清宣止咳顆粒對(duì)急性支氣管炎模型大鼠的影響

湖南省岳陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院（414000）阮斌 胡還甫 余林嵐

急性氣管—支氣管炎是兒科常見、多發(fā)的肺系疾病，屬中醫(yī)咳嗽范疇。清宣止咳顆粒根據(jù)中醫(yī)理論，結(jié)合臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，精心篩選藥物，經(jīng)科學(xué)工藝制備而成。現(xiàn)對(duì)其治療急性支氣管炎的作用機(jī)理進(jìn)行探索，將其對(duì)急性支氣管炎模型大鼠的影響結(jié)果報(bào)道如下：

1 實(shí)驗(yàn)方法

1.1 造模與分組 選日齡3周的幼年Wistar大鼠60只，♀♂各半，隨機(jī)分成6組：①正常組；②模型組；③、④、⑤清宣止咳顆粒高、中、低劑量組；⑥風(fēng)寒咳嗽沖劑（為陽性對(duì)照藥，由云南銘鼎藥業(yè)有限公司生產(chǎn)）組；將②、③、④、⑤、⑥組大鼠放入500ml密閉的玻璃容器內(nèi)，50g卷煙末燃燒煙熏，同時(shí)通入O2（含5%CO2），持續(xù)1h，每天1次，連續(xù)煙熏21天，同時(shí)鼻滴奈氏卡他菌（3億/ml）5滴，每周1次，共3次[1][2]。

1.2 給藥方法 與造模同時(shí)給藥。模型組、正常對(duì)照組分別灌服生理鹽水0.5ml／天，其余組給藥量見結(jié)果，灌胃量為10ml/kg，連續(xù)21天[3]。

1.3 指標(biāo)檢測(cè)

1.3.1 病理學(xué)檢查 造模21天后，于最后1次給藥后1h處死大鼠，取血加肝素抗凝備用，用于細(xì)胞內(nèi)殺菌試驗(yàn)和白細(xì)胞趨向化功能試驗(yàn)。將大白鼠處死后，立即把各組動(dòng)物的氣管、支氣管、連帶肺組織一并固定于10%福爾馬林溶液中，72h后，取出氣管、支氣管組織塊，包埋切片，HE染色，于顯微鏡下觀察。

1.3.2 細(xì)胞內(nèi)殺菌試驗(yàn)[2]①取血并加肝素抗凝血，分離出白細(xì)胞用Hank＇s液配制成5×106/ml細(xì)胞懸液[4]。②用8ml Hank＇s液加2ml新鮮鼠血清配成20%新鮮血清調(diào)理素。③金黃色葡萄球菌，本院微生物教研室保留菌株，取金黃色葡萄球菌將其配制成1×108/ml細(xì)菌懸液。

④按如下操作

⑤計(jì)算

1.3.3 白細(xì)胞趨向化功能試驗(yàn)（瓊脂糖平皿法）按瓊脂糖平皿法制備瓊脂糖平皿，每平皿打24孔，孔距為2.4mm，每行3孔測(cè)定一個(gè)樣本。中間孔加白細(xì)胞懸液5μl，外孔加大腸桿菌24h液體培養(yǎng)物過濾液5μl，同孔加RPMI-1640培養(yǎng)液5μl作對(duì)照。

將上述平皿加蓋后，放入濕盒內(nèi)，置37℃溫育3h。取出后每皿加3ml甲醇30min處理，繼續(xù)加47%中性福爾馬林溶液3ml固定，取出完整的瓊脂層，粘附固定在平皿底層的細(xì)胞用瑞氏染液染色，水洗，待干。用400倍生物顯微鏡測(cè)微尺測(cè)量中間孔向兩側(cè)移行的距離。以中間孔細(xì)胞向外孔（趨化因子）移行的距離為A，向內(nèi)孔（培養(yǎng)液對(duì)照）移行的距離為B，按下式計(jì)算移動(dòng)指數(shù)[3]。

2 結(jié)果

2.1 病理學(xué)檢查 由附表1、附表2可見，清宣止咳顆粒高、中、低劑量組與模型組比較有顯著性差異。提示清宣止咳顆粒對(duì)急性支氣管炎模型大鼠病理損傷有明顯的修復(fù)作用。

2.2 細(xì)胞內(nèi)殺菌試驗(yàn) 由附表3可見，在60min與90min時(shí)，清宣止咳顆粒高、中、低劑量與模型對(duì)照組比較有顯著性差異。提示清宣止咳顆粒有明顯地增強(qiáng)大鼠細(xì)胞內(nèi)殺菌效果。

2.3 白細(xì)胞趨向化功能試驗(yàn)（瓊脂糖平皿法） 由附表4可見，清宣止咳高、中劑量組與模型對(duì)照組比較有顯著性差異。提示清宣止咳顆粒能明顯增加模型大鼠的白細(xì)胞移動(dòng)指數(shù)，提高白細(xì)胞趨向化功能。

3 討論

通過本實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，清宣止咳顆粒對(duì)急性支氣管炎模型大鼠的病理損傷有修復(fù)作用和減輕其損傷作用；能增強(qiáng)模型大鼠細(xì)胞內(nèi)殺菌作用；增加模型大鼠的白細(xì)胞移動(dòng)指數(shù)，提高白細(xì)胞趨向化功能。

附表1 清宣止咳顆粒對(duì)急性支氣管炎模型大鼠病理損傷的修復(fù)結(jié)果

附表2 清宣止咳顆粒對(duì)急性支氣管炎模型大鼠病理損傷的積分結(jié)果

附表3 清宣止咳顆粒白細(xì)胞殺菌試驗(yàn)結(jié)果

附表4 清宣止咳顆粒白細(xì)胞趨向化功能試驗(yàn)結(jié)果