心力衰竭動(dòng)物模型研究進(jìn)展

孫艷俠，王國(guó)干

（中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院，北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院，阜外心血管病醫(yī)院，心血管病研究所，心內(nèi)科 急重癥中心，北京 100037）

心衰的基礎(chǔ)病因多種多樣，共同的病理生理變化特點(diǎn)為：左室結(jié)構(gòu)，功能的改變和神經(jīng)內(nèi)分泌激素的激活。心衰是一個(gè)不斷發(fā)展的疾病，不同階段的病理生理和治療側(cè)重點(diǎn)不同。盡管目前各種治療使心衰取得了重大改善，但5年后死亡率仍超過(guò)

50％［1］。由于受到醫(yī)學(xué)倫理的限制，直接在人體上進(jìn)行研究，受到很大限制，所以迫切需要建立心力衰竭的動(dòng)物模型。建立與該病的病理生理以及血流動(dòng)力學(xué)改變相似的動(dòng)物模型是深入研究該病基礎(chǔ)。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道心衰動(dòng)物模型大體分為以下幾種：

1 心室快速起搏致心衰模型

1.1 1962年 Whipp le首次描述了實(shí)驗(yàn)性心動(dòng)過(guò)速可誘發(fā)心力衰竭的概念。在80年代后期該模型得到了較為深入的研究和廣泛的應(yīng)用。建此模型采用的主要是大型動(dòng)物如犬、豬、羊和兔。1982年Riegger等人［2］將特制的起搏器植入犬的心房，以240～280次/分頻率起搏心臟，成功建立了一種新的心力衰竭動(dòng)物模型。1984年Riegger等又將此起搏技術(shù)進(jìn)行了改進(jìn)，將起搏電極植入犬的心室，并與埋藏在前胸皮下的起搏器相連，使得心衰模型的成功率提高。國(guó)外研究者多采用開(kāi)胸后植入起搏電極，國(guó)內(nèi)學(xué)者楊萍等［3］則通過(guò)豬前腿內(nèi)側(cè)小隱靜脈將起搏電極插入心臟的方法；焦鵬等人［4］在 x線監(jiān)測(cè)下將電極經(jīng)右側(cè)頭臂靜脈送入并固定于右心室。通過(guò)靜脈將電極插入心臟的方法建立的心衰模型對(duì)動(dòng)物的創(chuàng)傷較小，更接近臨床情況?？焖倨鸩T導(dǎo)的豬心衰模型是目前較為理想和應(yīng)用較多的動(dòng)物心衰模型。因其引起的血流動(dòng)力學(xué)、神經(jīng)內(nèi)分泌的變化及病理改變等方面與人的慢性心衰非常相似，再者豬在生理功能和解剖結(jié)構(gòu)上與人相似使其更具有應(yīng)用價(jià)值［5，6］。

1.2 此種模型的優(yōu)點(diǎn)是：1，制作模型的方法較簡(jiǎn)單并且創(chuàng)傷小，起搏誘導(dǎo)的心衰血流動(dòng)力學(xué)，神經(jīng)內(nèi)分泌水平與人的心衰相似，適用于研究人類心衰時(shí)循環(huán)、神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)變化的機(jī)制和藥物對(duì)心衰血流動(dòng)力學(xué)和神經(jīng)體液因素的影響。2，這一模型具有較強(qiáng)的可控性，可通過(guò)改變起搏頻率、起搏持續(xù)時(shí)間，復(fù)制出心功能損害程度不同的模型，可以用來(lái)研究慢性心衰不同階段的病理生理和分子生物學(xué)特征。缺點(diǎn)是：此心衰模型在停止起搏后，其心衰的表現(xiàn)及心臟的重構(gòu)可迅速逆轉(zhuǎn)。這一可逆性使模型缺乏穩(wěn)定性。使研究中難以準(zhǔn)確判斷某實(shí)驗(yàn)處理因素對(duì)心功能、心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)或分子生物學(xué)改變的確切作用。但這種可逆性可以用來(lái)研究心衰時(shí)心臟形狀和大小的變化機(jī)制以及心肌收縮性能的調(diào)節(jié)。

2 心肌缺血/梗塞致心衰模型

心肌缺血/梗塞是人類充血性心衰的常見(jiàn)危險(xiǎn)因素，為了復(fù)制與冠心病病人心衰進(jìn)展更接近的動(dòng)物模型，已經(jīng)發(fā)展了建立心肌缺血模型的不同技術(shù)。主要包括結(jié)扎冠狀動(dòng)脈或冠脈內(nèi)注入微栓子。在多種動(dòng)物模型上通過(guò)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前降支或前降支分支來(lái)誘導(dǎo)心肌區(qū)域損傷和隨后發(fā)生的心衰［7］。建此模型采用的主要是豬，犬，羊和大鼠等動(dòng)物。大鼠心肌梗死-心衰模型在科研中應(yīng)用十分廣泛。結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈前降支引起心肌梗死，幾個(gè)月后發(fā)展成為心衰、心肌肥厚和心室擴(kuò)大，心臟結(jié)構(gòu)和血流動(dòng)力學(xué)發(fā)生明顯改變［8］。但不同品系的大鼠心肌梗死范圍和變異性有很大差別。結(jié)扎冠狀動(dòng)脈的方法建立的心衰模型需要的時(shí)間較長(zhǎng)，且剖胸后動(dòng)物死亡率高。這種模型主要用于研究心肌梗死與心肌肥厚過(guò)渡到心衰時(shí)的細(xì)胞和亞細(xì)胞改變以及觀察長(zhǎng)期服用藥物對(duì)心衰的預(yù)防作用。因?yàn)榻Y(jié)扎犬冠脈易引起室顫和死亡，所以多采用冠脈內(nèi)多次注入微栓子的方法建立犬心衰模型。在這種模型中，狗多個(gè)冠狀動(dòng)脈栓塞串聯(lián)進(jìn)行，持續(xù)10周出現(xiàn)左室射血分?jǐn)?shù)35％，左室擴(kuò)張，在隨后的3個(gè)月左室功能減退不斷進(jìn)展并伴有神經(jīng)內(nèi)分泌的激活，射血分?jǐn)?shù)的減低和心衰的進(jìn)展［9］。Przyk lenk等人［10］在此模型的基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究了通過(guò)及時(shí)的應(yīng)用溶栓再灌注來(lái)挽救缺血的心肌組織。這些研究為目前的再灌注治療急性冠脈綜合征的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)，同時(shí)為溶栓治療的概念提供了證據(jù)。犬微栓塞模型已用于檢驗(yàn)心衰治療的許多藥物靶點(diǎn)和手術(shù)治療療效［11，12］。缺點(diǎn)是1，微栓塞模型的產(chǎn)生技術(shù)復(fù)雜，要求一系列的手術(shù)干預(yù)。2，犬心肌中存在顯著的側(cè)支循環(huán)［13］使心肌損傷保持在一定的程度較困難并可能改變心肌梗死后的路徑。鑒于此缺點(diǎn)目前研究者多采用豬和羊來(lái)研究心肌缺血和心肌梗死導(dǎo)致的心衰。因豬的冠狀動(dòng)脈解剖和總體解剖結(jié)構(gòu)與人類的非常相似，是轉(zhuǎn)化研究的主題［14，15］。此外，也可用其他物質(zhì)阻塞冠狀動(dòng)脈建立模型。Monreal等［16］通過(guò)冠狀動(dòng)脈內(nèi)注射高分子物質(zhì)造成冠狀動(dòng)脈內(nèi)阻塞建立了心衰模型。也可應(yīng)用液體石蠟、水銀、油質(zhì)、甚至應(yīng)用氣囊、尼龍管堵塞造模。不剖胸，創(chuàng)傷小，定位較準(zhǔn)確。

缺血性心衰模型的建立方法還包括冠狀動(dòng)脈血栓形成法：給動(dòng)物喂高膽固醇飲食導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈粥樣硬化形成，這一模型最接近人類冠心病特點(diǎn)，因其所需時(shí)間較長(zhǎng)［17］，對(duì)心肌梗死范圍、動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展的程度難以控制，故很少采用；單極、雙極電凝法：對(duì)冠狀動(dòng)脈進(jìn)行電凝，電凝長(zhǎng)度約為血管直徑的5倍，見(jiàn)血管由紅到白，由白到黃皺縮但又不焦脆為度，電凝局部區(qū)域變灰白。與冠脈結(jié)扎法相比，電凝阻斷冠脈血流操作簡(jiǎn)捷，難度大大降低，并發(fā)癥最少，動(dòng)物生存率最高。但由電凝造成的心肌損傷的病理生理變化與心梗并不相關(guān)［18］。

3 壓力超負(fù)荷型心衰模型

建立模型所用的動(dòng)物主要是大型動(dòng)物如犬，大鼠，兔。途徑主要有3.1，主動(dòng)脈狹窄：通過(guò)手術(shù)造成主動(dòng)脈狹窄，從而引起左室后負(fù)荷增加。這種人為的造成主動(dòng)脈狹窄復(fù)制了臨床上主動(dòng)脈狹窄的模型。這種模型產(chǎn)生明顯的左室肥厚，左室僵硬度改變以及舒張功能的減退，循環(huán)中出現(xiàn)血管加壓素和心房利鈉肽的增加，但不激活腎素血管緊張素系統(tǒng)［19，20］，也沒(méi)有左室收縮功能不全。此種模型用于研究舒張功能障礙，而舒張功能障礙是左室衰竭發(fā)展的重要因素。主動(dòng)脈弓縮窄（TAC）心衰模型也是應(yīng)用較廣的模型，TAC模型的一個(gè)重要的缺點(diǎn)是在不同品系的小鼠中心室重構(gòu)的反應(yīng)有很大變異。C57BL6小鼠實(shí)行 TAC之后很快發(fā)展為左室擴(kuò)張［21］，而在其他品系的小鼠則不會(huì)出現(xiàn)［22］。

3.1 肺動(dòng)脈狹窄：人為的造成動(dòng)物肺動(dòng)脈狹窄，右室后負(fù)荷增加，從而引起右心衰竭模型。

3.2 高血壓性心衰模型也是壓力超負(fù)荷型心衰的一種：自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）是一種遺傳性高血壓大鼠模型。一年內(nèi)心功能保持正常，18～24個(gè)月后發(fā)展為心衰。這是模擬人高血壓導(dǎo)致心衰的理想模型。這種模型不需要技術(shù)干預(yù)即可形成，但形成心衰需要的時(shí)間較長(zhǎng)，從而限制了應(yīng)用；Dahl鹽敏感性高血壓大鼠模型：對(duì)6周齡Dahl鹽敏感大鼠給予8％氯化鈉喂養(yǎng)，11周齡出現(xiàn)明顯左心室肥厚，15～20周齡出現(xiàn)左心室擴(kuò)張。此模型HF的發(fā)生和嚴(yán)重程度，與左心室擴(kuò)張的發(fā)生和程度密切相關(guān)，能較好觀察心肌肥厚演變至HF過(guò)程，但發(fā)生率難控制。

4 容量超負(fù)荷型心衰模型

此類模型的建立主要是通過(guò)人為的制造動(dòng)靜脈瘺，二尖瓣關(guān)閉不全，主動(dòng)脈瓣關(guān)閉不全，從而使心臟前負(fù)荷增加，先出現(xiàn)代償性心肌肥厚繼而發(fā)展為心衰。與臨床上高排血量心衰類似。建此類模型的動(dòng)物主要包括犬、兔和大鼠。頸動(dòng)脈到頸靜脈分流術(shù)已經(jīng)在狗、山羊身上建立。但這些模型需要加用阿霉素來(lái)促進(jìn)心衰的發(fā)生。動(dòng)靜脈瘺心衰模型隨著左右心室充盈壓的增加和左室肥厚和擴(kuò)張，動(dòng)脈平均壓降低［23，24］。但收縮功能正常或提高［25］。因此這個(gè)模型適用于研究心衰的代償機(jī)制和由于容量超負(fù)荷引起的不伴有收縮功能障礙的舒張功能不全。二尖瓣關(guān)閉不全模型主要是通過(guò)破壞二尖瓣腱索的方式建立。經(jīng)動(dòng)脈途徑放置咬鉗破壞犬的二尖瓣腱索建立二尖瓣關(guān)閉不全模型，出現(xiàn)持續(xù)性的二尖瓣反流，射血分?jǐn)?shù)＞50％，左室擴(kuò)張，神經(jīng)內(nèi)分泌激活，容量超負(fù)荷心肌肥大［26-28］，以及伴隨左室功能不全出現(xiàn)細(xì)胞水平的異常如心肌細(xì)胞收縮功能改變［27，29］，而二尖瓣置換術(shù)可以使細(xì)胞水平的變化正常化［29］。主動(dòng)脈瓣關(guān)閉不全主要通過(guò)經(jīng)頸動(dòng)脈插入導(dǎo)管破壞主動(dòng)脈瓣完成。單純破壞主動(dòng)脈瓣形成心衰需要時(shí)間較長(zhǎng)（1～2年），常進(jìn)行二次手術(shù)加快心衰的形成。瓣膜關(guān)閉不全模型用來(lái)研究心肌肥厚過(guò)到心衰的病理生理變化以及評(píng)價(jià)抗心衰藥物的治療作用和瓣膜置換術(shù)的療效。

此外，壓力超負(fù)荷聯(lián)合容量超負(fù)荷也可以構(gòu)建心衰模型，常通過(guò)人為造成腹主動(dòng)脈縮窄和主動(dòng)脈瓣膜關(guān)閉不全來(lái)建立。國(guó)內(nèi)曾用此法構(gòu)建過(guò)家兔的心衰模型［30，31］，此種模型心衰形成時(shí)間短，成功率高。

5 藥物性心衰模型

用于建此模型的藥物主要有：阿霉素，兒茶酚胺，心得安，戊巴比妥鈉，維拉帕米，丙咪嗪，等。心得安，戊巴比妥鈉，維拉帕米這三種抑制心肌收縮力的藥物主要用來(lái)建立急性心衰模型。丙咪嗪是一種抗抑郁藥，通過(guò)阻斷鈣通道和α-腎上腺素受體發(fā)揮作用，引起心臟血流動(dòng)力學(xué)的改變，引起的心衰是短暫可逆的。下面主要介紹阿霉素和兒茶酚胺誘導(dǎo)的心衰模型。

阿霉素是臨床上常用的一種非特異性周期抗腫瘤化療藥物，對(duì)各期細(xì)胞均有作用。因其具有心臟毒性用于建此模型。途徑主要有經(jīng)腹腔，靜脈和冠脈內(nèi)注射阿霉素。阿霉素誘導(dǎo)的心衰是劑量依賴性的，短期大量腹腔給藥動(dòng)物死亡率高，模型成功率低。目前多采用小劑量多次腹腔給藥的方法。靜脈注射阿霉素導(dǎo)致心衰的同時(shí)也伴有其他的毒副作用如骨髓抑制結(jié)腸炎等使動(dòng)物死亡率高。目前多采用冠脈內(nèi)注射阿霉素，冠脈內(nèi)注射阿霉素只需較小劑量就可產(chǎn)生心衰模型，而且沒(méi)有全身毒性表現(xiàn)。阿霉素誘導(dǎo)的心衰表現(xiàn)為雙心室擴(kuò)大，室壁變薄和射血分?jǐn)?shù)減低［32］，兔阿霉素心肌病的病理學(xué)、血流動(dòng)力學(xué)以及激素的改變均接近于人CHF時(shí)所發(fā)生的改變［33］，此模型用來(lái)研究心肌病及心衰的發(fā)病機(jī)制以及評(píng)估新的治療措施。

兒茶酚胺誘導(dǎo)的心衰模型：研究表明過(guò)量的兒茶酚胺能夠使動(dòng)物產(chǎn)生廣泛的心肌損害包括心肌細(xì)胞的丟失和壞死，以及廣泛的纖維化［34］。大鼠皮下注射異丙腎上腺素可誘導(dǎo)劑量依賴性的心功能損害和神經(jīng)體液的激活［35］。研究表明重復(fù)注射腎上腺素將導(dǎo)致不斷發(fā)展的血流動(dòng)力學(xué)障礙、左室擴(kuò)張和收縮功能抑制。在心臟代償階段出現(xiàn)急性而短暫的ANP增加，急性腎素血管緊張素系統(tǒng)激活隨后處于抑制狀態(tài)，隨著心衰的進(jìn)展兩者連同血管加壓素又激活［36，37］。這種模型可用于研究臨床上使用高劑量?jī)翰璺影返挠绊懟蚴茹t細(xì)胞瘤。

6 轉(zhuǎn)基因心衰模型

理論上講.利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)使某種因子在心肌中過(guò)度表達(dá)，或利用基因敲除技術(shù)使與心肌收縮功能密切相關(guān)的基因缺失，可能會(huì)導(dǎo)致心衰?；蚯贸蜣D(zhuǎn)基因小鼠模型是研究心力衰竭的發(fā)病機(jī)理和確定新的治療靶點(diǎn)的寶貴工具。并且小鼠具有飼養(yǎng)成本低的好處。擴(kuò)張型心肌?。―CM）是以左心室擴(kuò)張和功能障礙為特征的疾病，是心力衰竭重要原因之一。DCM患者中鑒定到各種基因的諸多突變，包括細(xì)胞骨架蛋白基因和收縮蛋白基因。Arber等人［38］發(fā)明了一種擴(kuò)心病模型，在這種模型中編碼肌肉 lim蛋白的基因缺失導(dǎo)致肌纖維混亂，左室肥大、擴(kuò)張，收縮功能障礙，心衰。肌肉 lim蛋白是一種肌動(dòng)蛋白為基礎(chǔ)的細(xì)胞骨架蛋白，能積極調(diào)節(jié)肌分化。肌肉lim蛋白基因剔除小鼠出現(xiàn)與擴(kuò)張型心肌病類似的表型，其特點(diǎn)是左室功能不全，死亡。肌肉lim蛋白基因剔除小鼠作為心衰的遺傳模型被許多實(shí)驗(yàn)室用來(lái)探索心衰和擴(kuò)心病的分子治療方法。TNFa過(guò)度表達(dá)的小鼠代表另一類擴(kuò)心病模型。TNFa是循環(huán)中的一種細(xì)胞因子，很久就被懷疑對(duì)心衰的進(jìn)展起重要作用。過(guò)度表達(dá)心肌細(xì)胞特異性TNFa的小鼠發(fā)展為左室肥厚，擴(kuò)張，心力衰竭，相關(guān)功能障礙以及過(guò)早死亡［39］。鈣調(diào)蛋白激酶II（CaMKII）在心衰中活性和表達(dá)都增加［40］。Heller Brown和他的同事［41］使轉(zhuǎn)基因小鼠的心臟過(guò)度表達(dá)CaMKII的細(xì)胞質(zhì)亞型，觀察了左室肥厚，左室擴(kuò)張，和心力衰竭的逐步進(jìn)展，支持 CaMKII參與了心衰進(jìn)展的觀點(diǎn)。最近建立的肌動(dòng)蛋白基因轉(zhuǎn)基因小鼠模型［42］（mActin-Tg，已在擴(kuò)張型心肌病患者中報(bào)道過(guò)的突變基因）顯示小鼠的左心室逐漸發(fā)生擴(kuò)張和功能障礙，最終因心力衰竭而死亡。這種小鼠模型出現(xiàn)心臟肌絲鈣敏感性下降和鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性激酶Ⅱdelta（CaMKIIdelta）的激活。抑制CaMKIIdelta的活性可防止心臟 p53蛋白和凋亡心肌細(xì)胞數(shù)量增加，從而改善心功能。該模型的研究結(jié)果表明鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性激酶Ⅱdelta部分通過(guò)p53蛋白的積聚和誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡在擴(kuò)張型心肌病心力衰竭的發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵性作用。

近年來(lái)MicroRNA（m iRNA）成為醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究的熱點(diǎn)。miRNA是一類非編碼的小RNA，參與30 ～50％基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)調(diào)控［43，44］，Tham等首先確認(rèn)m i RNA表達(dá)與心力衰竭之間有聯(lián)系。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型在研究MicroRNA與心衰的關(guān)系中具有重要作用，目前已取得較多研究成果。研究發(fā)現(xiàn)在心肌細(xì)胞中轉(zhuǎn)染特定的miRNA可導(dǎo)致心肌細(xì)胞肥厚和功能下降［45］。miR-195過(guò)表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠可發(fā)生心肌肥厚或心衰［45］，提示僅單一 m iRNA高表達(dá)即可導(dǎo)致心衰的發(fā)生。由于miRNA的變化早于基因和蛋白的改變，早于疾病癥狀的出現(xiàn)，因此檢測(cè)miRNA的動(dòng)態(tài)變化，有可能為疾病的發(fā)生、發(fā)展提供線索，進(jìn)而指導(dǎo)臨床進(jìn)行早期干預(yù)，有效控制疾病的發(fā)展。研究還發(fā)現(xiàn)一些miRNA可作為心衰的生物標(biāo)志物，如 miR423-5p［46］。m iRNA-126可以作為心衰的潛在的生物標(biāo)志物，F(xiàn)ukushima［47］報(bào)道m(xù) icroRNA-126與心衰的嚴(yán)重程度相關(guān)。

轉(zhuǎn)基因心衰模型用于了解與心衰有關(guān)的基因以及為基因治療提供依據(jù)。其不足之處是不能全面反映臨床上心衰病人的真實(shí)病因、病理情況。

總結(jié)：引起心衰的原因很多，心衰不同階段的心功能，神經(jīng)內(nèi)分泌，血流動(dòng)力學(xué)以及組織學(xué)改變不同，從而決定了心衰不同階段的治療方法不同。單一的動(dòng)物模型不能模仿心衰所有階段的發(fā)展變化，所以需要綜合利用不同模型的特點(diǎn)來(lái)研究心衰的整體變化。目前應(yīng)用較多和進(jìn)展較快是快速起搏致心衰模型，遺傳性和轉(zhuǎn)基因心衰模型。良好的心衰模型應(yīng)具有疾病相似性，可重復(fù)性，可靠性，適用性，可控性，易行性，經(jīng)濟(jì)性等特點(diǎn)。穩(wěn)定可靠地動(dòng)物模型對(duì)于治療心衰的藥物篩選及藥物研究是必不可少的。所以要根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟捎煤线m的動(dòng)物模型，才能達(dá)到理想的效果。合適的動(dòng)物模型，不僅對(duì)新藥的開(kāi)發(fā)具有促進(jìn)作用，也為該病的發(fā)病機(jī)制和病理生理改變提供重要資料。

［1］Feldman A M， Li Y Y， Mctiernan C F. Matrix metalloproteinases in pathophysiology and treatment of heart failure［J］.Lancet，2001，357（9257）：654-655.

［2］Riegger A J，Liebau G. The renin-angiotensin-aldosterone system，antidiuretic hormone and sympathetic nerve activity in an experimentalmodel of congestive heart failure in the dog［J］.Clin Sci（Lond），1982，62（5）：465-469.

［3］楊萍，盂繁波，祝金明，等.人重組生長(zhǎng)激素對(duì)充血性心力衰竭豬強(qiáng)心作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)老年學(xué)雜志.2003，23 （1）：47-49.

［4］焦鵬，沈振亞，惠杰，等.快速右心室起搏誘導(dǎo)心衰模型的改進(jìn)［J］.蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2005，25（1）：81-83.

［5］Trumble D R，Magovern JA.Comparison of dog and pigmodels for testing substernal cardiac compression devices［J］.ASAIO J，2004，50（3）：188-192.

［6］Yarbrough W M，Spinale FG.Large animalmodels of congestive heart failure：a critical step in translating basic observations into clinical applications［J］.JNucl Cardiol，2003，10（1）：77-86.

［7］Monnet E，Chachques JC.Animalmodels of heart failure：what is new［J］.Ann Thoracurg，2005，79（4）：1445-1453.

［8］Hasenfuss G.Animal models of human cardiovascular disease，heart failure and hypertrophy［J］.Cardiovasc Res，1998，39（1）： 60-76.

［9］Sabbah H N，Stein P D，Kono T，et al.A canine model of chronic heart failure produced by multip le sequential coronary microembolizations［J］.Am J Physiol，1991，260（4 Pt 2）： H1379-H1384.

［10］Przyklenk K，Vivaldi M T，Schoen F J，et al.Salvage of ischaemic myocardium by reperfusion：importance of collateral blood flow and myocardial oxygen demand during occlusion［J］.Cardiovasc Res，1986，20（6）：403-414.

［11］Sabbah H N，ImaiM，Cowart D，et al.Hemodynamic properties of a new-generation positive luso-inotropic agent for the acute treatment of advanced heart failure［J］.Am JCardiol，2007，99 （2A）：41A-46A.

［12］Sabbah H N，Sharov V G，Gupta R C，et al.Reversal of chronic molecular and cellular abnormalities due to heart failure by passive mechanical ventricular containment［J］.Circ Res，2003，93（11）：1095-1101.

［13］White F C，Roth D M，Bloor C M.The pig as a model for myocardial ischemia and exercise［J］.Lab Anim Sci，1986，36 （4）：351-356.

［14］Zeng L，Hu Q，Wang X，et al.Bioenergetic and functional consequences of bone marrow-derived multipotent progenitor cell transplantation in hearts with postinfarction left ventricular remodeling［J］.Circulation，2007，115（14）：1866-1875.

［15］Lu H，Xu X，Zhang M，et al.Combinatorial protein therapy of angiogenic and arteriogenic factors remarkably improves collaterogenesis and cardiac function in pigs［J］.Proc Natl Acad Sci U S A，2007，104（29）：12140-12145.

［16］Monreal G，Gerhardt M A，Kambara A，et al.Selective microembolization of the circum flex coronary artery in an ovine model： Dilated，ischemic cardiomyopathy and left ventricular dysfunction［J］.JCard Fail，2004，10（2）：174-183.

［17］Russell JC，Proctor SD.Small animalmodels of cardiovascular disease：tools for the study of the roles of metabolic syndrome，dyslipidemia，and atherosclerosis［J］.Cardiovasc Pathol，2006，15（6）：318-330.

［18］Kuzma L，Kalemba D，Rozalski M，et al.Chemical composition and biological activities of essential oil from Salvia sclarea plants regenerated in vitro［J］.Molecules，2009，14（4）：1438-1447.

［19］Bruckschlegel G，Holmer S R，Jandeleit K，et al.Blockade of the renin-angiotensin system in cardiac pressure-overload hypertrophy in rats.［J］.Hypertension，1995，25（2）：250 -259.

［20］Muders F，Kromer E P，Bahner U，et al.Central vasopressin in experimental aortic stenosis in the rat［J］.Cardiovasc Res，1995，29（3）：416-421.

［21］Patten R D，Pourati I，Aronovitz M J，et al.17 Beta-estradiol differentially affects left ventricular and cardiomyocyte hypertrophy following myocardial infarction and pressure overload［J］.JCard Fail，2008，14（3）：245-253.

［22］Barrick C J，Rojas M，Schoonhoven R，et al.Cardiac response to pressure overload in 129S1/SvIm J and C57BL/6J mice： temporal-and background-dependent development of concentric left ventricular hypertrophy［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2007，292（5）：H2119-H2130.

［23］Liu Z，Hilbelink D R，Gerdes A M.Regional changes in hemodynamics and cardiac myocyte size in rats with aortocaval fistulas.2.Long-term effects［J］.Circ Res，1991，69（1）：59 -65.

［24］Liu Z，H ilbelink D R，CrockettW B，et al.Regional changes in hemodynamics and cardiac myocyte size in rats with aortocaval fistulas.1.Developing and established hypertrophy［J］.Circ Res，1991，69（1）：52-58.

［25］Litwin S E，Katz S E，Weinberg E O，et al.Serial echocardiographic-Doppler assessment of left ventricular geometry and function in rats with pressure-overload hypertrophy.Chronic angiotensin-converting enzyme inhibition attenuates the transition to heart failure［J］.Circulation，1995，91（10）：2642-2654.

［26］Carabello B A，Nakano K，Corin W，et al.Left ventricular function in experimental volume overload hypertrophy.［J］.Am J Physiol，1989，256（4 Pt2）：H974-H981.

［27］Tsutsui H，Spinale F G，Nagatsu M，et al.Effects of chronic beta-adrenergic blockade on the left ventricular and cardiocyte abnormalities of chronic canine mitral regurgitation［J］.J Clin Invest，1994，93（6）：2639-2648.

［28］Young A A，Orr R，Smaill B H，et al.Three-dimensional changes in left and right ventricular geometry in chronic mitral regurgitation［J］.Am J Physiol，1996，271（6 Pt 2）：H2689 -H2700.

［29］Spinale F G，Ishihra K，Zile M，et al.Structural basis for changes in left ventricular function and geometry because of chronic mitral regurgitation and after correction of volume overload［J］.J Thorac Cardiovasc Surg，1993，106（6）：1147 -1157.

［30］鄒操，劉志華，趙彩明，等.超容量負(fù)荷聯(lián)合壓力負(fù)荷制備家兔心衰模型的可行性探討［J］.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué).2005，25（4）：211-214.

［31］曲輔政，劉志華，趙彩明，等。壓力負(fù)荷聯(lián)合超容量負(fù)荷致家兔心力衰竭模型的建立.江蘇醫(yī)藥［J］.2008，34（4）：380 -382.

［32］Christiansen S，Redmann K，Scheld H H，et al.Adriamycininduced cardiomyopathy in the dog--an appropriate model for research on partial left ventriculectomy?［J］.J Heart Lung Transplant，2002，21（7）：783-790.

［33］Arnolda L， Mcgrath B， Cocks M， et al. Adriamycin cardiomyopathy in the rabbit：an animal model of low output cardiac failure with activation of vasoconstrictor mechanisms.［J］.Cardiovasc Res，1985，19（6）：378-382.

［34］Pearce R M. Experimental muocarditis； a study of the histological changes following intravenous injections of adrenalin.［J］.JExp Med，1906，8（3）：400-409.

［35］Grimm D，Elsner D，Schunkert H，et al.Development of heart failure following isoproterenol administration in the rat：role of the renin-angiotensin system.［J］.Cardiovasc Res，1998，37（1）：91 -100.

［36］Muders F，F(xiàn)riedrich E，Luchner A，et al.Hemodynamic changes and neurohumoral regulation during development of congestive heart failure in a model of epinephrine-induced cardiomyopathy in conscious rabbits.［J］.J Card Fail，1999，5 （2）：109-116.

［37］Muders F，Luchner A，F(xiàn)riedrich E B，et al.Modulation of renal blood flow by endogenous endothelin-1 in conscious rabbits with left ventricular dysfunction.［J］.Am JHypertens，1999，12（8 Pt 1）：835-838.

［38］Arber S，Hunter JJ，Ross JJ，et al.MLP-deficientmice exhibit a disruption of cardiac cytoarchitectural organization，dilated cardiomyopathy，and heart failure.［J］.Cell，1997，88（3）：393 -403.

［39］Kubota T， Mctiernan C F， Frye C S， et al. Dilated cardiomyopathy in transgenic mice with cardiac-specific overexpression of tumor necrosis factor-alpha.［J］.Circ Res，1997，81（4）：627-635.

［40］Anderson M E.Calmodulin kinase signaling in heart：an intriguing candidate target for therapy of myocardial dysfunction and arrhythmias.［J］.Pharmacol Ther，2005，106（1）：39-55.

［41］Zhang T，Maier L S，Dalton N D，et al.The deltaC isoform of CaMKII is activated in cardiac hypertrophy and induces dilated cardiomyopathy and heart failure.［J］.Circ Res，2003，92（8）： 912-919.

［42］Toko H，Takahashi H，Kayama Y，et al.Ca2+/calmodulindependent kinase IIdelta causes heart failure by accumulation of p53 in dilated cardiomyopathy.［J］.Circulation，2010，122（9）： 891-899.

［43］Griffiths-Jones S，Saini H K，van Dongen S，et al.miRBase： tools formicroRNA genomics.［J］.Nucleic Acids Res，2008，36 （Database issue）：D154-D158.

［44］Lewis B P，Burge C B，Bartel D P.Conserved seed pairing，often flanked by adenosines，indicates that thousands of human genes are microRNA targets.［J］.Cell，2005，120（1）：15-20.

［45］van Rooij E，Sutherland L B，Liu N，et al.A signature pattern of stress-responsive microRNAs that can evoke cardiac hypertrophy and heart failure.［J］.Proc Natl Acad Sci U S A，2006，103（48）：18255-18260.

［46］Tijsen A J，Creemers E E，Moerland P D，et al.MiR423-5p as a circulating biomarker for heart failure.［J］.Circ Res，2010，106（6）：1035-1039.

［47］Fukushima Y，Nakanishi M，Nonogi H，et al.Assessment of plasmamiRNAs in congestive heart failure.［J］.Circ J，2011，75 （2）：336-340.