李寶聚博士診病手記（四十）生菜菌核病的診斷、發(fā)生規(guī)律及防治技術(shù)

周慧敏 謝學(xué)文 李寶聚

生菜即葉用萵苣，為菊科、萵苣屬一年或二年生草本植物。生菜菌核?。↙actuca sativa Sclerotinia）在全球各個(gè)生菜種植區(qū)均有發(fā)生，是生菜生產(chǎn)中的重要 病 害 之 一 （Waipara，2006；Chitrampalam et al.，2010），嚴(yán)重影響著生菜的產(chǎn)量和品質(zhì)。2011年，河北省張家口市赤誠(chéng)縣樣田鄉(xiāng)農(nóng)民種植的生菜大面積發(fā)病，幼苗即開始發(fā)病，栽種到田間后，生菜生長(zhǎng)停滯，不久即死亡。發(fā)病植株容易拔起，拔出后可見根部變黑色（彩色圖版1），葉片基部呈水浸狀腐爛（彩色圖版2），有的部位有少量的白色菌絲層。當(dāng)?shù)剞r(nóng)民于5月23日親自送病樣到中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所菜病綜防組請(qǐng)求幫助，經(jīng)鑒定該病害為生菜菌核病。

隨著蔬菜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，菌核病在我國(guó)各個(gè)生菜種植區(qū)的露地和保護(hù)地栽培中普遍發(fā)生，已成為影響我國(guó)生菜生產(chǎn)的重要病害之一。自然條件下，生菜菌核病病原菌可以菌核的形式混雜于種子中，也可隨病殘?bào)w或以菌核的形式殘留在土壤中度過不良環(huán)境，當(dāng)條件適宜時(shí)即可萌發(fā)并傳播蔓延，并可隨著帶病幼苗傳到健康田塊，防治難度比較大。病害一旦發(fā)生嚴(yán)重影響生菜的質(zhì)量，給種植者造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，掌握生菜菌核病的發(fā)生規(guī)律和防治技術(shù)對(duì)控制該病的大規(guī)模發(fā)生具有重要的意義。

1 發(fā)病癥狀

生菜在苗期和成株期均可感染菌核病，受害部位主要是莖基部，在生菜生長(zhǎng)的中后期發(fā)病最為嚴(yán)重，發(fā)病部位由菌絲體集結(jié)成結(jié)構(gòu)松緊不一，表面光滑或粗糙，形狀、大小、顏色不同的菌核。

1.1 莖基部癥狀 幼苗期生菜感染病原菌后，育苗田塊會(huì)出現(xiàn)大面積的幼苗猝倒（彩色圖版3），帶菌幼苗栽種到田間，植株生長(zhǎng)停滯，逐漸干枯死亡（彩色圖版4）。成株期生菜莖基部感染病原菌后，初期為黃褐色至褐色水浸狀，后擴(kuò)展至整個(gè)莖部，使莖基部腐爛，引起植株倒伏（彩色圖版5），有時(shí)會(huì)在莖基部形成開裂（彩色圖版6），濕度大時(shí)發(fā)病部位產(chǎn)生濃密的白色絮狀菌絲（彩色圖版7），后期產(chǎn)生菌核（彩色圖版8），病害繼續(xù)向上發(fā)展引起葉片腐爛，形成葉腐和莖基腐，最后致植株腐爛或枯死（彩色圖版9、10）。

1.2 葉片癥狀 靠近地面的葉片和葉柄最先感病，逐漸向上部蔓延（彩色圖版11）。葉柄感病后呈水浸狀，初期黃褐色，后期灰褐色。氣候干燥時(shí)，葉片呈干腐狀（彩色圖版12），濕度大時(shí)，葉片呈濕腐狀腐爛，上面生濃密的白色棉絮狀菌絲（彩色圖版13），后期產(chǎn)生菌核（彩色圖版14），有時(shí)可在葉片邊緣形成近“V”字形病斑（彩色圖版15）。

生菜菌核病與軟腐病不同，菌核病發(fā)病后病部形成濃密的白色棉絮狀菌絲，后期產(chǎn)生菌核，并且菌核病前期不會(huì)產(chǎn)生惡臭，而軟腐病則與之相反。有的地區(qū)，生菜生長(zhǎng)前期感染菌核病后，后期感染腐生的細(xì)菌，也會(huì)產(chǎn)生惡臭。

2 病原菌

生菜菌核病是一類世界性病害，在中國(guó)、美國(guó)、加拿大、新西蘭等國(guó)均有該病害嚴(yán)重發(fā)生的報(bào)道，其病原菌以核盤菌Sclerotinia sclerotiorum（Boland&Hall，1994） 和小菌核菌 Sclerotinia minor （Melzer et al.，1997）為主，另外在我國(guó)湖北神農(nóng)架還有雪腐核盤菌 Sclerotinia nivalis（Li et al.，1995）引起的生菜菌核病的報(bào)道。

生菜菌核病的病原菌均屬子囊菌亞門核盤菌科真菌。菌絲無(wú)色、纖細(xì)、具有明顯的分枝和較多的隔膜，病原菌不產(chǎn)生無(wú)性孢子。在田間和培養(yǎng)條件下均能產(chǎn)生菌核，菌核長(zhǎng)橢圓形至不規(guī)則形，成熟后為黑色，形狀及大小與著生部位有關(guān)，在適宜的溫度條件下，菌核萌發(fā)可產(chǎn)生1～50個(gè)子囊盤，一般4～5個(gè)，子囊盤初為盤狀。其中,核盤菌菌核相對(duì)較大，鼠糞狀，(5～18）mm×（2～6）mm。子囊盤淡黃褐色，中央凹陷，盤下具柄，柄短的僅幾毫米，長(zhǎng)的可達(dá)70 mm。子囊近圓柱形，排列在子囊盤表面，每個(gè)子囊內(nèi)含8個(gè)子囊孢子。子囊孢子橢圓形至近梭形，無(wú)色，單胞，大?。?.7～13.6）μm×（4.9～8.1）μm。小菌核菌菌核相對(duì)較小，似菜籽狀，大小0.5～1.0 mm，子囊盤直徑0.5～2.0 mm，子囊圓筒形，大小（125～135）μm×（8～11）μm，子囊孢子橢圓形，大?。?2～16）μm×（6～8）μm（莊文穎，1998）。

核盤菌寄主范圍廣泛，據(jù)Kohn（1979）記載，其可寄生在包括菜豆、南瓜、西葫蘆、黃瓜、辣椒、茄子、油菜、蘿卜、豌豆、紫云英、向日葵、胡蘿卜、芹菜、十字花科蔬菜等60個(gè)科350多種草本植物上（莊文穎，1998；Fernando et al.，2006），并且寄主有進(jìn)一步擴(kuò)大的趨勢(shì)（Wang et al.，2008）；國(guó)外報(bào)道小菌核菌寄主范圍極廣泛，但是在我國(guó)，由小菌核菌引起的植物菌核病僅在東北和內(nèi)蒙古地區(qū)報(bào)道發(fā)生為害。

2009～2010年的蔬菜病害調(diào)查過程中我們發(fā)現(xiàn)，在我國(guó)東北地區(qū)遼寧、黑龍江，華北地區(qū)河北、山東、北京，西北地區(qū)甘肅、陜西以及湖北、浙江等地都有生菜菌核病發(fā)生，病害發(fā)生嚴(yán)重的田塊造成生菜絕產(chǎn)，嚴(yán)重影響了農(nóng)民的收益。此外，我們還曾采集到多份辣椒、黃瓜、菜豆、茄子等蔬菜菌核病病樣標(biāo)本，對(duì)所有采集的標(biāo)本進(jìn)行分離鑒定，病原菌均為核盤菌。

從發(fā)病植株上分離到的病原菌在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)7天后觀察，菌絲茂盛，呈白色棉絮狀，繼續(xù)培養(yǎng)菌絲糾結(jié)形成菌核，菌核黑色，不規(guī)則形，鼠糞狀（彩色圖版16），在顯微鏡下觀察菌絲結(jié)構(gòu)，可以看見其菌絲具有明顯的分枝和較多的隔膜，該菌不產(chǎn)生無(wú)性孢子。

3 發(fā)生規(guī)律

3.1 初侵染源

3.1.1 種子帶菌 菌核混雜在種子間或粘附在種子上越冬、越夏或度過寄主中斷期，隨播種帶菌種子進(jìn)入田間，遇到適宜溫濕度時(shí)，菌核便萌發(fā)產(chǎn)生子囊盤，釋放出子囊孢子進(jìn)行傳播蔓延，種子帶菌是健康育苗田塊病原菌的主要來(lái)源。

3.1.2 土壤帶菌 發(fā)病部位形成的菌核脫落到土壤中度過不良環(huán)境，菌核在土壤中至少可存活2年，遇到適宜條件時(shí)萌發(fā)進(jìn)行初侵染。土壤中有效菌核數(shù)量對(duì)病害發(fā)生程度影響很大，新建保護(hù)地或輪作棚室土壤中殘存菌核少，發(fā)病輕，反之發(fā)病重。

3.1.3 病殘?bào)w帶菌 植株發(fā)病后期，在病莖和病葉上形成大量菌核。殘留在田間病殘?bào)w上的菌核隨病殘?bào)w在土壤中長(zhǎng)時(shí)間存活，越冬或越夏后在適宜條件下萌發(fā)產(chǎn)生子囊盤，釋放出子囊孢子進(jìn)行侵染，或直接萌發(fā)產(chǎn)生菌絲進(jìn)行侵染。

3.1.4 種苗帶菌 帶病種苗遠(yuǎn)距離調(diào)運(yùn)是無(wú)病地區(qū)的主要初侵染源，種苗帶菌率對(duì)新建保護(hù)地和輪作田塊的病害發(fā)生程度影響很大。

3.2 傳播途徑

3.2.1 農(nóng)事操作傳播 田間種植過密，植株生長(zhǎng)過旺，使得植株間容易接觸，增加了病原菌的傳播幾率，此外由于接觸摩擦造成傷口，也增加了病原菌的侵染機(jī)會(huì)；菜農(nóng)在積累大量病原菌的田塊進(jìn)行操作后，沒有對(duì)鞋子或農(nóng)具進(jìn)行消毒，再到無(wú)病原菌或病原菌少的田塊進(jìn)行農(nóng)事操作，把病原菌傳播到相對(duì)健康的田塊。

3.2.2 雨水和灌溉水傳播 土壤中的菌核和其萌發(fā)產(chǎn)生的子囊孢子可借雨水飛濺或隨灌溉水在田間進(jìn)行傳播。另外由于菌核病對(duì)濕度要求較高，降雨或澆水后，空氣濕度變大，也為病害的發(fā)生創(chuàng)造了良好的外部環(huán)境。

3.2.3 氣流傳播 在溫濕度適宜時(shí)，越冬或越夏后的菌核便萌發(fā)產(chǎn)生子囊盤，上面形成子囊和子囊孢子，成熟的子囊盤展開后，彈射出子囊孢子，隨氣流傳播、擴(kuò)散進(jìn)行初侵染。氣流傳播是核盤菌的主要傳播方式之一。

3.3 影響發(fā)病的因子

3.3.1 溫度 該病害對(duì)溫度要求不是很嚴(yán)格，在9～35℃均能發(fā)生，菌核萌發(fā)的最適溫度為15℃左右；子囊孢子萌發(fā)的適溫為5～10℃；菌絲生長(zhǎng)的最適溫度為20℃左右。在田間條件下，溫度在15～20℃利于菌核萌發(fā)和菌絲生長(zhǎng)、侵入及子囊盤產(chǎn)生，因此病害發(fā)生最為嚴(yán)重（Sun&Yang，2000）。溫度高于30℃時(shí)，病原菌難以侵入寄主組織，病害發(fā)生的程度急劇下降；當(dāng)溫度高于35℃時(shí)，該病害不能發(fā)生。

3.3.2 濕度 菌核病的發(fā)生對(duì)濕度要求較高（Sun&Yang，2000），當(dāng)田間相對(duì)濕度在80%以上時(shí)開始發(fā)病，低于80%不能發(fā)病。田間相對(duì)濕度在95%以上時(shí)病害嚴(yán)重發(fā)生，尤其是在生菜種植的蓮座期至開花期灌水次數(shù)多或一次性灌水量太大，均可造成濕度過高而利于發(fā)病。

4 防治技術(shù)

針對(duì)上述生菜菌核病的初侵染來(lái)源及傳播途徑，可以從以下幾個(gè)方面制定相應(yīng)的綜合防治策略，防止生菜菌核病的發(fā)生和蔓延。

①針對(duì)種子傳播，留種田要通過處理病殘?bào)w等措施消滅菌核，盡量在無(wú)病株上進(jìn)行采種，以減少初侵染源，提高種子質(zhì)量；另外育苗前進(jìn)行種子消毒，可先用10%～15%的鹽水或硫酸銨水溶液漂洗種子后，再用55℃的溫水浸種10～15分鐘，然后催芽播種，可有效降低種子帶菌率。此外，用哈茨木霉Trichoderma harzianum、盾殼霉Coniothyrium minitans（Jones&Whipps，2002；Rabeendran et al.，2006；van Beneden et al.，2010）或芽孢桿菌 Bacillus amyloliquefaciens（Fernando et al.，2006）進(jìn)行種子包衣也能明顯降低植株的發(fā)病率。

②針對(duì)土壤及土壤中的病殘?bào)w傳播，應(yīng)深翻畦土，通過深耕盡量將遺落土中的菌核翻耕入地面20 cm以下，使其不能產(chǎn)生子囊盤或子囊盤不能出土；灌水并覆蓋地膜也可減輕病害的發(fā)生，經(jīng)高溫水泡后，菌核會(huì)失去萌發(fā)能力，覆蓋地膜可以阻止地表面菌核萌發(fā)產(chǎn)生的子囊孢子的傳播，從而減少初侵染機(jī)會(huì)；此外在移栽前還可用40%五氯硝基苯，每667 m2用0.5～1.0 kg，加細(xì)干土20 kg配成藥土，耙入土壤內(nèi)，或撒施、穴施均對(duì)菌核病有一定的防治效果。

③針對(duì)苗木傳播，用無(wú)菌土和健康種子進(jìn)行育苗，種苗移栽前檢查種苗發(fā)病情況，剔除帶病種苗；另外可在定植前用50%腐霉利可濕性粉劑1 500倍液噴淋生菜植株，杜絕帶菌苗定植。

④針對(duì)田間病株的傳播，應(yīng)及時(shí)清除中心病株，并進(jìn)行藥劑防治。在發(fā)病初期，可選用50%多霉威可濕性粉劑1 000倍液，或50%咪鮮胺可濕性粉劑1 500倍液噴施植株莖基部、老葉和地面，能有效防止初侵染。在生菜的蓮座期至抽薹期可選用50%腐霉利可濕性粉劑1 000倍液進(jìn)行噴霧，每隔1天噴施1次；也可用50%乙烯菌核利干懸浮劑1 000倍液進(jìn)行噴霧，每隔4天噴1次，連續(xù)噴藥2～3次。還可以選擇的藥劑有：50%福·異菌可濕性粉劑500～1 000倍液、50%多·腐可濕性粉劑1 000倍液、50%百·菌核可濕性粉劑750倍液。藥劑噴施部位主要是生菜的莖基部和近地面葉片。

莊文穎.1998.中國(guó)真菌志第八卷核盤菌科地舌菌科.北京：科學(xué)出版社：1-135.

Boland G J，Hall R.1994.Index of plant hosts of Sclerotinia sclerotiorum.Canadian Journal of Plant Pathology，16：93-108.

Chitrampalam P，Cox C A，Turini T A，Pryor B M.2010.Efficacy of Coniothyrium minitans on lettuce drop caused by Sclerotinia minor in desert agroecosystem.Biological Control，55：92-96.

Fernando W G D ，Nakkeeran S，Zhang Y ，Savchuk S.2006.Biological control of Sclerotinia sclerotiorum （Lib.）de Bary by Pseudomonas and Bacillus species on canola petals.Crop Protection，26：100-107.

Jones E E，Whipps J M.2002.Effect of inoculum rates and sources of Coniothyrium minitans on control of Sclerotinia sclerotiorum disease in glasshouse lettuce.European Journal of Plant Pathology，108：527-538.

Li G Q，Wang D B，Jiang D H，Huang H C，Laroche A.2007.First report of Sclerotinia nivalis on lettuce in central China.Crop Protection，26：100-107.

Melzer M S，Smith E A，Boland G J.1997.Index of plant hosts of Sclerotinia minor.Canadian Journal of Plant Pathology，19：272-280.

Rabeendran N，Jones E E，Moot D J，Stewart A.2006.Biocontrol of Sclerotinia lettuce drop by Coniothyrium minitans and Trichoderma hamatum.Biological Control，39：352-362.

van Beneden S，Leenknegt I，F(xiàn)ranca S C，H O..fte M.2010.Improved control of lettuce drop caused by Sclerotinia sclerotiorum using Contans combined with lignin or a reduced fungicide application.Crop Protection，29：168-174.

Sun P，Yang X B.2000.Light，temperature，and moisture effects on Apothecium production of Sclerotinia sclerotiorum.Plant Diseases，84：1287-1293.

Waipara N W.2006.Isolation of white rot，Sclerotinia sclerotiorum，causing leaf necrosis on Tradescantia fluminensis in New Zealand.Australasian Plant Disease Notes，1：27-28.

Wang A R，Lin W W，Chen X T，Lu G D，Zhou J，Wang Z H.2008.Isolation and identification of Sclerotinia stem rot causal pathogen in Arabidopsis thaliana.Journal of Zhejiang University Science B，9（10）：818-822.