地中海貧血的家系基因調(diào)查

陳祖聰 ，番云華 ，禹祖祥

（德宏州醫(yī)療集團血液科，云南潞西 678400；2.德宏州醫(yī)療集團檢驗科，云南潞西 678400）

海洋性貧血又稱地中海貧血，是嚴(yán)重危害人類健康的遺傳性溶血性貧血，因最早在地中海沿岸民族中發(fā)現(xiàn)故稱為地中海貧血。它是一組常染色體不完全顯性遺傳性慢性溶血性貧血，是由于基因缺失或基因缺陷所致珠蛋白肽鏈合成缺如或不足，引起血紅蛋白成分發(fā)生改變而導(dǎo)致的溶血性疾病[1]。按照肽鏈合成缺陷的不同，分為β海洋性貧血、α海洋性貧血、δ海洋性貧血、δβ海洋性貧血等不同類型，臨床上以β和α海洋性貧血多見。海洋性貧血的發(fā)病不僅有明顯的地域特點，它多發(fā)于地中海沿岸及東南亞沿海國家，我國的廣東、廣西為高發(fā)區(qū)，貴州、云南也有發(fā)現(xiàn)[2]。而且有較明顯的民族特點，在國內(nèi)以壯、苗、瑤、黎等少數(shù)民族多見[3]。德宏位于云南西南地區(qū)，居住多種少數(shù)民族，是我國海洋性貧血的高發(fā)區(qū)，以傣族多見?，F(xiàn)通過4例先證者56例家系調(diào)查基因檢測如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

4例先證者家族成員56例，男性32例，女性24例，傣族38例，漢族18例，年齡6～70歲，平均44.5歲。

1.2 方法

56例均采集血樣，采用PCR和反向點雜交技術(shù)鑒定β-海洋性貧血基因突變類型；采用跨躍斷裂位點PCR技術(shù)和凝膠電泳鑒定α-海洋性貧血基因缺失類型。

2 結(jié)果

2.1 基因及家系調(diào)查圖示

2.2 分析

例1先證者男性，基因型-α3.7/-SEA，在26例家族成員中查出雜合子-α3.79例，純合子-α3.73例、-SEA4例、-α3.7/-SEA5 例、βEM1例，檢出率84.62%。例2先證者女性，基因型17M/βEM，6例家庭成員中查出 17M3例、βEM1例、17M/βEM2例，檢出率100%。例3先證者男性，基因型βEM/βEM，在10例家庭成員中，查出βEM6例，檢出率為60%。例4先證者男性，基因型654M/βEM，在10例家庭成員中查出654M3例、βEM1例、654M/βEM1 例、-SEA2 例（先證者祖父基因型為 αα/-SEA），檢出率為70.0%。56例家族成員中檢出陽性44例（78.6%），4例家系調(diào)查結(jié)果符合地貧遺傳規(guī)律，遺傳性高。

3 討論

海洋性貧血是因遺傳基因突變所致珠蛋白肽鏈合成障礙的一組遺傳性溶血性貧血，為幼年即可發(fā)病的持續(xù)存在的慢性溶血性貧血。貧血程度差別很大，據(jù)基因缺陷程度決定，輕者可無癥狀，重度血紅蛋白很低，影響正常生活及發(fā)育，需間斷輸血維持生命，往往累及重要器官，常合并感染致病情加重或死亡。多數(shù)發(fā)育落后，有不同程度的肝脾大，及特殊地貧面容。少數(shù)有輕度黃疸。該類疾病可防難治，預(yù)防海洋性貧血是一項系統(tǒng)工程，關(guān)鍵是建立婚前檢查和產(chǎn)前診斷制度，避免帶相同海洋性貧血基因的人聯(lián)姻，阻斷海洋性貧血重癥患兒的出生。

德宏位于云南西南地區(qū)，居住著傣族、景頗族、德昂族、阿昌族、傈僳族等多種少數(shù)民族。本院近20年來所接診的貧血病中海洋性貧血病人所占比例較高（24.04%）[4]，而且不斷發(fā)現(xiàn)中、重型患者，有的婦女多胎無幸存者。過去診斷α-地貧主要靠pH8.5、pH6.5醋纖膜電泳和H包涵體檢查，只能查出HbH病（缺失3個α-基因），檢出率僅為0.42%?，F(xiàn)在采用跨躍斷點-聚合酶鏈反應(yīng)（GAP－PCR）技術(shù)、凝膠電泳和紫外光反照射顯影技術(shù)，不僅可檢出中國人群中常見的α3.7、α4.2、__SEA三種基因缺失類型，而且檢出率從1983年的0.42%提高到目前的18.36%，提高了43倍。既往β-海洋性貧血是以HbA2定量、抗堿血紅蛋白（HbF）和紅細(xì)胞滲透脆性試驗為判斷標(biāo)準(zhǔn)，HbA2 3.5%～10%，HbF正常或輕度增高定為輕型β-海洋性貧血；HbF>10%，HbA2正?；蛟龈哒呓Y(jié)合臨床和血象定為中間型或重型β－海洋性貧血；HbA2>10%肽鏈裂解液電泳出現(xiàn)慢β帶定為HbE。此方法不僅漏檢率高，而且容易判斷錯誤?，F(xiàn)在采用PCR反向點雜交技術(shù)，靈敏度高、結(jié)果可靠?？梢詸z測出中國人群常見8個位點和少見9個位點β-海洋性貧血基因突變類型[5]。通過對4例先證者的56例家族成員血樣標(biāo)本，采用跨躍斷點和凝膠電泳技術(shù)及PCR反向點雜交技術(shù)進行海洋性貧血的基因類型檢測，檢出陽性44例（78.65%）。即該項檢測技術(shù)先進安全，具有簡便、快捷和準(zhǔn)確的特點，且靈敏度高，結(jié)果可靠。得出海洋性貧血符合常染色體顯性遺傳，男女均可發(fā)病，代代遺傳[6]，且發(fā)病率高。應(yīng)積極開展社會宣教，遺傳咨詢，婚前檢查，產(chǎn)前基因診斷等措施，以育齡人群、高危家系、高危孕婦等做海洋性貧血的基因檢測，避免帶相同海洋性貧血基因的人聯(lián)姻，遏制海洋性貧血的基因蔓延，阻斷海洋性貧血的重癥患兒出生，以實現(xiàn)優(yōu)生、優(yōu)育，提高人口素質(zhì)，減輕社會和家庭負(fù)擔(dān)。

[1]武淑蘭.現(xiàn)代血液病治療手冊[M].北京:北京醫(yī)科大學(xué)出版社,1998:79-84.

[2]張家平,黃平.現(xiàn)代血液病治療學(xué)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,1997:259.

[3]劉麗華,陳瑛,丁友法,等.浙西南地區(qū)畬民族β海洋性貧血流行病學(xué)的調(diào)查研究[J].中華兒科雜志,2002,40(4):218-221.

[4]陳祖聰,葛世軍.德宏地區(qū)血紅蛋白病在貧血患者中的比例及各民族間的分布情況[J].大理學(xué)院學(xué)報,2007,6(6):259-263.

[5]楊艷秋,葛世軍,番云華,等.德宏地區(qū)地中海貧血社區(qū)群體篩查和基因診斷[J].國際檢查醫(yī)學(xué)雜志,2010,31(6):536-539.

[6]劉麗華,朱安善,王繼超.重癥B—海洋性貧血4例遺傳牲分析[J].中國優(yōu)生遺傳雜志,2003,11(4):127-128.