分離血清，標記后貯存于-76℃低溫冰箱，同時測定血清脂聯(lián)素和IL-18。連續(xù)3天收集24h尿，記錄尿量，完成尿微量白蛋白檢測。

1.3 檢測方法

1.3.1 一般臨床資料 所有受試者測量血壓，以體重、身高計算體重指數(shù)(BMI)。次日晨空腹采靜脈血，采用氧化酶法測定FPG，膠體濾過法測定HbA1C，應用全自動生化分析儀測定 TG、TC、HDL-C、LDL-C、Scr、BUN;尿微量白蛋白采用高效免疫比濁法檢測，根據(jù)24h尿量計算UAER，3次取平均值。

1.3.2 血清脂聯(lián)素和IL-18 用ELISA方法檢測血清脂聯(lián)素和IL-18水平，ELISA試劑盒購自R＆D公司，實驗步驟按試劑盒說明書進行操作。根據(jù)所測標本的吸光度值，計算出各標本相應的脂聯(lián)素和IL-18濃度。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0軟件包進行統(tǒng)計學處理。計量資料以均數(shù)±標準差(ˉx±s)表示，各組指標比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD和SNK檢驗;計數(shù)資料比較用卡方檢驗;相關性采用Pearson相關分析和多元逐步回歸分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 一般資料比較 各組年齡、性別、體重指數(shù)(BMI)及舒張壓(DBP)比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，具有可比性;大量蛋白尿組與正常蛋白尿組、微量蛋白尿組比較病程、收縮壓(SBP)差異有統(tǒng)計學意義(P ＜0.01)，見表1。

2.2 實驗室結果比較

2.2.1 各組 FPG、HbA1C、TG、TC、HDL-C、LDL-C、BUN、Scr、UAER 比較 糖尿病 3組 FPG、HbA1C、TC、TG、LDL-C水平顯著高于正常蛋白尿組(P＜0.01)，而HDL-C低于正常對照組(P＜0.01);而大量白蛋白尿組BUN、Scr、UAER水平顯著高于其他3組(P＜0.01);微量蛋白尿組UAER高于正常蛋白尿組及正常對照組(P＜0.01)，見表2。

2.2.2 各組血清脂聯(lián)素及IL-18水平比較 3組患者血清IL-18水平明顯高于正常對照組(P＜0.05)，組間比較顯示隨著尿白蛋白排泄率的增加兩者水平增高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。正常蛋白尿組血清脂聯(lián)素低于對照組，微量蛋白尿組、大量蛋白尿組血清脂聯(lián)素高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，見表2。

2.3 單因素相關分析 IL-18與病程、SBP、HbA1c、FPG、TG、TC、LDL-C、BUN、Scr、UAER 呈不同程度正相關(P＜0.01)，與HDL-C呈負相關(P＜0.01)，且兩者互呈正相關(P＜0.01)。脂聯(lián)素與病程、SBP、BUN、Scr、UAER 呈正相關(P ＜0.01)，見表3、4。

表1 各組患者一般資料比較

表2 各組生化指標比較(ˉx±s)

表3 血清IL-18與觀察指標的相關性分析

表4 血清脂聯(lián)素與觀察指標的相關性分析

2.4 多元線性逐步回歸分析結果 分別以IL-18和脂聯(lián)素為應變量，年齡、病程、BMI、SBP、DBP、HbA1c、FPG、TG、TC、LDL-C、HDL-C、BUN、Scr、UAER 為自變量進行多元線性逐步回歸分析。結果顯示:病程、TG、LDL-C、Scr、UAER、IL-18 是脂聯(lián)素的獨立危險因素，見表5;脂聯(lián)素、HbA1c和Scr是IL-18的獨立危險因素，見表6。

表5 脂聯(lián)素的多元線性逐步回歸分析結果

表6 IL-18的多元線性逐步回歸分析結果

3 討論

糖尿病腎病是糖尿病的一個重要的微血管并發(fā)癥，已成為終末期腎病的最主要的原因之一。近年來，炎癥因子和脂肪細胞因子在糖尿病腎病發(fā)生、發(fā)展中的作用受到重視。

IL-18是1995年Okalnura等［9］首次從誘發(fā)的中毒性休克小鼠肝臟提取液中獲得的一種蛋白。該蛋白有著與白介素-12(Interleukin1-12，IL-12)相似的生物學活性，主要由活化的單核/巨噬細胞產(chǎn)生。本研究顯示:糖尿病患者血清IL-18水平高于正常對照組，且與病程、SBP、HbA1c、FPG、TG、TC、LDL-C、BUN、Scr、UAER呈不同程度正相關，與HDL-C呈負相關，這些變量均是胰島素抵抗的指示，可見IL-18與糖尿病的發(fā)生及胰島素抵抗有關。本研究還顯示:IL-18隨著尿白蛋白排泄率的增加逐漸增高，提示IL-18與2型糖尿病腎病的發(fā)生、發(fā)展有關。IL-18可能通過以下機制參與DN的發(fā)展:1)IL-18可促進近曲小管上皮細胞轉分化，可通過核因子-κB(NF-κB)胞內(nèi)信號轉導途徑誘導近端腎小管上皮細胞轉分化［10］;2)IL-18能調(diào)節(jié)腎小球系膜細胞的有絲分裂，促進其產(chǎn)生和釋放前列腺素，進一步引起腎小球微血管改變，在早期腎小球濾過率增高中起非常重要作用［11］;3)IL-18還可通過巨噬細胞的滲入和活化的另一途徑加重腎小球的損傷［12］;4)Nakamura A 等［13］報道:腎小管間質損傷的指標之一尿β-2微球蛋白的排泄量亦與IL-18有明確相關;提示糖尿病腎病患者IL-18的升高可引起小管間質的損傷;5)IL-18可導致IL-8，IL-1β，腫瘤壞死因子-a和細胞間粘附分子 -1等其他前炎癥因子的產(chǎn)生［3，14］，且 IL-18可上調(diào)細胞間粘附分子-1及內(nèi)皮細胞的凋亡，提示炎癥反應可促進糖尿病腎病的發(fā)展［15］。IL-18水平可作為糖尿病腎病進展的一預測因子。

脂聯(lián)素是由脂肪細胞分泌的一種特異性蛋白質。與肥胖、2型糖尿病、胰島素抵抗、抗炎、抗動脈硬化、調(diào)節(jié)血脂密切相關。正常蛋白尿組脂聯(lián)素水平低于對照組，當有DN時，隨著UAER的增加脂聯(lián)素水平逐漸增高，且與病程、SBP、Scr、UAER均呈正相關。提示脂聯(lián)素與DN的發(fā)生、發(fā)展相關。作用機制可能與炎癥反應密切相關。綜上所述，本實驗通過對2型糖尿病腎病血清IL-18及脂聯(lián)素水平的研究，顯示兩者通過促進炎癥反應，加速糖尿病腎病的發(fā)展。可通過兩者的聯(lián)合檢測，反映早期糖尿病腎損害及腎功能損害進展情況，為進一步明確2型糖尿病腎病發(fā)病機制提供依據(jù)。

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