殺菌劑螺環(huán)菌胺的氣相色譜分析

張曉銘 黃紅英（浙江省化工研究院有限公司，浙江 杭州 310023）

0 前言

螺環(huán)菌胺（Spiroxamine）是拜耳公司開發(fā)成功的取代胺類殺菌劑。

CAS登錄號(hào)為［118134-30-8］，原藥為棕色液體。純品為淡黃色液體，熔點(diǎn)＜-170℃，沸點(diǎn)120℃（分解），相對(duì)密度0.930（20℃）。螺環(huán)菌胺是一種新型、內(nèi)吸性的葉面殺菌劑，屬于甾醇生物合成抑制劑，能抑制C-14脫甲基化酶的合成，主要用于防治小麥白粉病和各種銹病、大麥云紋病和條紋病，對(duì)白粉病特別有效。作用速度快而且持效期長(zhǎng)，兼具保護(hù)和治療作用。其生產(chǎn)工藝是以對(duì)叔丁基環(huán)己酮為起始原料，加氫還原后與氯甲基乙二醇或丙三醇反應(yīng)，再經(jīng)氯化（或與甲磺酰氯反應(yīng)），最后胺化制得。

由于螺環(huán)菌胺是兩個(gè)異構(gòu)體A（49％～56％）和B（44％～51％）組成的混合物，用內(nèi)標(biāo)法定量測(cè)定其含量時(shí)，很多內(nèi)標(biāo)物重現(xiàn)性差，回收率不好，嚴(yán)重影響異構(gòu)體的比例。為準(zhǔn)確測(cè)定螺環(huán)菌胺的含量，因此選擇以自制的N-乙基-N-正丙基十六胺為內(nèi)標(biāo)物進(jìn)行氣相色譜分析。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀：科曉GC1690，氫火焰檢測(cè)器；1μL微量進(jìn)樣器；色譜柱：OV-1701毛細(xì)管柱（30m×0.32mm×0.25μm）。

內(nèi)標(biāo)物：自制的N-乙基-N-正丙基十六胺（以下用代號(hào)N21），質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99.5％；溶劑：乙醇，分析純；標(biāo)準(zhǔn)品：自制螺環(huán)菌胺，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99.5％。

1.2 色譜分析條件

采用程序升溫法，色譜柱的起始溫度為170℃，停留2min，再以10℃/min的升速升至270℃，停留15min。進(jìn)樣器溫度270℃，F(xiàn)ID檢測(cè)器溫度300℃，氮?dú)猓褐皦?.08MPa，分流比：15：1，進(jìn)樣量0.4μL。進(jìn)樣器襯管中不應(yīng)安裝玻璃毛，即使用進(jìn)口去活玻璃毛也會(huì)引起明顯的樣品吸附，降低重現(xiàn)性。

1.3 溶液配制

1）配制內(nèi)標(biāo)溶液。準(zhǔn)確稱取N21 8.1172g于100mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度，搖勻。

2）配制螺環(huán)菌胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。稱取螺環(huán)菌胺標(biāo)樣2.5041g于25mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度，搖勻。

3）配制螺環(huán)菌胺標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別用移液管準(zhǔn)確移取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液1mL、2mL、3mL、4mL、5mL于10mL容量瓶中，加入內(nèi)標(biāo)液2.0mL，用乙醇定容至刻度，搖勻，得標(biāo)準(zhǔn)溶液1#、2#、3#、4#、5#。

4）配制螺環(huán)菌胺樣品溶液。分別稱取樣品0.1983g于10mL容量瓶中，加入內(nèi)標(biāo)物0.1501g，用乙醇定容至刻度，搖勻。

1.4 測(cè)定方法

設(shè)定上述分析條件，待基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入幾針標(biāo)準(zhǔn)溶液，觀察每次進(jìn)樣螺環(huán)菌胺相對(duì)響應(yīng)值的重復(fù)性，直到相鄰兩次進(jìn)樣的相對(duì)響應(yīng)值變化＜1.0％時(shí)，再按照標(biāo)準(zhǔn)溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液的順序進(jìn)樣。典型的螺環(huán)菌胺氣相色譜圖見圖1：

圖1 螺環(huán)菌胺氣相色譜

2 結(jié)果與討論

2.1 氣相色譜柱的選擇

樣品各組分的分離效果取決于色譜柱的是否正確選擇。采用了SE-30、SE-54、OV-1701、OV-101四種不同極性色譜柱，分別進(jìn)行試驗(yàn)，僅選用OV-1701色譜柱時(shí)，樣品才能夠達(dá)到理想的分離效果，且色譜柱內(nèi)對(duì)樣品的吸附少，重現(xiàn)性好。

2.2 色譜分析條件的選擇

為使螺環(huán)菌胺和內(nèi)標(biāo)物N21能夠完全地分離，準(zhǔn)確分析螺環(huán)菌胺樣品的含量，經(jīng)過試驗(yàn)，最終確定為上述的色譜分析條件，整個(gè)分離過程僅需要15min。

2.3 溶劑的選擇

選用了幾種溶劑試驗(yàn)，只有乙醇不影響內(nèi)標(biāo)峰與樣品峰、雜質(zhì)峰的分離，且樣品和內(nèi)標(biāo)都不會(huì)沉淀析出，因此采用乙醇作溶劑。

2.4 定量方法的選擇

如果采用外標(biāo)法定量，則對(duì)儀器和分析人員的要求很高，且操作誤差大，很難獲得理想的回收率與重現(xiàn)性。

采用內(nèi)標(biāo)法定量，內(nèi)標(biāo)物應(yīng)與被測(cè)組分的相對(duì)分子質(zhì)量和沸點(diǎn)相近、結(jié)構(gòu)相似、且保留時(shí)間相近，相互之間又能得到很好的分離。N21為高沸點(diǎn)三級(jí)胺，不與樣品組分反應(yīng)，保留時(shí)間適宜，與螺環(huán)菌胺分離效果好，完全符合內(nèi)標(biāo)物的要求，所以本實(shí)驗(yàn)最終選擇N21作為內(nèi)標(biāo)物。

2.5 線性測(cè)定

將配好的5個(gè)螺環(huán)菌胺標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣測(cè)定，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液1#、2#、3#、4#、5#平均進(jìn)樣3次，取均值得到表1數(shù)據(jù)如下：

表1 質(zhì)量比/峰面積比

然后以表1的質(zhì)量比mi/ms為橫坐標(biāo)，峰面積比Ai/As為縱坐標(biāo)，繪制內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖2。

圖2 內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線

由圖2可以看出，曲線線性良好，相關(guān)系數(shù)為0.9995。

2.6 方法準(zhǔn)確度及精密度測(cè)定

在已知含量的螺環(huán)菌胺樣品中，加入4個(gè)不同質(zhì)量的螺環(huán)菌胺標(biāo)準(zhǔn)品，在穩(wěn)定的條件下測(cè)定其含量，并計(jì)算回收率。

表2 回收率測(cè)定結(jié)果

從表2可以看出，回收率范圍在97.21％～101.15％之間，可見該方法滿足定量分析要求。

在上述色譜分析條件下，對(duì)三批次樣品分別5次重復(fù)進(jìn)樣，測(cè)定結(jié)果見表3。

從表3可以看出，最大標(biāo)準(zhǔn)偏差0.88％，變異系數(shù)0.91％。

表3 精密度測(cè)定結(jié)果

2.7 質(zhì)量百分含量計(jì)算方法

根據(jù)3.5中得到的曲線擬合公式，得到螺環(huán)菌胺質(zhì)量百分含量計(jì)算公式如下：

Wi％=mi×（Ai/As-0.0213）/（ms×0.8298）×100％

其中Wi為樣品中螺環(huán)菌胺的質(zhì)量百分含量；

mi為樣品質(zhì)量

ms為內(nèi)標(biāo)質(zhì)量

Ai為樣品峰面積

As為內(nèi)標(biāo)峰面積

3 結(jié)論

本研究方法選擇OV-1701毛細(xì)管柱、以N-乙基-N-正丙基十六胺為內(nèi)標(biāo)物，對(duì)螺環(huán)菌胺進(jìn)行定量分析，回收率范圍在97.21％～101.15％，最大標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.88％，變異系數(shù)為0.91％。

本實(shí)驗(yàn)所建立的氣相色譜內(nèi)標(biāo)法測(cè)定螺環(huán)菌胺含量的分析法具有分離效果好、峰形對(duì)稱，無拖尾，定量準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，不但能滿足實(shí)驗(yàn)分析要求，而且能夠應(yīng)用于產(chǎn)品質(zhì)量的監(jiān)測(cè)。

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