• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    吉西他濱和絲裂霉素聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人肺癌細(xì)胞A549的作用

    2011-03-06 08:13:32趙可新李軍霞姜杉王偉剛胡建平單靖珊
    河北醫(yī)藥 2011年9期
    關(guān)鍵詞:吉西他濱絲裂霉素吉西

    趙可新 李軍霞 姜杉 王偉剛 胡建平 單靖珊

    吉西他濱和絲裂霉素聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人肺癌細(xì)胞A549的作用

    趙可新 李軍霞 姜杉 王偉剛 胡建平 單靖珊

    目的觀察吉西他濱和絲裂霉素聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人肺癌細(xì)胞A549的抑制效應(yīng),并探討其作用機(jī)制。方法 用MTT法檢測(cè)化療藥物對(duì)人肺癌細(xì)胞A549生長(zhǎng)的抑制作用;流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)細(xì)胞周期分布和凋亡率。結(jié)果 (1)絲裂霉素和吉西他濱單獨(dú)和聯(lián)合用藥可濃度依賴性抑制A549細(xì)胞的生長(zhǎng)。(2)絲裂霉素和吉西他濱在合用72 h后,當(dāng)Fa>0.18時(shí),絲裂霉素和吉西他濱合用指數(shù)CI均<1,兩種藥物之間是協(xié)同作用,當(dāng)Fa<0.18時(shí),合用指數(shù)CI大于1,兩種藥物之間為拮抗作用。(3)絲裂霉素和吉西他濱同時(shí)用藥時(shí)抑制率最高,其次是先用絲裂霉素后用吉西他濱,抑制率最低是先用吉西他濱后用絲裂霉素。(4)絲裂霉素和不同濃度的吉西他濱合用,除與2.5 μg/ml吉西他濱合用時(shí)CI>1外,其余均<1。10 μg/ml吉西他濱和不同濃度的絲裂霉素合用,除與0.0625 μg/ml合用時(shí)CI>1外,其余均<1。(5)絲裂霉素和吉西他濱單用和合用時(shí)對(duì)細(xì)胞周期和凋亡均有影響。結(jié)論 絲裂霉素和吉西他濱單獨(dú)和聯(lián)合用藥可濃度依賴性抑制A549細(xì)胞的生長(zhǎng)。不同用藥次序和藥物濃度比例也影響藥物聯(lián)合作用。

    吉西他濱;絲裂霉素;人肺癌A549;中效原理

    腫瘤是一群失去正常生長(zhǎng)調(diào)控機(jī)制,發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的自身細(xì)胞,其在人群中發(fā)病率高,全世界每年死于惡性腫瘤的患者高達(dá)數(shù)百萬(wàn)人[1],人們提出了多種治療方法包括手術(shù)治療、放療、化療、免疫治療等,其中化學(xué)治療仍是主要的治療方式,但是化學(xué)治療也受到選擇性低、不良反應(yīng)大、耐藥性等因素的限制,為了避免上述的缺點(diǎn),采用合理的聯(lián)合用藥方式對(duì)腫瘤的治療更具潛力。然而采用哪些藥物,劑量怎么搭配等以往多憑經(jīng)驗(yàn)。由于抗腫瘤藥物的療效差異很大,不同組織類型腫瘤對(duì)同一種藥物反應(yīng)不一致。因此在化療前進(jìn)行抗癌藥物敏感性測(cè)試,用中效原理定量分析各抗癌藥物之間的協(xié)同、相加、拮抗作用,將為臨床正確部署抗癌藥物聯(lián)合化療方案提供有價(jià)值的參考[2]。凋亡受阻是腫瘤發(fā)生的主要原因,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡是許多化療藥物抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的主要機(jī)制之一,另外,對(duì)于細(xì)胞周期的干擾也是許多化療藥物主要的作用機(jī)制[3,4]。本實(shí)驗(yàn)中,我們利用中效原理研究了絲裂霉素和吉西他濱聯(lián)合用藥方式對(duì)培養(yǎng)的人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549的作用以及對(duì)細(xì)胞周期和凋亡的影響。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器 酶標(biāo)儀(德國(guó)BMG公司);恒溫CO2培養(yǎng)箱(Kendro公司);電子天平(日本Olympus公司);倒置顯微鏡(江蘇富華儀器廠);恒溫水浴箱(Thermo Forma公司);超低溫冰箱(VILBER LOURMAT公司);VD-1320型潔凈工作臺(tái)(哈爾濱市東聯(lián)電子技術(shù)發(fā)展有限公司);Millipore純水機(jī)(美國(guó)Millipore公司)。

    1.2 藥品 RPMI-1640培養(yǎng)基(Gibco公司);胰酶(Gibco公司);青霉素(華北制藥集團(tuán)公司);鏈霉素(華北制藥集團(tuán)公司);胎牛血清(Gibco公司);DMSO(Sigma公司);胎盤藍(lán)(哈爾濱譽(yù)衡藥業(yè)有限公司);吉西他濱(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司);絲裂霉素(浙江海正藥業(yè)股份有限公司)。

    1.3 實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞系 人肺癌A549細(xì)胞株由河北醫(yī)科大學(xué)病

    理教研室惠贈(zèng),河北醫(yī)科大學(xué)藥理教研室傳代培養(yǎng)。

    1.4 方法

    1.4.1 細(xì)胞培養(yǎng):人肺癌A549細(xì)胞置于含10%小牛血清、100 U/ml青霉素及100 U/ml鏈霉素,pH值為7.2~7.4的RPMI-1640培養(yǎng)液中,于37℃,5%CO2和飽和濕度的培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)。1~2 d傳代1次。

    1.4.2 細(xì)胞毒的測(cè)定:取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的A549細(xì)胞制備細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后用1640培養(yǎng)基調(diào)細(xì)胞濃度為1×105個(gè)/ml。按100 μl/孔接種于96孔板,待細(xì)胞貼壁6 h后,輕輕吸去上清,分別加入所需濃度藥物200 μl,同時(shí)設(shè)不含藥物的陰性對(duì)照孔。每濃度設(shè)6孔,繼續(xù)培養(yǎng)72 h,在取樣前4 h加入MTT(濃度為 5 g/L,用0.1mol/LPBS 配制)20 μl,繼續(xù)培養(yǎng)4 h,輕輕棄去上清,每孔加入150 μl DMSO,微量振蕩器振蕩10 min,結(jié)晶物充分溶解后,酶標(biāo)儀上測(cè)每孔的570 nm的OD值(OD570)。通過(guò)下列公式計(jì)算細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率(Fa):生長(zhǎng)抑制率=(實(shí)驗(yàn)組OD570值-對(duì)照組OD570值)/對(duì)照組OD570值。

    吉西他濱藥物濃度為 2.5,5.0,10.0,20.0,40.0 μg/ml;絲裂霉素藥物濃度為 0.0625、0.125、0.25、0.5、1.0 μg/ml;吉西他濱+絲裂霉素聯(lián)合用藥組藥物濃度為逐一聯(lián)合應(yīng)用,分別為2.5+0.0625、5.0+0.125、10.0+0.25、20.0+0.5、40.0+1.0 μg/ml。

    研究不同藥物濃度依賴關(guān)系時(shí),采用絲裂霉素0.25 μg/ml和不上述同濃度的吉西他濱合用,采用10 μg/ml吉西他濱和上述不同濃度的絲裂霉素合用。

    1.4.3 中效劑量(Dm)及合用指數(shù)(CI)的計(jì)算:2個(gè)參數(shù)的計(jì)算參考文獻(xiàn)[5]。

    1.4.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期分布和凋亡率:收集絲裂霉素組、吉西他濱組和聯(lián)合用藥組培養(yǎng)72 h后A549細(xì)胞,胰酶消化后,離心去上清,加PBS將細(xì)胞打勻,轉(zhuǎn)入EP管中,再次離心去上清,加入預(yù)冷70%乙醇固定1 h,PBS洗2次,將等體積的細(xì)胞懸液和PI染液混合,4℃放置30min,混合液過(guò)300目尼龍網(wǎng)除去雜質(zhì),上機(jī)檢測(cè)。

    2 結(jié)果

    2.1 絲裂霉素和吉西他濱單獨(dú)和聯(lián)合用藥可依據(jù)濃度依賴性抑制A549細(xì)胞生長(zhǎng)情況 絲裂霉素在0.0625~1 μg/ml藥物濃度范圍內(nèi),用藥后72 h時(shí)抑制率增加到10.8% ~46.7%,IC50是1.07 μg/ml(表 1、2和圖 1)。吉西他濱在 2.5~40 μg/ml藥物濃度范圍內(nèi),用藥后72 h,抑制率增加到7.4% ~47.5%。IC50是49.62 μg/ml(表1、2和 圖2)。聯(lián)合應(yīng)用絲裂霉素和吉西他濱后,在2.5625~41 μg/ml藥物濃度范圍內(nèi),用藥后72 h時(shí)抑制率增加到 15.0% ~81.1%。IC50為9.68 μg/ml,其 中 含 絲 裂 霉 素 0.23 μg/ml 和 吉 西 他 濱9.45 μg/ml。見(jiàn)表 1、2 和圖 3。

    表1 絲裂霉素和吉西他濱單獨(dú)和聯(lián)合用藥72 h后對(duì)人肺癌A549細(xì)胞的作用n=6,±s

    表1 絲裂霉素和吉西他濱單獨(dú)和聯(lián)合用藥72 h后對(duì)人肺癌A549細(xì)胞的作用n=6,±s

    注:抑制率1:同時(shí)用藥的抑制率;抑制率2:先用絲裂霉素后用吉西他濱;抑制率3:先用吉西他濱后用絲裂霉素時(shí)的抑制率

    絲裂霉素 +絲裂霉素劑量(μg/ml)抑制率(%)吉西他濱劑量(μg/ml)抑制率(%)吉西他濱劑量(μg/ml)抑制率1(%)抑制率2(%)抑制率3(%)0.0625 10.8 2.5 7.4 2.5625 15.0 10.9 9.8 0.125 23.9 5 20.4 5.125 39.9 29.8 23.5 0.25 28.7 10 26.1 10.25 52.9 37.8 51.5 0.5 37.4 20 30.2 20.5 70.8 59.2 64.2 1 46.7 40 47.5 41 81.1 77.1 70.8

    表2 絲裂霉素和吉西他濱單獨(dú)和聯(lián)合用藥的相關(guān)系數(shù)(r)、斜率(b)、截距(a)和半數(shù)有效濃度(IC50)

    圖1 吉西他濱對(duì)A549腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用

    聯(lián)合用藥72 h后,絲裂霉素的IC50從單用的1.07 μg/ml降低到合用的0.23 μg/ml,降低了78.5%。吉西他濱的IC50從單用的49.62 μg/ml降低到9.45 μg/ml,降低了 81.0%。無(wú)論是絲裂霉素還是吉西他濱在合用后IC50均明顯降低。

    2.2 絲裂霉素和吉西他濱聯(lián)合用藥時(shí)的合用指數(shù)CI 在合用72 h后,當(dāng)Fa>0.18時(shí),絲裂霉素和吉西他濱合用指數(shù)CI均小于1,兩種藥物之間是協(xié)同作用,當(dāng)Fa<0.18時(shí),合用指數(shù)CI大于1,兩種藥物之間為拮抗。見(jiàn)表3、圖4。

    圖2 吉西他濱和絲裂霉素聯(lián)合用藥時(shí)在不同抑制率下的合用指數(shù)

    圖3 絲裂霉素和吉西他濱聯(lián)合用藥對(duì)人肺癌A549細(xì)胞的作用

    表3 絲裂霉素和吉西他濱聯(lián)合用藥時(shí)在不同抑制率下的合用指數(shù)

    2.3 絲裂霉素和吉西他濱用藥時(shí)間先后次序依賴關(guān)系 絲裂霉素和吉西他濱同時(shí)用藥時(shí)抑制率最高,其次是先用絲裂霉素,抑制率最低是先用吉西他濱。見(jiàn)表1、圖3。

    2.4 絲裂霉素和吉西他濱合用時(shí)不同藥物濃度依賴關(guān)系 絲裂霉素 0.25 μg/ml和不同濃度的吉西他濱合用,除與2.5 μg/ml合用時(shí) CI>1 外,其余均 < 1.10 μg/ml,吉西他濱和不同濃度的絲裂霉素合用,除與0.0625 μg/ml合用時(shí)CI>1外,其余均<1。見(jiàn)表4。

    2.5 絲裂霉素和吉西他濱單用或合用時(shí)對(duì)細(xì)胞周期和凋亡的作用 對(duì)照組細(xì)胞周期各比例分別為:G2/M期22.0%,G0/G1期59.6%,S期6.2%。應(yīng)用0.25 μg/ml絲裂霉素后,G0/G1期和S期降低到21.5%和17.5%,G2/M期細(xì)胞比例升高到69.6%,凋亡率增加到15.9%。應(yīng)用10 μg/ml吉西他濱后,G0/G1和G2/M期降低到53.8%和19.1%,S期細(xì)胞比例升高到27.2%,凋亡率升高24.7%。聯(lián)合用藥后,G0/G1和G2/M期細(xì)胞比例降低到53.6%和12.9%,S期細(xì)胞比例升高到33.3%,凋亡率升高44.7%。見(jiàn)表5、圖5。

    3 討論

    圖4 絲裂霉素對(duì)A549腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用

    表4 絲裂霉素和吉西他濱不同劑量聯(lián)合用藥時(shí)的抑制率和合用指數(shù)

    表5 絲裂霉素和吉西他濱單獨(dú)或聯(lián)合用藥對(duì)A549細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞周期分布的作用n=5,±s

    表5 絲裂霉素和吉西他濱單獨(dú)或聯(lián)合用藥對(duì)A549細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞周期分布的作用n=5,±s

    注:與對(duì)照組比較,*P <0.05,*P <0.01

    細(xì)胞周期分布(%)組別 劑量(μg/ml))G0/G1期 G2/M期 S期 凋亡率(%)對(duì)照0 56.5±3.7 22.0±1.2 21.5±2.6 6.2±1.9絲裂霉素 0.25 12.9±2.1# 69.6±1.3# 17.5±1.9* 15.9±1.3#吉西他濱 10 53.8±2.9 19.1±2.8 27.2±3.6+ 24.7±4.2#絲裂霉素+吉西他濱 0.25+10 53.6±3.5 12.9±1.2# 33.5±3.6# 44.7±0.6#

    圖5 絲裂霉素和吉西他濱單獨(dú)或聯(lián)合用藥對(duì)A549細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞周期分布的作用

    由于肺癌沒(méi)有有效的普查方法,患者在確診時(shí)已屬中晚期,手術(shù)治療的可能性極低,因此,化療成為延長(zhǎng)肺癌患者生命的重要方法之一,而肺癌單藥化療療效較差,且不良反應(yīng)明顯,合理的聯(lián)合用藥可減輕藥物毒性而療效不減[6]。在本實(shí)驗(yàn)中,我們研究了絲裂霉素和吉西他濱聯(lián)合用藥對(duì)人肺癌A549細(xì)胞的作用,絲裂霉素是一種烷化劑抗癌藥,它的兩個(gè)烷化中心可與DNA形成交叉連接,使細(xì)胞中DNA解聚,抑制DNA復(fù)制,還可引起DNA單鏈斷裂[7]。我們也用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)了絲裂霉素對(duì)細(xì)胞周期和凋亡率的影響,流式細(xì)胞術(shù)是一種檢測(cè)細(xì)胞周期和凋亡的確實(shí)可靠的實(shí)驗(yàn)方法[8],結(jié)果表明,絲裂霉素可濃度依賴性抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),與其使A549細(xì)胞停滯于G2/M期,誘發(fā)細(xì)胞凋亡有關(guān)。

    吉西他濱是一種新型的脫氧胞苷類似物和核苷還原酶抑制劑,對(duì)多種實(shí)體瘤具有良好的抗腫瘤活性,是一種藥物前體,被細(xì)胞攝入后,在細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚源x物吉西他濱二磷酸酯或三磷酸酯,可競(jìng)爭(zhēng)性抑制DNA鏈的延長(zhǎng),導(dǎo)致DNA片段形成和細(xì)胞死亡,發(fā)揮細(xì)胞毒作用[9,10]。我們的研究結(jié)果顯示,吉西他濱可濃度依賴性抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),其機(jī)制與吉西他濱誘發(fā)細(xì)胞凋亡有關(guān)。

    聯(lián)合應(yīng)用絲裂霉素和吉西他濱后,對(duì)A549細(xì)胞的抑制率明顯高于單獨(dú)用藥時(shí),絲裂霉素和吉西他濱的IC50與單獨(dú)用藥相比也均明顯降低。通過(guò)對(duì)CI的分析也表明,當(dāng)Fa>0.2時(shí),絲裂霉素和吉西他濱之間呈現(xiàn)協(xié)同作用,<0.2時(shí),呈現(xiàn)拮抗作用。這種化療藥物小劑量聯(lián)合呈現(xiàn)拮抗,大劑量出現(xiàn)協(xié)同的現(xiàn)象也曾有報(bào)道[11]。聯(lián)合應(yīng)用絲裂霉素和吉西他濱后,A549細(xì)胞明顯阻滯于S期,而且凋亡率明顯增加。

    絲裂霉素和吉西他濱給藥次序不同也影響結(jié)果,研究結(jié)果表明,兩種藥物同時(shí)用藥時(shí),對(duì)腫瘤細(xì)胞A549的抑制率最高,其次是先用絲裂霉素,這可能與先用細(xì)胞非周期性藥物殺死處于非增殖期的細(xì)胞(G0),然后用細(xì)胞周期特異性藥物增強(qiáng)療效有關(guān)[12]。

    順鉑的作用似烷化劑,主要作用靶點(diǎn)為DNA,干擾DNA的復(fù)制,屬于細(xì)胞周期時(shí)相非特異藥物,只要細(xì)胞處于活化的細(xì)胞周期,藥物就能起作用。隨著藥物作用時(shí)間的延長(zhǎng),活化期的細(xì)胞可被逐漸殺滅,而且處于靜止期(G0)的細(xì)胞活化后進(jìn)入細(xì)胞周期也可被藥物殺滅[13]。我們的研究結(jié)果顯示,順鉑可濃度依賴性抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),其機(jī)制與其阻滯細(xì)胞于G2/M期和誘發(fā)細(xì)胞凋亡有關(guān)。

    吡柔比星是半合成的蒽環(huán)類抗癌藥,進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)迅速嵌入DNA核酸堿基對(duì)間,干擾轉(zhuǎn)錄過(guò)程,阻止mRNA合成,抑制DNA聚合酶以及DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ活性,干擾DNA合成[14]。我們的研究結(jié)果顯示,吡柔比星可濃度依賴性抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),其機(jī)制與其阻滯細(xì)胞于S期和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡有關(guān)。

    聯(lián)合應(yīng)用吡柔比星和順鉑后,對(duì)A549細(xì)胞的抑制率明顯高于單獨(dú)用藥時(shí),吡柔比星和順鉑的IC50均比單獨(dú)用藥時(shí)均明顯降低。通過(guò)對(duì)CI的分析也表明,吡柔比星和順鉑之間呈現(xiàn)協(xié)同關(guān)系。聯(lián)合應(yīng)用吡柔比星和順鉑后,可阻滯細(xì)胞于S期,細(xì)胞凋亡率也明顯增加。

    吡柔比星和順鉑給藥次序不同也影響結(jié)果,兩種藥物同時(shí)用藥時(shí),對(duì)腫瘤細(xì)胞A549的抑制率最高,不同吡柔比星和順鉑濃度比例對(duì)細(xì)胞的抑制率也有明顯的影響。

    從本實(shí)驗(yàn)中,我們可以看到,小劑量聯(lián)合應(yīng)用化學(xué)藥物可明顯提高療效;但是,兩藥合用并非藥物濃度越大越好,適宜的濃度比例關(guān)系也是聯(lián)合用藥時(shí)需要考慮的因素。

    絲裂霉素和吉西他濱單獨(dú)或聯(lián)合用藥可濃度依賴性抑制A549細(xì)胞的生長(zhǎng)。在合用72 h后,當(dāng)Fa>0.18時(shí),兩種藥物之間是協(xié)同作用,當(dāng)Fa<0.18時(shí),兩種藥物之間為拮抗。合用時(shí)不同用藥次序和藥物濃度比例也影響藥物聯(lián)合作用。所有藥物的作用均與其誘導(dǎo)凋亡和影響細(xì)胞周期有關(guān),但對(duì)細(xì)胞周期的影響各不相同。

    1 鄭東慶,薄挽瀾,梁桃.三氧化二砷對(duì)人肺癌A549細(xì)胞凋亡及耐藥基因表達(dá)的影響.中國(guó)基層醫(yī)藥,2010,17:7-8.

    2 Nair SK,Verma A,Thomas TJ,et al.Synergistic apoptosis of MCF-7 breast cancer cells by 2-methoxyestradiol and bis(ethyl)norspermine.Cancer Lett,2007,250:311-322.

    3 Hannun AH.Apoptosis and the dilemma of cancer chemotherapy.Blood,1997,89:1845-1853.

    4 Glinsky GV,Glinsky VV,Ivanova AB,et al.Apoptosis and metastasis:increased apoptosis resistance of metastatic cancer cells is associated with the profound deficiency of apoptosis execution mechanisms.Cancer Lett,1997,115:185-193.

    5 趙可新,李軍霞,姜杉,等.吉西他濱和依托泊苷聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人卵巢癌3AO細(xì)胞系的作用.中國(guó)醫(yī)院用藥評(píng)價(jià)與分析,2008,8:526-530.

    6 Mortenson MM,Schlieman MG,Virudachalam S,et al.Effect of the proteasome inhibitor bortezomib alone and in combination with chemotherapy in the A549 non-small-cell lung cancercell line.Cancer Chemother Pharmacol,2004,54:343-353.

    7 Aphinives P,Bhudhisawasdi V,Saeseow O,et al.5-fluorouracil and mitomycin-C:effective,low-cost chemotherapy for colorectal cancer.J Med Assoc Thai,2006,89:1885-1889.

    8 Vermes I,Haanen C,Reutelingsperger C,et al.Flow cytometry of apoptotic cell death.J Immunol Methods,2000,243:167-190.

    9 Giovannetti E,Mey V,Danesi R,et al.Interaction between gemcitabine and topotecan in human non-small-cell lung cancer cells:effects on cell survival,cell cycle and pharmacogenetic profile.Br J Cancer,2005,92:681-689.

    10 Kroep JR,Loves WJ,Vander Wilt CL,et al.Pretreatment deoxycytidine kinase levels predict in vivo gemcitabine sensitivity.Mol Cancer Ther,2002,1:371-376.

    11 龔軍,王正文,朱明才,等.金雀異黃素和5-Fu對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞株(SW480)的相互作用的體外觀察.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2006,16:873-876.

    12 段紅,張俊文,湯為學(xué),等.5-氟尿嘧啶及絲裂霉素對(duì)人胃癌細(xì)胞株SGC-7901及BGC-823的相互作用的體外觀察.中國(guó)病理生理雜志,2002,18:259-261.

    13 Charoentum C,Thongprasert S,Chewaskulyong B,et al.Experience with gemcitabine and cisplatin in the therapy of inoperable and metastatic cholangiocarcinoma.World J Gastroenterol,2007,13:2852-2854.

    14 Tanaka T,Umesaki N.Radiation reduces pirarubicin sensitivity in human cervical squamous cell carcinoma cells.Oncol Rep,2005,13:1165-1168.

    The combination effect of gemcitabine with mitomycin on human lung cancer A549 cell line in vitro

    ZHAO Kexin,LI Junxia,JIANG Shan,et al.Central Hospital of China Petroleum Natural Gas Group CO.,LTD,Hebei,Langfang065000,China

    ObjectiveTo investigate the combination effect of gemcitabine with mitomycin on human lung cancer A549 cell line in vitro,and to explore its action mechanism.MethodsMTT assay was used to analyze the inhibition effect of chemotherapy drugs on the growth of human lung cancer A549 cell line,and the cell cycle and cell apoptosis were detected by flow cytometry.ResultsThe gemcitabine and mitomycin alone or combination application could inhibit the growth of human lung cancer A549 cell line in a time and concentration dependent mode.The combination index(CI)was less than 1 at 72h when Fa>0.18,which indicated that gemcitabine and mitomycin had synergistic effect.However,the combination index was more than 1 at 72h when Fa < 0.18,which indicated that gemcitabine and mitomycin had antagonistic effect.The combination application of gemcitabine with mitomycin could get the highest inhibitory rate,next,the moderate inhibitory rate was got when mitomycin was given prior to gemcitabine,and the lowest inhibitory rate was got when gemcitabine was given prior to mitocymin.The CI was all less than 1 when mitomycin was combined with gemcitabine at different concentrations.The gemcitabine and mitomycin alone or combination application had influence on the cell cycle and cell apoptosis.ConclusionThe gemcitabine and mitocymin alone or in combination application can inhibit the growth of human lung cancer A549 cell line in a time-and concentration-dependent manner.The different drug concentrations and medication succession may affect the synergistic effect of the drugs.

    gemcitabine;mitomycin;human lung cancer A549 cell line;lente principle

    R 730.5;R 734.2

    A

    1002-7386(2011)09-1301-04

    10.3969/j.issn.1002-7386.2011.09.007

    065000 河北省廊坊市,中國(guó)石油天然氣集團(tuán)公司中心醫(yī)院(趙可新、姜杉、王偉剛、胡建平、單靖珊);河北醫(yī)科大學(xué)藥理學(xué)教研室(李軍霞)

    李軍霞,050017 河北醫(yī)科大學(xué)藥理學(xué)教研室;E-mail:lyjunxia@yahoo.com.cn

    2011-01-14)

    ·論著·

    猜你喜歡
    吉西他濱絲裂霉素吉西
    普伐他汀對(duì)人胰腺癌細(xì)胞SW1990的影響及其協(xié)同吉西他濱的抑瘤作用
    吉西他濱或長(zhǎng)春瑞濱聯(lián)合順鉑治療晚期非小細(xì)胞肺癌的臨床效果
    非小細(xì)胞肺癌晚期患者應(yīng)用吉西他濱治療的護(hù)理體會(huì)
    培美曲塞聯(lián)合順鉑對(duì)比吉西他濱聯(lián)合順鉑一線治療晚期非鱗非小細(xì)胞肺癌的療效分析
    吉西他濱聯(lián)合順鉑治療晚期三陰乳腺癌的療效觀察
    重組人血小板生成素預(yù)防吉西他濱化療相關(guān)血小板減少癥的臨床觀察
    小梁切除術(shù)聯(lián)合絲裂霉素C治療青光眼臨床意義探析
    吡柔比星與絲裂霉素膀胱灌注化療防治腺性膀胱炎術(shù)后復(fù)發(fā)的效果比較
    惡性腫瘤患者應(yīng)用吉西他濱化療對(duì)凝血功能的影響
    不同濃度絲裂霉素C對(duì)高度近視患者LASEK手術(shù)后Haze的預(yù)防效果分析
    少妇人妻精品综合一区二区| 亚洲精品自拍成人| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 久久鲁丝午夜福利片| 日韩欧美一区视频在线观看 | 免费看不卡的av| 免费少妇av软件| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 99re6热这里在线精品视频| 久久女婷五月综合色啪小说 | 一级a做视频免费观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 大码成人一级视频| 爱豆传媒免费全集在线观看| 欧美人与善性xxx| 亚洲av免费高清在线观看| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲av男天堂| 日本wwww免费看| 深夜a级毛片| 久久99蜜桃精品久久| 亚洲成人中文字幕在线播放| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲av成人精品一二三区| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频 | 美女视频免费永久观看网站| 婷婷色av中文字幕| 乱码一卡2卡4卡精品| 人人妻人人看人人澡| 身体一侧抽搐| 国产精品福利在线免费观看| 亚洲自偷自拍三级| 国产人妻一区二区三区在| 国产大屁股一区二区在线视频| .国产精品久久| 少妇被粗大猛烈的视频| 国模一区二区三区四区视频| 国产日韩欧美在线精品| 制服丝袜香蕉在线| 国国产精品蜜臀av免费| 国产69精品久久久久777片| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 欧美成人精品欧美一级黄| 国产精品99久久久久久久久| 美女主播在线视频| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲av在线观看美女高潮| 久久久久久久久久久免费av| 日韩伦理黄色片| 一区二区三区四区激情视频| 欧美成人午夜免费资源| 国产男女超爽视频在线观看| 中国三级夫妇交换| 国产淫片久久久久久久久| 午夜精品一区二区三区免费看| 国产成人精品久久久久久| 成人国产av品久久久| 成人亚洲精品一区在线观看 | 午夜激情久久久久久久| 亚洲欧美一区二区三区国产| 久热久热在线精品观看| 国产乱来视频区| 少妇被粗大猛烈的视频| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产精品国产三级专区第一集| freevideosex欧美| 亚洲伊人久久精品综合| 在线观看国产h片| 一区二区三区乱码不卡18| 麻豆成人午夜福利视频| 国产一级毛片在线| 高清毛片免费看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 97在线人人人人妻| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲精品一二三| 国产老妇女一区| 亚洲精品亚洲一区二区| 男女啪啪激烈高潮av片| 成人亚洲精品av一区二区| 国产精品久久久久久久久免| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 黄色欧美视频在线观看| 国产伦理片在线播放av一区| 波野结衣二区三区在线| 91久久精品电影网| 日韩av在线免费看完整版不卡| 神马国产精品三级电影在线观看| av国产免费在线观看| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 听说在线观看完整版免费高清| av国产久精品久网站免费入址| 五月天丁香电影| 晚上一个人看的免费电影| 国产色婷婷99| 久久精品国产亚洲av涩爱| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 亚洲精品,欧美精品| 男女下面进入的视频免费午夜| 91久久精品国产一区二区成人| 99久久人妻综合| 国产熟女欧美一区二区| 国产av不卡久久| 水蜜桃什么品种好| 高清午夜精品一区二区三区| 国产精品久久久久久精品电影| 一区二区三区乱码不卡18| 黄色欧美视频在线观看| 午夜日本视频在线| 天天躁日日操中文字幕| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 久久久亚洲精品成人影院| 久久影院123| 美女视频免费永久观看网站| 精品熟女少妇av免费看| 超碰av人人做人人爽久久| 久久久久久久大尺度免费视频| 成人亚洲精品一区在线观看 | 久久精品国产自在天天线| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 欧美一级a爱片免费观看看| 午夜福利高清视频| 国产黄片视频在线免费观看| 午夜精品一区二区三区免费看| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产免费一区二区三区四区乱码| a级一级毛片免费在线观看| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 国产高清有码在线观看视频| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 午夜福利高清视频| 观看美女的网站| 国产在线一区二区三区精| 日本-黄色视频高清免费观看| 男女边吃奶边做爰视频| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 成人亚洲欧美一区二区av| 免费高清在线观看视频在线观看| 久久久久久久精品精品| 欧美成人午夜免费资源| 大香蕉久久网| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 美女高潮的动态| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲国产色片| 国产伦在线观看视频一区| 国内揄拍国产精品人妻在线| 最近2019中文字幕mv第一页| 久久久久国产网址| 国产av不卡久久| 欧美3d第一页| 亚洲av日韩在线播放| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲精品国产av蜜桃| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 在线观看免费高清a一片| 最近最新中文字幕大全电影3| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 观看美女的网站| av在线app专区| 午夜福利高清视频| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 男女啪啪激烈高潮av片| 国产免费一区二区三区四区乱码| 人妻 亚洲 视频| av免费观看日本| 一本久久精品| 内射极品少妇av片p| 亚洲av.av天堂| 国产美女午夜福利| www.av在线官网国产| 日韩大片免费观看网站| 久热久热在线精品观看| 日韩人妻高清精品专区| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲精品成人久久久久久| 美女cb高潮喷水在线观看| 欧美高清成人免费视频www| 精品国产乱码久久久久久小说| 毛片女人毛片| 在线精品无人区一区二区三 | 日本欧美国产在线视频| 看免费成人av毛片| 欧美少妇被猛烈插入视频| 亚洲av不卡在线观看| 欧美xxⅹ黑人| 91精品伊人久久大香线蕉| 日韩视频在线欧美| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲国产精品成人久久小说| 不卡视频在线观看欧美| 草草在线视频免费看| 搡老乐熟女国产| 一区二区三区免费毛片| 99久久精品国产国产毛片| 亚洲国产精品成人久久小说| 免费少妇av软件| 国产精品福利在线免费观看| 美女内射精品一级片tv| 好男人在线观看高清免费视频| 国产精品人妻久久久影院| 哪个播放器可以免费观看大片| 看免费成人av毛片| tube8黄色片| 三级经典国产精品| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 丰满少妇做爰视频| 国产伦理片在线播放av一区| 精品午夜福利在线看| 成人二区视频| 国产有黄有色有爽视频| 69av精品久久久久久| 精品一区二区三卡| 99热国产这里只有精品6| 下体分泌物呈黄色| 国产熟女欧美一区二区| 在线观看免费高清a一片| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 亚洲怡红院男人天堂| 97精品久久久久久久久久精品| av天堂中文字幕网| 最近中文字幕高清免费大全6| av在线老鸭窝| 日韩制服骚丝袜av| 美女高潮的动态| 亚洲av日韩在线播放| 欧美激情在线99| 久热这里只有精品99| 亚洲国产av新网站| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 成人二区视频| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| videossex国产| 亚洲国产精品999| 大码成人一级视频| 乱码一卡2卡4卡精品| 欧美日韩视频精品一区| 午夜激情福利司机影院| 1000部很黄的大片| 日韩欧美精品免费久久| 国产一区二区三区综合在线观看 | 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 亚洲国产色片| av天堂中文字幕网| 久久97久久精品| 国产欧美日韩精品一区二区| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 亚洲av日韩在线播放| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 在线观看美女被高潮喷水网站| 日韩视频在线欧美| 爱豆传媒免费全集在线观看| av黄色大香蕉| 亚洲欧美成人综合另类久久久| a级毛色黄片| 永久网站在线| 插阴视频在线观看视频| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 男女边吃奶边做爰视频| 国产高清三级在线| 美女国产视频在线观看| 国产爽快片一区二区三区| 免费高清在线观看视频在线观看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲内射少妇av| 又爽又黄a免费视频| 精品人妻视频免费看| 乱系列少妇在线播放| 高清午夜精品一区二区三区| 国产精品久久久久久av不卡| 黄色配什么色好看| 嫩草影院新地址| 赤兔流量卡办理| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久久久久久久国产电影| av国产免费在线观看| 一级黄片播放器| 国产精品一区二区性色av| av国产久精品久网站免费入址| 伊人久久精品亚洲午夜| 免费大片18禁| 欧美日本视频| 亚洲精品国产成人久久av| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲欧洲国产日韩| 欧美3d第一页| 国产精品无大码| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 亚洲精品久久午夜乱码| 特级一级黄色大片| 久久综合国产亚洲精品| 伦精品一区二区三区| 男女国产视频网站| a级一级毛片免费在线观看| 各种免费的搞黄视频| 亚洲图色成人| 国产伦精品一区二区三区视频9| 国产精品久久久久久精品古装| 午夜日本视频在线| 午夜激情福利司机影院| freevideosex欧美| 免费在线观看成人毛片| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 午夜激情福利司机影院| 日日啪夜夜撸| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲精品亚洲一区二区| 99热全是精品| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产黄色免费在线视频| 久久久久性生活片| av在线观看视频网站免费| 日韩 亚洲 欧美在线| 制服丝袜香蕉在线| 美女cb高潮喷水在线观看| 夫妻性生交免费视频一级片| videossex国产| 久久久久久久久久久免费av| 大片免费播放器 马上看| 天天一区二区日本电影三级| 超碰av人人做人人爽久久| 久久久欧美国产精品| 色哟哟·www| 高清在线视频一区二区三区| 国产精品一及| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 精品国产三级普通话版| 久久精品国产a三级三级三级| 日韩精品有码人妻一区| 久久精品国产a三级三级三级| 在线观看一区二区三区| 亚洲精品456在线播放app| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 水蜜桃什么品种好| 日日啪夜夜撸| 免费看av在线观看网站| 亚洲精品成人久久久久久| 一级av片app| 久久99蜜桃精品久久| 99热这里只有是精品在线观看| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲精品视频女| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲av欧美aⅴ国产| 一本一本综合久久| 欧美精品一区二区大全| 男人爽女人下面视频在线观看| 日本-黄色视频高清免费观看| 男插女下体视频免费在线播放| 国产探花极品一区二区| 五月玫瑰六月丁香| 我要看日韩黄色一级片| 在线观看三级黄色| 美女cb高潮喷水在线观看| kizo精华| 久久99热这里只有精品18| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产成人精品福利久久| 精品久久久久久久久av| 内地一区二区视频在线| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 亚洲精品国产av成人精品| 国产成人一区二区在线| 我的女老师完整版在线观看| 国产精品一二三区在线看| 国产av码专区亚洲av| 超碰av人人做人人爽久久| 夜夜爽夜夜爽视频| 黄片wwwwww| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产av码专区亚洲av| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产色爽女视频免费观看| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 久久久久久久久久成人| 美女国产视频在线观看| 三级国产精品片| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 一区二区av电影网| 春色校园在线视频观看| 日本熟妇午夜| 亚洲国产欧美人成| 高清在线视频一区二区三区| av在线观看视频网站免费| 亚洲av免费高清在线观看| 国产精品一区二区三区四区免费观看| av一本久久久久| av在线老鸭窝| 99热国产这里只有精品6| 亚洲精品第二区| 国产熟女欧美一区二区| 久久精品久久精品一区二区三区| 秋霞伦理黄片| 日韩大片免费观看网站| 九九爱精品视频在线观看| 国产精品成人在线| 亚洲欧美一区二区三区国产| 色网站视频免费| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲人成网站在线播| 久久久午夜欧美精品| 国产在视频线精品| 免费av观看视频| 亚洲av.av天堂| 性色av一级| 三级经典国产精品| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 午夜福利视频1000在线观看| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 777米奇影视久久| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 免费看a级黄色片| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲成色77777| 校园人妻丝袜中文字幕| 久久久欧美国产精品| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲精品,欧美精品| 简卡轻食公司| 国产有黄有色有爽视频| 欧美zozozo另类| 在线精品无人区一区二区三 | 欧美精品国产亚洲| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 久久久午夜欧美精品| 在线 av 中文字幕| 亚洲av二区三区四区| 亚洲国产最新在线播放| av在线蜜桃| 秋霞在线观看毛片| 精华霜和精华液先用哪个| 国产精品伦人一区二区| 欧美日韩在线观看h| 亚洲国产成人一精品久久久| 亚洲精品乱久久久久久| 国产精品人妻久久久久久| 最近中文字幕高清免费大全6| 欧美最新免费一区二区三区| 在线 av 中文字幕| 国产亚洲5aaaaa淫片| 极品教师在线视频| 日日撸夜夜添| 成人美女网站在线观看视频| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 久久精品国产a三级三级三级| 欧美高清成人免费视频www| 亚洲欧洲国产日韩| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| eeuss影院久久| 丝袜脚勾引网站| 99精国产麻豆久久婷婷| 美女内射精品一级片tv| 精品少妇黑人巨大在线播放| 欧美性感艳星| 国产成人午夜福利电影在线观看| 久久久久久国产a免费观看| videos熟女内射| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 晚上一个人看的免费电影| 亚洲熟女精品中文字幕| 婷婷色av中文字幕| 亚洲av国产av综合av卡| 久久人人爽人人片av| 欧美精品一区二区大全| 美女cb高潮喷水在线观看| h日本视频在线播放| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 在线精品无人区一区二区三 | 精品久久久久久久久av| 成人美女网站在线观看视频| 日韩大片免费观看网站| 日日啪夜夜爽| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 国产精品蜜桃在线观看| 久久国产乱子免费精品| 国产亚洲一区二区精品| 免费看a级黄色片| 美女高潮的动态| 黄片无遮挡物在线观看| 国产亚洲一区二区精品| 国产黄频视频在线观看| 特大巨黑吊av在线直播| 在线观看三级黄色| 内射极品少妇av片p| 插阴视频在线观看视频| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲精品国产av蜜桃| 欧美精品国产亚洲| 伊人久久精品亚洲午夜| 一本一本综合久久| 亚洲熟女精品中文字幕| 成人美女网站在线观看视频| 综合色丁香网| 亚洲欧美精品自产自拍| 性色av一级| 国产成人免费观看mmmm| 在线播放无遮挡| 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 日本三级黄在线观看| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 国产精品熟女久久久久浪| 国产精品成人在线| tube8黄色片| 国产精品女同一区二区软件| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 国产乱人视频| 免费黄网站久久成人精品| 有码 亚洲区| 色综合色国产| 国产精品一区www在线观看| 日本色播在线视频| 在线观看一区二区三区激情| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 啦啦啦在线观看免费高清www| 午夜免费观看性视频| 国产亚洲最大av| 国产精品不卡视频一区二区| 看非洲黑人一级黄片| 日韩成人av中文字幕在线观看| 久久久欧美国产精品| 一级毛片电影观看| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 777米奇影视久久| 午夜精品一区二区三区免费看| 高清av免费在线| 国产精品国产av在线观看| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲在久久综合| 色播亚洲综合网| 99视频精品全部免费 在线| 国产亚洲av嫩草精品影院| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 黄色视频在线播放观看不卡| 亚洲av国产av综合av卡| 女人被狂操c到高潮| 久久精品国产自在天天线| 亚洲图色成人| 爱豆传媒免费全集在线观看| 日韩电影二区| 男女国产视频网站| 久久精品国产亚洲av涩爱| 男男h啪啪无遮挡| av.在线天堂| 水蜜桃什么品种好| 免费看a级黄色片| 久久久久久久国产电影| 99久久中文字幕三级久久日本| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| a级毛片免费高清观看在线播放| 91狼人影院| 色播亚洲综合网| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲精品456在线播放app| 少妇的逼好多水| 成人亚洲精品一区在线观看 | 久久精品夜色国产| 国产精品一及| 免费看光身美女| 水蜜桃什么品种好| 国产成人91sexporn| 欧美日本视频| 五月天丁香电影| 精品国产三级普通话版| 日韩在线高清观看一区二区三区| 婷婷色综合www| 美女主播在线视频| 午夜免费男女啪啪视频观看| 亚洲国产最新在线播放| 深夜a级毛片| 秋霞伦理黄片| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| av播播在线观看一区| 国产探花在线观看一区二区| 大片免费播放器 马上看| 国产精品偷伦视频观看了| 国产色婷婷99| 性插视频无遮挡在线免费观看| 只有这里有精品99| 午夜精品一区二区三区免费看| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲av成人精品一区久久| 色播亚洲综合网| 蜜臀久久99精品久久宅男| 夜夜爽夜夜爽视频| 亚洲高清免费不卡视频| 91aial.com中文字幕在线观看| 一级毛片aaaaaa免费看小| 午夜老司机福利剧场| 精华霜和精华液先用哪个| 国产午夜精品一二区理论片| 美女cb高潮喷水在线观看| 在线观看一区二区三区| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 亚洲国产av新网站| 99re6热这里在线精品视频| 狂野欧美激情性bbbbbb| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产精品.久久久| 美女高潮的动态| 欧美国产精品一级二级三级 |