活絡(luò)效靈丹對異丙腎上腺素致大鼠心肌缺血的影響*

仰 薇，施 婧，韓向東

心肌缺血是指各種原因引起冠狀動(dòng)脈血流量降低，致使心肌氧等物質(zhì)供應(yīng)不足和代謝產(chǎn)物清除減少的臨床狀態(tài)?；罱j(luò)效靈丹是活血化瘀的經(jīng)典方劑，出自清代名醫(yī)張錫純的《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》，具有活血祛瘀、通絡(luò)止痛的作用，主治氣血瘀滯、心腹疼痛、腿臂疼痛、跌打瘀腫、內(nèi)外瘡瘍以及癥瘕積聚等，多用于傷科病證。但近年開始應(yīng)用與治療冠心病等心肌缺血性心臟病，但尚缺乏系統(tǒng)的抗心肌缺血實(shí)驗(yàn)。本論文采用異丙腎上腺素誘導(dǎo)的急性心肌缺血大鼠模型，考察活絡(luò)效靈丹對抗心肌缺血的作用。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

SD雄性大鼠，清潔級，體質(zhì)量200g～250g，由上海中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(許可證號SCXK(滬)2005-2007)。

1.2 藥物

活絡(luò)效靈丹水煎液，上海中醫(yī)藥大學(xué)方劑實(shí)驗(yàn)室制備;血栓心脈寧片，吉林華康藥業(yè)股份有限公司(批號080909);0.9%生理鹽水，上海長江富民金山制藥有限公司(批號08102104);鹽酸異丙腎上腺素注射液，上海禾豐制藥有限公司(批號080402);肌酸激酶(CK)測試盒、乳酸脫氫酶(LDH)測試盒，南京建成生物工程研究所(批號20100427)。

1.3 儀器

BS124S型電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司);XS105DU型電子天平(瑞士梅特勒-托利多公司);HHS型電熱恒溫水浴鍋(上海博迅實(shí)業(yè)有限公司);海爾 SC-329型防爆冰箱(青島海爾集團(tuán));臺(tái)式高速離心機(jī)，centrifuge 5804R，德國EPPENDORF公司;電熱恒溫水浴鍋，DK-S22型，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;XW-80A型旋渦混合器，Q/DAAK2-2000，上海醫(yī)大儀器廠;冰箱，BCD-458W，Haire公司;紫外/可見光分光光度計(jì)，UV754N型，上海精密科學(xué)儀器廠;Powerlab/8SP八通道生物信號記錄系統(tǒng)，Model:ML785，Serial:SP9825;精密移液器，F(xiàn)innpipette Digital，F(xiàn)inland。

1.4 活絡(luò)效靈丹對異丙腎上腺素致心肌缺血大鼠的影響實(shí)驗(yàn)

1.4.1 主要試劑的配制 精確稱量當(dāng)歸、乳香、丹參、沒藥各95g。加蒸餾水浸泡3h，水煎2次，濾去水煎液壓榨藥渣，合并2次水煎液。用紗布反復(fù)過濾水煎液，濾去不溶性雜質(zhì)。直火濃縮至352ml，得到濃度為108%g/ml的高劑量受試藥。用蒸餾水梯度等比稀釋高濃度藥液，制得54%g/ml的中劑量受試藥 200ml，27%g/ml的低劑量受試藥200ml。取片重0.4g的血栓心脈寧中成藥片劑10片，加200ml蒸餾水完全溶解，制得2%g/ml的陽性藥溶液。

1.4.2 實(shí)驗(yàn)方法 取200g～250g SD大鼠雄性48只，隨機(jī)分為活絡(luò)效靈丹高劑量組、活絡(luò)效靈丹中劑量組、活絡(luò)效靈丹低劑量組、陽性對照組、模型組及正常組6組。高劑量組灌胃給予活絡(luò)效靈丹大劑量(10.8g/kg)，中劑量組給予活絡(luò)效靈丹中劑量(5.4g/kg)，低劑量組給予活絡(luò)效靈丹小劑量(2.7g/kg)，陽性對照組給予心脈寧(0.2g/kg)，以上各給藥組均用雙蒸水配制成溶液按10 mL/kg劑量灌服，模型對照組、正常對照組用蒸餾水10mL/kg灌服。各組灌胃均每日1次，連續(xù)7 d。第7天晚上禁食不禁水。第8天測量體重，末次給藥30 min后用3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，背位固定，將針狀電極插入四肢皮下，用Powerlab/4SP生理信號采集與分析系統(tǒng)(Adinstru—ments，Australia)描記標(biāo)準(zhǔn)肢體Ⅱ?qū)?lián)心電圖(ECG)，記錄正常時(shí)段的心電圖，然后除正常組外的其他各組腹腔注射鹽酸異丙腎上腺(ISO)4mg/kg。記錄注射 ISO 后 2、5、10、15、20、30 min時(shí)間點(diǎn)的心電圖，測量給ISO后ST段高度，計(jì)算ST段偏移的總毫伏數(shù)(ΣST)作為心肌缺血指標(biāo)(S－T段偏移的絕對值(S－T)ΣST=(2min時(shí)ST段毫伏數(shù)－0min時(shí) ST段毫伏數(shù))+(5min時(shí) ST段毫伏數(shù) －0min時(shí) ST段毫伏數(shù))+(10min時(shí) ST段毫伏數(shù)－0min時(shí) ST段毫伏數(shù))+……(30min時(shí)ST段毫伏數(shù)－0min時(shí) ST段毫伏數(shù))。記錄心電參數(shù)后，大鼠腹主動(dòng)脈取血并處死大鼠，立即取出心臟，以冰生理鹽水洗去殘留血液，除去大血管、結(jié)締組織，濾紙吸干(一部分戊二醛固定，一部分福爾馬林固定)。離心并分離血清，用試劑盒測定肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量。

1.4.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所有數(shù)據(jù)用珋x±s表示;用組間q檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，比較有無顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 活絡(luò)效靈丹對異丙腎上腺素致急性心肌缺血大鼠心電圖ST的影響

表1 活絡(luò)效靈丹對異丙腎上腺素致急性心肌缺血大鼠ΣST的影響(珋x±s，n=8)

表2顯示，模型組的ΣST比正常組明顯增高(P＜0.05);活絡(luò)效靈丹各給藥組與模型組相比，ΣST明顯降低，差異具有顯著意義(P＜0.05)，其中中劑量組效果最明顯。

表2 活絡(luò)效靈丹對異丙腎上腺素致急性心肌缺血大鼠血清CK、AST、LDH的影響(珋x±s，n=8)

2.2 活絡(luò)效靈丹對異丙腎上腺素致急性心肌缺血大鼠血清CK、AST、LDH的影響

表2顯示，與正常組比較，模型組血清 CK、LDH、AST明顯增高(P＜0.05)?；罱j(luò)效靈丹高中低劑量組與模型組比較，血清 LDH、AST明顯降低(P＜0.05);活絡(luò)效靈丹中低劑量組與模型組比較，血清CK明顯降低(P＜0.05)，其中高劑量血清CK與模型組相比有所降低，但差異不顯著(P＞0.05)。

3 討論

心肌缺血是指各種原因引起冠狀動(dòng)脈血流量降低，致使心肌氧等物質(zhì)供應(yīng)不足和代謝產(chǎn)物清除減少的臨床狀態(tài)［1］。臨床心肌缺血的發(fā)生主要與冠狀動(dòng)脈血流量減少相關(guān)，任何引起冠狀動(dòng)脈灌注壓下降和/或冠狀血管阻力增高的因素均可引起冠狀動(dòng)脈供血不足和心肌缺血［2］。

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化是引起臨床心肌缺血的最常見(95%以上)和最重要的病因，取決于粥樣斑塊生長速度和冠脈重構(gòu)的平衡。而冠狀動(dòng)脈痙攣也可引起心肌缺血、缺氧損傷，冠狀動(dòng)脈嚴(yán)重痙攣者可引發(fā)心肌梗死甚至猝死［3］。心絞痛及心肌梗死時(shí)兒茶酚胺增多，引起心臟血液動(dòng)力學(xué)改變，心肌耗氧量增加，導(dǎo)致心肌缺氧甚至壞死［4］。心肌厚度增加時(shí)，心供血/心肌比值不足，毛細(xì)血管間距增加，導(dǎo)致心肌營養(yǎng)不良［5］。心肌缺血時(shí)心肌能量利用發(fā)生障礙，可引起左室舒張不全［6］。左室舒張期順應(yīng)性降低或左室僵硬是引起左室舒張功能衰竭的重要原因之一［7］。

心肌缺血引起的心臟疾患及心前區(qū)疼痛屬中醫(yī)“胸痹”、“心痛”范疇，同時(shí)結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)和中藥藥理學(xué)的研究選擇用藥［8］。活血化瘀是當(dāng)前治療心肌缺血的重要手段，中藥復(fù)方特別是具有活血化瘀作用的中藥復(fù)方在治療心肌缺血中發(fā)揮了重要的作用，常用的活血化瘀方劑有血府逐瘀湯［9］、丹參飲［9］、失笑散［11］、桃紅四物湯［12］等。

CK、LDH、AST是心肌缺血、心肌細(xì)胞損傷所釋放的介質(zhì)，可以反映心肌缺血及損傷程度。通過以上實(shí)驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn)，活絡(luò)效靈丹能有效降低異丙腎上腺素誘導(dǎo)的急性心肌缺血大鼠ΣST的升高，降低其血清CK、LDH、AST含量，從而達(dá)到減輕心肌耗氧量和心肌缺血的作用。結(jié)果表明，活絡(luò)效靈丹對大鼠心肌缺血具有明顯的保護(hù)作用，能夠顯著降低心肌損傷程度，改善缺血心肌供氧-需氧失衡的狀態(tài)，其機(jī)制可能是通過改善心肌代謝及血流動(dòng)力學(xué)，減輕心肌細(xì)胞受損程度等多途徑發(fā)揮抗心肌缺血作用。

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